王佳
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
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- 川芎嗪降低咖啡因诱导的PC12细胞凋亡的研究被引量：3
- 2014年
- 目的分析川芎嗪预处理大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆化细胞株PC12细胞后咖啡因诱导的细胞凋亡情况,探讨川芎嗪治疗脑缺血再灌注损伤的机制。方法采用川芎嗪预处理PC12细胞后,制备咖啡因细胞损伤模型,通过CCK-8法活细胞检测、Hoechst-33342染色、流式细胞术、RT-PCR分析细胞凋亡发生机制。结果川芎嗪预处理后,PC12细胞的存活数提高,细胞未见大量凋亡小体形成、总体凋亡率降低,caspase3、caspase-8、caspase9活性降低,线粒体膜电位提高,Bax/Bcl-2比值降低。结论川芎嗪预处理后能降低咖啡因诱导的PC12细胞凋亡。
- 王佳高峰张春兵
- 关键词：川芎嗪PC12细胞脑缺血性损伤凋亡
- ROX参比荧光在实时荧光定量RT—PCR检测Nrf2 mRNA中的应用被引量：2
- 2011年
- 目的建立大鼠Nrf2mRNA实时荧光定量RT—PCR检测方法，评价ROX参比荧光在其分析中的归一化校正作用。方法采用TaqMan探针法构建大鼠Nrf2mRNA实时荧光定量RT—PCR检测方法；取大鼠混合cDNA的Nrf2PCR产物，经凝胶电泳和测序鉴定反应特异性；取PCR标准品10个浓度梯度（2．0×10^9～2．0×10^0）各1份进行实时荧光定量RT—PCR检测，分析ROX参比荧光校正与否的标准曲线的线性范围的变化；取高、中、低值重组质粒样本各1份进行批内重复20次和批间连续20次实时荧光定量RT-PCR检测，分析ROX参比荧光校正与否的批内、批间重复性差异。结果成功建立大鼠Nrf2mRNA实时荧光定量RT-PCR检测方法；大鼠混合cDNA的Nrf2PCR扩增片段与预期122bp相符，测序结果扩增片段序列正确，PCR特异性好；标准品PCR扩增结果的标准曲线线性范围未经ROX参比荧光校正为2．0×10^9～2．0×10^2拷贝／μl（R2〉0．99），校正后为2．0×10^9～2．0×10^0拷贝／μl（R2〉0．99），校正后线性范围变宽100倍。高、中、低值样本重复性分析结果显示未经ROX参比荧光校正批内ct变异系数（CV）为4．1％、2．7％、2．1％．批间CV为4．3％、3．0％、2．4％，校正后批内CV为0．7％、0．5％、0．4％，批间CV为1．0％、0．8％、0．7％，ROX参比荧光校正后样本ct离散程度均低于未校正组，批内、批间的高值、中值浓度样本（高值组批内和批间t值分别为4．843、2．566，中值组批内和批间t值分别为4．293、4．423，P均〈0．05），但低浓度组的Ct离散度的差异无统计学意义（低值组批内和批间t值分别为0．753、1．279，P均〉0．05）。结论在构建大鼠Nrf2实时荧光定量RT—PCR检测方法中，加入ROX参比荧光，可加宽PCR标准曲线的线性范围，提高检测重复性，为准确分析大鼠模型Nrf2mRNA表达水平奠定了基础。
- 高峰杨学文王佳张春兵
- 关键词：逆转录聚合酶链反应
- 川芎嗪对咖啡因引起的PC12细胞损伤的保护作用被引量：2
- 2014年
- 目的分析川芎嗪对咖啡因引起大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆化细胞株PC12细胞损伤的保护作用,探讨川芎嗪治疗脑缺血-再灌注损伤的机制。方法制备咖啡因细胞损伤模型,通过CCK-8法活细胞检测、流式细胞术线粒体膜电位测定、Western-blot检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、酶联免疫吸附测定(ELISA)检测氧化应激指标观察咖啡因的毒性及川芎嗪的保护作用。结果川芎嗪预处理后,PC12细胞的存活数显著提高,细胞线粒体膜电位提高,HMGB1表达显著降低,超氧化物歧化酶(SOD)上调,乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)下调,谷胱甘肽(GSH)升高。结论川芎嗪对咖啡因引起的PC12细胞损伤有显著的保护作用,其保护作用可能与川芎嗪抑制细胞凋亡、调节炎症性递质表达水平及氧化应激反应相关。
- 王佳高峰张春兵
- 关键词：川芎嗪PC12细胞脑缺血-再灌注
- 川芎嗪对二甲酰胺引起的PC12细胞损伤的保护作用被引量：3
- 2014年
- 目的分析川芎嗪对二甲酰胺引起大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆化细胞株PC12细胞损伤的保护作用,探讨川芎嗪治疗脑缺血再灌注损伤的机制。方法采用川芎嗪预处理PC12细胞后,制备二甲酰胺细胞损伤模型,CCK-8法检测细胞毒性、流式细胞术分析Caspase-3、8、9、Western blot检测HMGB1、ELISA检测氧化应激指标观察二甲酰胺的毒性及川芎嗪的保护作用。结果川芎嗪预处理后,PC12细胞的存活数显著提高,Caspase-3和Caspase-9活性降低,未见HMGB1表达降低,SOD上调,LDH和MDA下调,GSH升高。结论川芎嗪对二甲酰胺引起的PC12细胞损伤有显著的保护作用,但其保护作用可能与川芎嗪抑制细胞凋亡、调节氧化应激反应相关。
- 王佳高峰张春兵
- 关键词：川芎嗪PC12细胞脑缺血再灌注损伤
- 加味犀角地黄汤对人微血管内皮细胞侵袭的影响及其作用机制研究被引量：5
- 2017年
- 目的探讨加味犀角地黄汤对人微血管内皮细胞(h MVECs)侵袭的影响及其作用机制的研究。方法利用Transwell小室检测h MVECs细胞迁移能力,ELISA法检测其对MMP2、MMP-9的表达影响;荧光定量PCR检测VEGF,Ang1、TGF-β等相关基因的表达。结果加味犀角地黄汤能够抑制人微血管内皮细胞的侵袭,随着药物浓度的增加抑制作用逐渐明显。加味犀角地黄汤能有抑制人微血管内皮细胞中MMP2、MMP-9的表达,且能够抑制VEGF,Ang1、TGF-β等相关基因的表达。结论加味犀角地黄汤可能的机制是通过抑制VEGF、Ang1、TGF-β相关基因的表达和MMP2、MMP-9蛋白水平的表达,来调控以人血管微内皮细胞的侵袭,从而到达治疗类风湿关节炎的目的。
- 高峰滕凤猛王佳杨学文
- 关键词：犀角地黄汤基质金属蛋白酶
- 加味犀角地黄汤含药血清对人微血管内皮细胞增殖的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨加味犀角地黄汤含药血清对人微血管内皮细胞(h MVECs)增殖的影响。方法:利用CCK-8检测h MVECs细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的改变。结果:加味犀角地黄汤含药血清能够抑制人微血管内皮细胞的增殖,随着浓度的增加抑制作用逐渐明显,加味犀角地黄汤含药血清能使人微血管内皮细胞阻滞在S期,含药血清组明显高于正常对照组;且能够促进其细胞的凋亡。结论:加味犀角地黄汤含药血清可以抑制人血管微内皮细胞的增殖,且能够引起细胞周期的改变,诱导细胞凋亡。
- 王佳高峰杨学文
- 关键词：加味犀角地黄汤细胞凋亡增殖
