涂玲
- 作品数：41 被引量：107H指数：6
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- 输血相关急性肺损伤对SD大鼠巨噬细胞活化和共刺激分子CD40表达的影响被引量：4
- 2015年
- 目的观察输血相关急性肺损伤（transfusion—related acute lung injury，TRALI）SD大鼠肺泡巨噬细胞活化及共刺激分子CD40表达，探讨其在TRALI发病机制中的作用。方法SD大鼠60只，随机（随机数字法）分为正常对照组、脂多糖对照组、TRALI组和阳性对照组各15只。正常对照组采用假手术处理；脂多糖对照组大鼠经腹腔注射脂多糖（2ms／kg，≤1min完毕），2h后静脉输注生理盐水（约1mL／只）；TRALI组腹腔注射脂多糖（2mg／kg）2h后静脉输注血浆（约1mL／只）；阳性对照组静脉输注脂多糖（5ms／kg）诱导急性肺损伤。光镜观察肺组织病理变化；应用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）测定活化巨噬细胞（activatedmacrophage，AMφ）中TLR4表达；电泳迁移率变动分析（EMSA）检测AMφ核提取物中NF—KB的活性；Northernblot检测CIM0mRNA表达，流式细胞术检测CD40蛋白表达；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF一α、MIP-2及IL-1β的含量。结果TRALI组和阳性对照组大鼠肺泡隔断裂、肺间质充血及肺泡腔中性粒细胞浸润；活化AM表面TLR4的表达升高、NF．KB活性增强、共刺激分子CD40mRNA和蛋白显著表达，与正常对照组和脂多糖对照组比较差异具有统计学意义（均P〈0．01）。TRALI组BALF中TNF-α、MIP-2、IL-1β的表达水平均显著高于正常对照组和脂多糖对照组（P均〈0．05）。结论AMφ能上调其表面共刺激分子的表达，促进炎细胞因子的释放，增强获得性免疫反应介导的急性肺损伤，提示AM活化可能在TRALI的发生过程中发挥一定作用。
- 魏明涂玲刘佳梁颖红龚艳杰张宜花杨璐
- 关键词：急性肺损伤巨噬细胞TOLL样受体-4
- 乳腺癌CD4^+ CD25^(high) Foxp^(3+)调节性T细胞数量和分布及Foxp3mRNA表达与肿瘤分期的相关性研究被引量：5
- 2012年
- 目的研究乳腺癌患者CD4+CD25high Foxp3+调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)的存在数量、分布情况,及其功能基因Foxp3mRNA的表达变化与国际抗癌联盟(UICC)乳腺癌的TNM分期的关系。方法用四色流式细胞术以Foxp3-FITC/CD25-PE/CD4-PerCP/CD3-PC7抗体组合分析40名健康对照者及40例乳腺癌患者(临床TNM分期T1期9例、T2期10例、T3期12例、T4期9例)外周血、肿瘤组织浸润淋巴细胞(TIL)及癌旁淋巴结中CD4+CD25high Foxp3+Treg的数量及分布情况。实时荧光定量PCR技术检测TregFoxp3mRNA表达水平。结果乳腺癌患者外周血CD4+CD25high Foxp3+Treg占CD4T细胞的百分比为(8.91±3.06)%,高于正常健康对照组(5.84±2.63)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌患者TIL、癌旁淋巴结中Treg占CD4+T淋巴细胞比例均高于外周血,差异有统计学意义(P均<0.01)。乳腺癌组织TIL和癌旁淋巴结中Treg的Foxp3平均荧光强度(MFI)显著高于外周血(P<0.05)。T1、T2、T3、T4期乳腺癌患者Treg比例分别为(5.81±1.89)%、(6.52±2.15)%、(9.65±3.14)%、(11.86±2.43)%。乳腺癌患者外周血单个核细胞Foxp3mRNA表达水平明显高于健康对照组(P<0.01)。相关分析显示,Treg数量与肿瘤TNM分期显著相关(r=0.7 576,P<0.01);Foxp3基因mRNA表达水平与乳腺癌TNM各分期呈显著相关性(r=0.6 129,P<0.05)。结论乳腺癌患者CD4+CD25high Foxp3+Treg的数量升高,其增高程度与肿瘤临床分期呈显著正相关。乳腺癌患者外周血和癌组织局部Treg的数量、分布情况及特异性转录因子Foxp3mRNA的表达强度均有所不同,提示这可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制,CD4+CD25high Foxp3+Treg将来可作为乳腺癌患者病情进展的重要判断指标之一。
- 魏明涂玲梁颖红刘佳龚艳杰张俊华张宜花
- 关键词：肿瘤分期特异性转录因子
- 臭氧暴露对哮喘大鼠CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T淋巴细胞数量和Foxp3mRNA表达的影响被引量：5
- 2013年
- 目的 探讨低浓度臭氧暴露对支气哮喘大鼠CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞数量及转录因子Foxp3mRNA表达的影响.方法 将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、臭氧暴露组、哮喘组和臭氧暴露哮喘组,每组15只.哮喘组采用卵清白蛋白（OVA）致敏并吸入激发制备哮喘模型,正常对照组雾化生理盐水,臭氧暴露组予吸入低浓度臭氧,臭氧暴露哮喘组于每日雾化激发OVA前给予低浓度臭氧吸入.流式细胞仪检测外周血CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞占CD4＋T细胞的比例,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血和肺组织γ-干扰素（γ-INF）以及白细胞介素-4（IL-4）含量;聚合酶链反应（PCR）检测肺组织Foxp3mRNA表达水平.结果 哮喘组大鼠CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞占CD4T细胞的比例为6.12％±1.03％,臭氧暴露组为5.87％±1.26％,均低于正常对照组（9.85％±1.34％）;臭氧暴露哮喘组CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞占CD4T细胞的比例为（3.31％±0.85％）,低于正常对照组和哮喘组,差异均有统计学意义（P＜0.01）.哮喘组大鼠血浆和肺组织中IL-4含量[血浆：（21.83±5.12） ng/L,肺组织：（0.89±0.13） ng/L]高于正常对照组[血浆：（10.58±2.73） ng/L）,肺组织：（0.32±0.11） ng/L],差异有统计学意义（P＜0.01）;臭氧暴露哮喘组血浆和肺组织中IL-4含量[血浆：（35.47±7.24） ng/L,肺组织：（1.58±0.43） ng/L]高于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义（P＜0.01）.哮喘组血浆和肺组织中γ-INF含量[血浆：（61.78±23.45） ng/L,肺组织：（0.69±0.21） ng/L]低于正常对照组[血浆：（158.89±60.23） ng/L,肺组织：（1.86±0.29） ng/L],差异有统计学意义（P＜0.01）,臭氧暴露哮喘组γ-INF含量[血浆：（10.28±2.63） ng/L,肺组织：（0.46±0.12） ng/L低于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义（P＜0.01）.臭氧暴露哮喘组和哮喘组Foxp3mRNA表达低于
- 魏明涂玲梁颖红刘佳龚艳杰张俊华张宜花
- 关键词：臭氧哮喘T淋巴细胞转录因子
- 膀胱癌CD4^＋CD25^highFoxp3^＋调节性T淋巴细胞数量和分布及Foxp3基因表达与肿瘤分期的相关性被引量：4
- 2011年
- 我们用四色流式细胞术准确界定CD4^＋CD25^highFoxp3^＋Treg，实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术检测Treg的特异性功能基因Foxp3mRNA的表达水平，分析不同分期膀胱癌患者的该群细胞数量、膀胱癌不同部位的分布及Foxp3的表达差异与膀胱癌临床TNM分期的关系，探讨Treg在膀胱癌患者中表达水平及临床意义。
- 魏明酒涛涂玲梁颖红刘佳张俊华张俊峰
- 关键词：FOXP3肿瘤分期膀胱癌基因表达调节性
- 脐血CD34~+细胞在MG患者胸腺移植裸鼠体内的分化研究
- 研究目的 重症肌无力(myasthenia gravis, MG)是器官特异性自身免疫性疾病,基本发生机制是机体产生针对乙酰胆碱受体(acetyl-choline receptor, AchR)的自身抗体,封闭了神经肌肉...
- 涂玲
- 关键词：胸腺移植裸鼠CD34
- 文献传递
- 输血相关急性肺损伤对大鼠血浆和肺组织血管生成素-2表达的影响被引量：12
- 2016年
- 目的探讨输血相关急性肺损伤(TRALI)时血浆和肺组织中血管生成素-2(Ang-2)的表达及其意义。方法选择60只SD大鼠,按随机数字表法分为生理盐水(NS)对照组、脂多糖(LPS)对照组、TRALI模型组、急性肺损伤(ALI)对照组,每组15只。采用"LPS-血浆二次打击"法复制TRALI大鼠模型。NS对照组腹腔注射NS 2 mL,移除大鼠血液1 mL后输注等体积NS。LPS对照组大鼠腹腔注射2 mg/kg LPS(1 min内注完)1 mL 2 h后静脉输注等体积NS。TRALI模型组腹腔注射2 mg/kg LPS 1 mL,2 h后静脉输注血浆1 mL。ALI对照组静脉输注5 mg/kg LPS 1 mL诱导ALI。制模完成后处死大鼠取肺组织观察病理学改变并进行肺损伤评分;取支气管肺泡灌洗液(BALF)检测细胞总数、中性粒细胞比例(NEUT);用蛋白质免疫印迹试验(Western Bolt)检测血浆中Ang-2蛋白表达;免疫组化法观察肺组织中Ang-2阳性表达;实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠肺组织中Ang-2 mRNA表达水平。结果光镜下可见,NS对照组大鼠肺组织结构清楚,肺泡壁结构完整,肺泡内未见炎性细胞渗出及肺泡萎陷,肺泡间隔均一无增宽;LPS对照组肺泡间隔轻度增宽、有少量炎性细胞浸润;TRALI模型组肺泡间隔增宽、中等量出血并有较多炎性细胞浸润;ALI对照组肺内大量炎性细胞浸润,间质水肿加重,伴出血、微血栓及灶性肺不张。ALI对照组、TRALI模型组血浆Ang-2蛋白和肺组织Ang-2 mRNA表达均显著高于NS对照组、LPS对照组[Ang-2蛋白(灰度值):0.58±0.09、0.43±0.07比0.12±0.03、0.20±0.05,Ang-2 mRNA(2^(-ΔΔCt)):0.39±0.10、0.29±0.09比0.10±0.05、0.16±0.04,P均<0.01];ALI对照组、TRALI模型组BALF细胞总数(×10~6/L:361±78、310±76比101±63、165±65)、NEUT(0.396±0.125、0.335±0.115比0.098±0.035、0.114±0.041)均明显高于NS对照组和LPS对照组(P均<0.05);ALI对照组、TRALI模型组病理学评分、肺湿重/体重比值和动脉血氧分压(PaO_2)均显著高�
- 龚艳杰魏明涂玲刘佳梁颖红张宜花杨璐
- 关键词：肺损伤输血相关血管生成素-2
- 输血相关急性肺损伤患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T淋巴细胞变化的临床意义被引量：2
- 2014年
- 目的检测输血相关急性肺损伤（TRALI）患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T淋巴细胞（Treg）的计数及其功能基因又头框蛋白3（Foxp3）mRNA的表达水平，以及探讨其与疾病预后的关系。方法收集2008年6月至2011年11月期间健康体检者（对照组，n=30）和重症监护病房收治的TRALI患者[TRALI组，n=26，TRALI组按预后又分为死亡组（n=5）和存活组（n=21）]外周抗凝血，采用流式细胞术分析各组T细胞亚群。采用四色流式细胞术以Foxp3-FITC／CD25-PE／CD4-PerCP／CD3-PC7抗体组合检测各组受试者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg的计数，比较死亡组和存活组患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg的水平。实时荧光定量PCR技术检测特异性转录因子Foxp3mRNA的表达水平，并分析患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg的比例与Foxp3mRNA的表达水平的关系。结果TRALI患者与对照组健康人间CD3＋T细胞、CD3＋CD4＋T细胞计数的差异无统计学意义，而CD3＋CD8＋T细胞则较对照组增加（P〈0．05），CD4＋／CD8＋比值降低（P〈0．05）。死亡组CD3＋CD8＋T细胞比例高于存活组（P〈0．05），C133＋T细胞、CD3＋CD4＋T细胞比例和CD4＋／CD8＋比值则低于存活组（均P〈0．05）。TRALI患者外周血CD4＋CD2.5high Foxp3＋Treg计数为（8．86±3．14）％，明显高于健康对照组（5．67±2．43）％（P〈0．05）。TRALI死亡组患者外周血CD4＋CD2shighFoxp3＋Treg计数为（11．23±3．79）％，显著高于存活组患者（7．69±3．21）％（P〈0．05）。TRALI患者外周血Foxp3mRNA的表达水平为（3．77±2．73）×10^5拷贝/ug，显著高于对照组（0．43±0．21）×10^5拷贝／μg（P〈0．05）。TRALI患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg计数与Foxp3mRNA的表达水平呈正相关（r=0．5131，P〈0．05）。结论TRAM患者外周血CD4＋CD.5highFoxp3＋Treg和Foxp3mRNA的变化可能是导致TRALI疾病发展的关键因素之一，与�
- 魏明刘佳涂玲梁颖红龚艳杰张宜花
- 关键词：输血外周血
- 髓系细胞触发受体-1在输血相关性急性肺损伤大鼠肺组织的表达被引量：3
- 2015年
- 目的观察髓系细胞触发受体（TREM-1）在输血相关性急性肺损伤（TRALI）SpragueDawley（SD）大鼠肺组织中的表达及其在TRALI发病机理中的作用。方法sD大鼠55只，随机分为TRALI组（n=25）、正常对照组（n=10）和阳性对照组（n=20）。TRALI组腹腔注射脂多糖（LPS）2mg／kg2h后静脉输注人血浆（1ml／只）；正常对照组腹腔注射生理盐水2mg／kg，移除1mJ大鼠血液后及时输注等体积生理盐水；阳性对照组静脉输注LPS5mg／kg诱导急性肺损伤。3组分别于造模后6h留取外周血及肺组织，采用荧光实时定量反转录多聚酶链反应法（RT-PCR）检测大鼠外周血及肺组织TREM-1mRNA；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠外周血及肺组织TREM-1和肿瘤坏死因子（TNF）-α浓度；HE染色进行大鼠肺组织Smith病理损伤评分。Spearman相关性分析TRALI组TREM-1mRNA、TNF-α和Smith病理损伤评分3者之间的相关性。结果TRALI组和阳性对照组大鼠肺组织TREM-1mRNA的表达（4．96±0．08、6．35±0．09）高于正常对照组（1．01±0．00）（均P〈0．05），血TREM-1mRNA的表达（9．85±3．23、12．33±3．56）也高于正常对照组（2．15±0．35）（均P〈0．05）。TRALI组大鼠肺组织和血TREM-1浓度[（695．25±116．87）、（703．80±100．67）ng／L]高于正常对照组[（234．51±44．38）、（240．22±46．63）ng／L]（均P〈0．05），但与阳性对照组差异无统计学意义（均P〉0．05）。TRALI组大鼠肺组织和血TNF-α浓度[（288．26±35．53）、（276．26±39．53）ng／L]显著高于正常对照组[（216．34±33．45）、（220．60±38．30）ng／L]（均P〈0．05），但与阳性对照组差异无统计学意义（均P〉0．05）。TRALI组Smith病理损伤评分（7．46±0．95）显著高于正常对照组（0．32±0．28）（P〈0．05），与阳性对照组（8．65±0．72）差异无统计学意义（P〉0．05）。TRALI组大鼠肺组织Smith
- 涂玲梁颖红魏明刘佳龚艳杰张宜花
- 关键词：急性肺损伤髓系细胞触发受体-1肿瘤坏死因子Α病理评分
- 创伤后多器官功能障碍综合征患者外周血髓源抑制细胞细胞的表达
- 2015年
- 目的探讨创伤后多器官功能障碍综合征(MODS)患者外周血髓源抑制细胞(MDSCs)的表达在诊断MODS疾病严重程度和预后判断中的临床意义。方法分别采集66例MODS患者、78例非MODS患者和37例健康志愿者外周血,以CD14-CD11b+CD33+作为MDSCs的标志,采用流式细胞术检测MDSCs细胞的表达;以MODS评分评估疾病严重程度;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并分析患者MDSCs的表达与疾病严重程度评分和IL-10和TNF-α水平的相关性。结果 MODS患者外周血CD14-CD11b+CD33+细胞表达为(11.84±2.18)%明显高于非MODS组的(6.52±0.37)%和健康对照组的(1.18±0.22)%(P<0.05);MODS患者死亡组(15.66±1.68)%较存活组(9.48±1.56)%明显升高(P<0.05)。MODS患者血清IL-10、TNF-α水平较非MODS组和健康对照组明显增高(P<0.05)。MODS患者中死亡组血清IL-10、TNF-α水平较存活组明显升高(P<0.05);相关分析显示,MODS患者外周血CD14-CD11b+CD33+细胞表达率与TNF-α水平和MODS评分成正相关(r分别为0.342 6、0.387 9,P<0.05)。结论外周血MDSCs水平变化可能与疾病的严重程度和预后相关。
- 刘佳魏明涂玲梁颖红龚艳杰张宜花
- 关键词：创伤后多器官功能障碍综合征全身炎症反应综合征
- 微小核糖核酸-146a对寻常型银屑病患者CD4^＋T细胞调控作用研究被引量：3
- 2015年
- 目的研究微小核糖核酸-146a（miRNA-146a）对寻常型银屑病患者外周血CD4^＋T淋巴细胞的调控，并探讨miRNA-146a在寻常型银屑病发病中的作用。方法收集寻常型银屑病患者30例和正常对照20例。采用实时定量PCR检测外周血CD4^＋T淋巴细胞miRNA-146a表达水平；免疫磁珠法分选外周血CD4^＋T淋巴细胞，将分离的细胞分为对照组、miRNA-146a组和miRNA-146a抑制物组，进行细胞培养，流式细胞术检测Th1和Th2数量；蛋白免疫印迹法和实时定量PCR分别检测IFN-1受体α（IFN-γRα）、T细胞表达T盒（T—bet）、鸟嘌呤腺嘌呤胸腺嘧啶腺嘌呤序列结合蛋白-3（GATA-3）蛋白和mRNA的表达；酶联免疫吸附试验检测血浆和体外细胞培养上清液IFN-γ、白细胞介素（IL）-4表达水平。结果寻常型银屑病患者外周血CD4^＋T淋巴细胞miRNA-146a与血浆IFN-1表达较正常对照组升高[（2．43±0．94）vs（1．05±0．23），（27．69±7．64）ng／L vs（9．75±2．81）ng／L]，差异均有统计学意义（t值分别为6．651和4．237，P均〈0．01），且miRNA-146a的表达与血清IFN-γ呈正相关（r=0．837，P〈0．01）。体外CD4^＋T淋巴细胞培养结果显示，与对照组比较，miRNA-146a组Th1数量、T-bet蛋白和mRNA表达、培养液上清IFN-γ水平显著增加，IFN-γRα蛋白表达降低，差异均有统计学意义（P均〈0．01）；Th2数量、GATA-3蛋白、GATA-3和IFN-1Rd的mRNA表达及培养液上清IL4水平无明显改变（P均〉0．05）；miRNA-146a抑制物可有效地阻断miRNA-146a对Th1细胞的调控作用。结论miRNA-146a通过影响Th1细胞的分化和功能参与对寻常型银屑病患者外周血CD4^＋T淋巴细胞的调控，在寻常型银屑病发病过程中可能发挥着一定的作用。
- 魏明涂玲梁颖红刘佳龚艳杰张宜花
- 关键词：寻常型银屑病微小核糖核酸
