温泽星
- 作品数：12 被引量：43H指数：5
- 供职机构：甘肃农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省科技支撑计划甘肃省中青年科技研究基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 急性冷应激对牦牛乳腺上皮细胞HSP70 mRNA表达的影响被引量：4
- 2015年
- 本文主要研究了急性冷应激对牦牛乳腺上皮细胞热休克蛋白70(Heat stress protein,HSP70)表达量的影响。采用实时荧光定量PCR技术,以急性冷刺激10℃为典型研究环境,分析了HSP70 mRNA表达的变化规律。结果显示,乳腺上皮细胞在10℃分别冷处理2 h、4 h、6 h和8 h,其HSP70 mRNA的表达量变化均不显著(P>0.05);分别在10℃冷处理2 h、4 h、6 h和8 h,再复温培养4 h,HSP70 mRNA的表达量均极显著增加(P<0.01),于6 h达到峰值;在10℃先冷处理4 h,然后分别复温2 h、4 h、6 h和8 h,HSP70 mRNA的表达量亦均显著增加(P<0.01),并于4 h达到峰值。结论:急性冷应激诱导牦牛乳腺上皮细胞HSP70表达量的增加不是发生在冷处理过程中,而是发生在复温过程中,并且在一定范围内随冷处理时间的增长表达量增高。
- 景慕娴崔燕杨琨温泽星刘鹏刚申青峰余四九
- 关键词：牦牛乳腺上皮细胞HSP70冷应激
- HSPA2在牦牛不同组织器官中的表达差异被引量：5
- 2014年
- 【目的】探索热休克蛋白70-2(heat shock 70kD protein-2,HSPA2)在牦牛不同组织器官中的表达差异。【方法】选取3头1岁龄的健康青海高原雄性牦牛为研究对象,在正常生理条件下,于2013年9月中旬采集不同组织器官(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑和睾丸)样本。(1)从牦牛不同组织器官中提取RNA,将RNA反转录成第一链cDNA,参照牦牛HSPA2和β-actin基因序列(登录号为KC790105.1和DQ838049.1)设计特异性引物,首先采用RT-PCR来验证实时荧光定量PCR(RT-qPCR)是否能应用于牦牛不同组织器官中HSPA2表达差异的测定;然后采用RT-qPCR测定牦牛不同组织器官中HSPA2相对表达量的差异。(2)将牦牛不同组织器官样本4%多聚甲醛固定,制成石蜡切片,免疫组织化学法测定HSPA2在不同组织器官中的分布。采用Image-Pro Plus 6.0软件进行免疫组化图像分析,测定HSPA2阳性反应物的积分光密度,进行吸光度分析;通过SPSS 19.0统计软件,用单因素方差分析进行差异显著性测定。【结果】(1)RT-PCR结果表明RT-qPCR法可用于牦牛不同组织器官中HSPA2表达差异的测定。实时荧光定量PCR结果表明,HSPA2在睾丸中的相对表达量,分别是在脑、肾脏、心脏、脾脏、肺脏和肝脏中的83.33、97.09、111.11、133.33、222.22和285.71倍。(2)免疫组织化学结果显示,牦牛睾丸、肾脏、脑、心脏、肺脏、肝脏和脾脏中均有HSPA2的阳性表达。其中,在牦牛肾脏皮质肾小管、髓质肾小管,大脑皮质海马CA1区、小脑皮质,心肌细胞,肺泡上皮细胞,肝细胞,脾脏边缘区和红髓中有HSPA2阳性反应,着色深浅不等,大部分阳性反应位于细胞质,细胞核阳性反应极少;而在睾丸曲精小管中生精细胞细胞质和细胞核中均有HSPA2阳性反应,着色深浅不等;阴性对照组未观察到阳性反应。根据积分光密度值比较得出,HSPA2蛋白的阳性表达量在睾丸中最高,脑、肾脏、心脏、肺脏和肝脏次�
- 温泽星余四九翟羽佳杨琨刘鹏刚何俊峰崔燕
- 关键词：牦牛实时荧光定量PCR免疫组化
- LHR在牦牛肾和卵巢中表达情况的研究被引量：2
- 2015年
- 为了探讨牦牛肾中黄体生成素受体(LHR)的表达情况,分析肾中LHR与卵巢中LHR表达的相似性,选取青海省健康的3头2岁龄雌性牦牛,根据黄牛LHR基因序列5′端和3′端的保守性设计特异性引物,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测牦牛肾和卵巢组织中LHR基因的表达量,并运用免疫组织化学法对LHR蛋白在牦牛肾和卵巢组织中表达情况进行定位研究。RT-qPCR结果显示,牦牛肾组织中LHR mRNA的相对表达量是卵巢的79.75倍。免疫组织化学结果显示,LHR在牦牛肾组织的近曲小管和远曲小管呈阳性反应,在卵巢组织中卵泡颗粒层呈明显的阳性反应;LHR在牦牛肾和卵巢中的表达量之间差异极显著(P<0.01)。结果表明,牦牛的肾组织与卵巢组织一样,均具有表达LHR的特性,提示肾可通过调节LHR参与牦牛的繁殖性能。
- 胡威陈虹潘阳阳温泽星孙政东熊力樊江峰崔燕余四九
- 关键词：牦牛卵巢实时荧光定量PCR免疫组织化学法
- HSP27基因在母牦牛生殖器官和孤雌激活胚胎中的表达
- 通过克隆牦牛热休克蛋白27(heat shock proteins27,HSP27)基因,分析其生物学特性,探讨正常生理条件下HSP27基因在繁殖周期母牦牛主要生殖器官及不同时期牦牛孤雌激活胚胎中的表达差异,来阐明HSP...
- 何翃闳潘阳阳李秦陈平温泽星李谷月蒋佳颖余四九
- 文献传递
- 生殖激素调控发情周期中牦牛输卵管特异性糖蛋白分泌的研究
- 输卵管是一种高度活跃的分泌器官,它使得配子的成熟、配子和胚胎的运输、受精和早期的胚胎发育得以在最理想的环境中进行。哺乳动物发情周期内,输卵管在形态、生理及生化方面发生了很大的变化,为排卵期哺乳动物的受精提供必要环境。输卵...
- 温泽星彭秀梅张译夫杨融潘阳阳余四九
- 文献传递
- Oct 4在牦牛卵母细胞及早期胚胎发育过程中的表达被引量：11
- 2017年
- 旨在通过检测转录因子Oct 4(Octamer-binding transcription factor 4)在牦牛(Bos grunneins)卵母细胞成熟及早期胚胎发育过程中的表达,分析Oct 4在卵母细胞与体外受精胚胎发育过程中的作用。本研究收集牦牛卵丘-卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complexes,COCs)对其进行体外成熟培养,生产体外受精(In vitro fertilization,IVF)胚胎,评估各时期胚胎发育能力。采用实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和间接免疫荧光染色方法从基因和蛋白水平检测COCs和胚胎各时期Oct 4的表达与分布。结果表明,1)2~4-细胞胚胎、5~8-细胞胚胎、9~16-细胞胚胎和囊胚的发育率分别为(64.66±1.76)%、(43.33±1.76)%、(24.66±2.40)%和(9.33±0.67)%。2)COCs和胚胎各发育时期均可检测到Oct 4基因,其中9~16-细胞胚胎表达最高,依次为囊胚、2~4-细胞胚胎和5~8-细胞胚胎,未成熟COCs和成熟COCs中表达最低。3)免疫荧光染色结果显示,OCT 4蛋白主要分布在COCs和体外受精胚胎的细胞质中,在细胞核中表达较弱。免疫荧光IOD值分析可得,9~16-细胞胚胎IOD值最高,依次为囊胚、2~4-细胞胚胎,5~8-细胞胚胎最低。综上表明,Oct 4在牦牛卵母细胞和早期胚胎发育过程中的各个时期均有表达,且不同时期该基因的表达量存在差异。由此说明Oct 4在9~16-细胞胚胎时期可能参与胚胎合子型基因转录激活的调控过程,在囊胚时期可能参与维持内细胞团全能性的过程。
- 赵天李谷月潘阳阳李月琴陈平温泽星崔燕余四九
- 关键词：OCT牦牛体外受精胚胎发育
- 表皮生长因子对牦牛卵丘细胞低氧诱导因子-1α表达的影响及与凋亡的关联性分析被引量：5
- 2016年
- 旨在研究EGF是否通过调控HIF-1α抑制牦牛卵丘细胞凋亡。本研究在牦牛卵丘细胞体外培养时加入不同浓度的EGF,运用qRT-PCR和免疫荧光技术检测HIF-1α、Bcl-2和Bax的表达,用一步法TUNEL检测不同处理组卵丘细胞的凋亡情况。结果表明:(1)牦牛卵丘细胞体外培养液中添加不同浓度的EGF后,卵丘细胞HIF-1α和Bax mRNA的相对表达量降低,Bcl-2 mRNA的相对表达量增加,且具有浓度依赖性;当EGF浓度为50ng·mL^(-1)时,HIF-1α和Bax mRNA的相对表达量最低,Bcl-2mRNA的相对表达量最高。(2)向其体外培养液中添加不同浓度的EGF后,卵丘细胞HIF-1α和Bax蛋白的相对表达量降低,Bcl-2蛋白的相对表达量增加,且具有浓度依赖性;当EGF浓度为50ng·mL^(-1)时,HIF-1α和Bax蛋白的相对表达量最低,Bcl-2蛋白的相对表达量最高。(3)TUNEL凋亡检测表明,对照组中卵丘细胞凋亡率最高,当EGF浓度为25ng·mL^(-1)时,细胞凋亡率显著降低(P<0.05);当EGF浓度为50ng·mL^(-1)时,细胞凋亡率最低(P<0.05),但随着EGF浓度的增加,卵丘细胞的凋亡率又升高。本研究结果表明,EGF可通过调控HIF-1α抑制卵丘细胞凋亡,其作用可能与线粒体介导的Bax和Bcl-2凋亡途径相关。
- 张译夫潘阳阳温泽星余四九
- 关键词：凋亡卵丘细胞牦牛
- CSF2在牦牛体外受精胚胎发育中的作用机制研究
- 牦牛是青藏高原土生动物的典型代表之一,同时它也是青藏高原地区最重要的家畜品种之一。但是,牦牛的繁殖效率很低,仅仅两年一胎或者三年两胎。因此,辅助生殖技术可能是最有希望提高牦牛繁殖效率的工具。众所周知,CSF2可以提高啮齿...
- 温泽星
- 关键词：牦牛体外受精胚胎应激反应
- 文献传递
- HSPA2在牦牛不同器官中的表达差异
- [目的]本研究旨在探索热休克蛋白70-2(Heat Shock70kDa Protein-2, HSPA2)在牦牛不同器官中的表达差异。[方法]选取3头1岁龄的健康青海高原雄性牦牛为研究对象，在正常生理条件下，于2013...
- 温泽星
- 关键词：牦牛不同器官实时荧光定量PCR免疫组化
- 文献传递
- HSP27在黄体期牦牛主要生殖器官中表达差异的研究被引量：6
- 2015年
- 为了探讨正常生理条件下牦牛热休克蛋白27(HSP27)在黄体期牦牛主要生殖器官中的表达差异,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测了HSP27基因在黄体期牦牛卵巢、输卵管和子宫中的相对表达量,用Western-blot和免疫组织化学SP法研究了HSP27蛋白在黄体期牦牛卵巢、输卵管和子宫中的表达量和组织内分布。RT-qPCR分析表明,HSP27基因在黄体期牦牛卵巢、输卵管和子宫中均有表达,其中卵巢中的表达量分别是输卵管和子宫组织的1.03倍和4.63倍。免疫组织化学结果表明,牦牛卵泡膜内层、颗粒层、输卵管黏膜上皮、子宫内膜上皮和子宫腺中均有HSP27阳性表达。Western-blot和免疫组织化学结果表明,HSP27蛋白在黄体期牦牛各主要生殖器官组织中表达差异极显著(P<0.01),其中在卵巢中表达量最高,在子宫中表达量最低。本试验结果表明,HSP27在黄体期牦牛的各个主要生殖器官中存在表达差异,这为进一步研究HSP27在哺乳动物生殖过程中发挥的作用提供了理论依据。
- 何翃闳潘阳阳杨雪崔燕吕鹏樊江峰陈平温泽星李谷月余四九
- 关键词：热休克蛋白27牦牛实时荧光定量PCR
