王学斌
- 作品数：7 被引量：14H指数：2
- 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技重大专项江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鹅生长激素基因内含子2多态性分析被引量：4
- 2008年
- 利用PCR-SSCP方法对籽鹅、皖西白鹅、浙东白鹅和狮头鹅4个地方鹅种进行了单核苷酸多态性分析,共检测到4个突变位点,即360处A/G、474处C/G、551处T/C和554处C/T,产生EE、EF和FF三种基因型。χ2检验结果表明:4个鹅种均处于Hardy-Wenberg平衡状态(P>0.05),籽鹅基因型频率的分布与浙东白鹅差异显著(P<0.05),与狮头鹅差异极显著(P<0.01),皖西白鹅基因型频率的分布与狮头鹅差异显著(P<0.05)。
- 赵文明陈清程金花吴信生王学斌乔娜陈国宏
- 关键词：GH基因
- PEPCK不同启动子调控报告基因表达效率的比较
- 2010年
- 目的构建两种不同的磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)基因启动子调控报告基因表达质粒,比较该启动子在各种细胞系中的表达效率。方法采用PCR克隆大鼠PEPCK启动子1323 bp和560 bp两条片段,将两个PEPCK启动子片段插入pGL4.26-Luc2报告质粒中,将重组质粒转染到肝脏细胞系和脂肪细胞系,以非脂肪或肝脏细胞系做对照,比较PEPCK驱动荧光素酶表达效率。结果通过酶切鉴定及基因测序,证明pGL4.26-PEPCK-Luc2荧光素酶表达质粒构建成功,且能够在体外表达荧光素酶。结论两种同片段的PEPCK启动子在各细胞系中的表达效率差异无显著性。
- 王学斌冯洁杨玉琴谢建云陈国宏
- 关键词：重组质粒磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶
- 东方田鼠三个脂肪肝相关基因的克隆及分析被引量：1
- 2010年
- 目的克隆CYP2E1、CYP2D5、ECHS1三个与非酒精性脂肪肝可能相关基因的cDNA全长基因,为进一步研究非酒精性脂肪肝的发病机制提供依据。方法利用SMART技术构建东方田鼠肝脏cDNA质粒文库,通过PCR方法筛选文库,获得目的菌落,用pBluescript Ⅱ SK通用引物M13R测序,获得基因全长序列,并进行序列分析比较。结果筛选了CYP2E1、CYP2D5、ECHS1三个基因,并获得了它们的全长cDNA序列:CYP2E1基因cDNA全长为1685bp,有1482 bp的完整开放阅读框,编码494个氨基酸;CYP2D5基因cDNA全长为1690 bp,有1514 bp的完整开放阅读框,编码504个氨基酸;ECHS1基因cDNA全长为1013 bp,有873 bp的完整开放阅读框,编码290个氨基酸。这三个基因的核酸序列及其推测的氨基酸序列与人、大小鼠序列高度同源。结论获得了东方田鼠CYP2E1、CYP2D5、ECHS1三个基因全长cDNA序列,并已在Genbank中登录(GQ507485、GQ507486、GQ845171),为东方田鼠非酒精性脂肪肝模型的研究奠定了基础。
- 杨玉琴冯洁王学斌谢建云高诚胡建华
- 关键词：东方田鼠CDNA序列非酒精性脂肪肝
- 鹅GH基因内含子3多态性及其与体重和屠宰性能相关分析被引量：8
- 2008年
- 根据鸭GH基因序列设计引物扩增籽鹅、皖西白鹅和狮头鹅3个地方鹅品种GH基因内含子3片段,并运用PCR-SSCP技术进行单核苷酸多态性分析。结果表明：鹅GH基因内含子3存在多态性,得到AA、AB和BB3种基因型。3个品种中等位基因B占绝对优势,且主要以BB型存在。品种内基因型分布差异不显著,3个品种均处于Hardy-Weinberg平衡状态（P〉0.05）;而品种间,籽鹅与皖西白鹅基因型分布差异显著。基因型与4～10周龄体重、屠体重、半净膛重等19个性状呈显著相关。这19个性状的BB型个体均显著或极显著高于AA型个体,除胸肌率外,BB型个体各性状均值最高,AB型次之,AA型最小。故初步推断BB基因型可作为地方鹅品种高生产性能的分子标记。
- 陈清赵文明程金花乔娜王学斌徐琪陈国宏
- 关键词：GH基因PCR-SSCP体重屠体性状
- 鹅Pit-1基因部分序列多态性分析被引量：2
- 2009年
- 根据鸡Pit-1 mRNA和基因组序列设计1对引物,以籽鹅、狮头鹅、皖西白鹅、四季鹅、浙东白鹅和朗德鹅6个群体的DNA为模板,扩增鹅Pit-1基因的部分片段。结果发现该片段存在2个插入/缺失突变,共出现3种基因型,分别为AA、AB和BB;与AA基因型相比,BB基因型分别在扩增片段的132和145 bp后插入3和13 bp。所有群体在该突变位点上的等位基因频率均处于哈代-温伯格平衡状态(P>0.05);朗德鹅群体基因型分布与其他5个鹅群体均存在极显著差异(P<0.01);籽鹅和狮头鹅群体内基因型的分布与其他3个鹅群体存在显著差异(P<0.05)。在狮头鹅和朗德鹅群体内,等位基因A为优势等位基因,而在皖西白鹅、四季鹅和浙东白鹅群体内等位基因B为优势等位基因。
- 程金花赵文明乔娜王学斌姜庆林张康宁陈国宏
- 关键词：多态性
- 皖西白鹅PIT-1基因的克隆及早期表达规律
- 2011年
- 为获得皖西白鹅PIT-1基因全部编码区序列,探明该基因在皖西白鹅早期发育阶段的表达规律,该研究分别以成年皖西白鹅基因组DNA和垂体总RNA为模板进行PCR和RT-PCR扩增、测序;采用荧光定量PCR技术分别分析皖西白鹅PIT-1基因在0周、2周、4周、7周、10周、15周和30周龄的相对表达量。结果获得了1 014bp的cDNA序列(GenBank accession number.FJ389720),其中编码区的长度为1 011 bp。同源分析结果显示:获得的编码区序列与其他物种的同源性均在60.0%以上,与鸭的同源性高达97.2%,所编码的氨基酸序列与禽类其他物种的同源性在86.0%以上。荧光定量PCR分析结果表明:初生时PIT-1基因在垂体内即有一定水平的表达;4周龄前性别间基因的表达模式存在差异;7周龄后性别间的表达模式趋于一致,表达量下降;到10周龄以后又开始上升,并在15周龄以后趋于稳定。
- 程金花徐琪乔娜王学斌段修军张康宁陈国宏
- 关键词：克隆基因表达
