王伯华
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：南昌大学生命科学与食品工程学院食品科学与技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 橙色红曲菌pyrG缺陷株的筛选及鉴定
- 2010年
- [目的]筛选和鉴定橙色红曲菌pyrG缺陷株。[方法]以橙色红曲菌AS3.4384(Monascus aurantiacus)为出发菌株,运用紫外照射致基因突变,随后对尿嘧啶依赖型菌株的pyrG基因进行测序比对,筛选pyrG基因突变株,最后用含有米曲霉pyrG基因的pAOP互补质粒对其进行基因转化试验。[结果]经紫外诱变得到一株尿嘧啶依赖型的5-FOA抗性菌株UM28。扩增其pyrG基因并进行测序,发现UM28的pyrG基因在核苷酸序列+220bp的位置发生了突变,进而导致氨基酸水平上Pro→Ser的突变,造成了乳清苷-5'-磷酸脱羧酶的失活。UM28通过基因转化能够接受含有米曲霉pyrG基因的互补质粒恢复野生表型,且回复突变率低于10-8,能够用于红曲菌同源转化系统的构建。[结论]获得了一株红曲菌pyrG基因缺陷株UM28,它可被用作基因工程的受体菌。
- 王伯华许杨李燕萍
- 关键词：紫外诱变
- 红曲菌转化系统的研究进展被引量：3
- 2010年
- 红曲菌是重要的工业微生物,具有广阔的研究应用前景。综述了近年来红曲菌遗传转化体系的研究进展,并指明了红曲菌转化系统的研究方向。
- 王伯华许杨李燕萍
- 关键词：红曲菌
- 橙色红曲菌乳清苷-5'-磷酸脱羧酶基因的克隆
- 2010年
- 根据已报道的真菌乳清苷-5′-磷酸脱羧酶(pyrG)氨基酸序列,采用CODEHOP策略设计简并引物,从橙色红曲菌(Monascus aurantiacus)的基因组DNA中克隆得到pyrG基因片段。然后运用PCR法筛选橙色红曲菌Fosmid文库,获得了pyrG基因全长(GenBank登录号:GU723506)。经过blastx比较发现,橙色红曲菌pyrG基因与AspergillusflavusNRRL3357的氨基酸序列同源性最高,达到81%。该基因能够作为筛选标记应用于橙色红曲菌同源转化系统。
- 王伯华许杨李燕萍
- 关键词：橙色红曲菌基因克隆
- 红曲菌乳清酸－5′－磷酸脱羧酶基因及其用途
- 红曲菌乳清酸－5′－磷酸脱羧酶基因及其用途，属于微生物基因技术领域，本发明包括具有SEQ ID NO.1序列的红曲菌乳清酸－5′－磷酸脱羧酶基因，或与SEQ ID NO.1序列具有至少80％同源性的同系物，以及该基因或其...
- 许杨李燕萍王伯华
- 文献传递
- 橙色红曲菌中基于pyrG标记的同源转化系统的建立
- 本文采用CODEHOP策略设计简并引物,从橙色红曲菌/(Monascus aurantiacus/)的基因组DNA中克隆得到pyrG基因片段,然后运用PCR法筛选红曲菌Fosmid文库,获得了pyrG基因全长。以橙色红曲...
- 王伯华
- 关键词：橙色红曲菌
- 文献传递
