沈琮
- 作品数:5 被引量:17H指数:2
- 供职机构:山东省医学科学院更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 山东肥城寒武纪竹叶状石灰岩菌群分析被引量:2
- 2009年
- 为了探讨微生物活动与地层形成的关系,对山东肥城万灵山寒武纪竹叶状石灰岩中的微生物进行了培养分离,用PCR方法获得了它们的16S DNA序列,通过序列比对确定了这些微生物的种属,并对这些细菌进行了系统发育进化分析。结果表明这些细菌属于芽胞杆菌属(Bacillus)、节杆菌属(Arthrobacter)及未培养细菌(Un-cu ltured bacterium),万灵山竹叶状石灰岩的微生物菌群分布以革兰阳性芽胞杆菌占优势。
- 李鹏李志会金琳琳岳盈盈万言珍沈琮高川孟红
- 关键词:菌群
- 金黄色葡萄球菌蛋白A的原核表达及生物亲和特性研究被引量:7
- 2009年
- 目的构建金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)基因片段的表达载体,并在大肠杆菌表达系统中进行表达,探讨该重组蛋白与不同来源IgG结合的生物学特性。方法利用PCR法扩增SPA基因片段,将该段基因克隆到pET30a(+)表达载体,转化感受态BL21大肠杆菌细胞,IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE及Westen-blot鉴定目的蛋白。His亲和层析纯化后分别与人、小鼠、兔、猪及山羊血清反应,分析其与不同来源IgG的亲和关系。结果构建的pET30a(+)-SPA表达载体在大肠杆菌BL21中可表达SPA蛋白,且发现其与人及小鼠源IgG具有较高亲和性,与兔及猪源IgG亲和性较低。结论该重组蛋白SPA与人及小鼠源免疫球蛋白IgG具有较高亲和性,为下一步应用于SPA-ELISA打下基础。
- 李志会岳盈盈李鹏宋楠楠沈琮赵元昊孟红
- 关键词:葡萄球菌蛋白A原核表达亲和性
- 山东部分地区病毒性脑炎的病原学分析
- 目的:
1.病原学分离
建立微量高通量、多细胞谱病毒分离模型,对脑炎患者的脑脊液标本进行分离培养,获得病毒株,为病毒鉴定和分子流行病学研究奠定基础。
2.病毒鉴定
用分子生物学方法...
- 沈琮
- 关键词:病毒性脑炎病毒分离肠道病毒属病毒鉴定亲缘关系
- 文献传递
- 微量高通量细胞培养法在脑炎病毒分离中的应用
- 2009年
- 目的建立用微量高通量、多细胞谱培养法分离未明原因脑炎患儿中病毒的方法,探讨脑炎患儿中肠道病毒的感染情况。为大量、及时分离病毒、病毒鉴定和分子流行病学研究奠定基础。方法将8株不同的细胞接种于96孔细胞培养板中,每种细胞接种一行,细胞长成单层后孔内接种脑脊液标本,每孔5~10μl,每份标本纵向接种8孔(8种细胞系),35℃、5%CO2培养。出现细胞病变(cytopathic effect,CPE)者传代培养两次。两次均出现CPE者视为细胞培养阳性,-70℃保存用于病毒鉴定。将培养物首先用肠道病毒通用引物做逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)并测序,进行初步筛查。结果93份标本中有56份出现明显的CPE,病毒分离率为60.22%(56/93),其中在MA104细胞出现病变者40份,阳性率为43.01%。其中6份培养物的RNA用肠道病毒通用引物得到了扩增,序列测定确定为肠道病毒。结论微量多细胞培养法具有简便、快速等特点,适合用于病毒的初步筛查。
- 沈琮李志会李鹏岳盈盈孟红
- 关键词:细胞系肠道病毒属病毒分离
- 肠道病毒种系发生研究的新进展被引量:8
- 2009年
- 肠道病毒(Enterovirus,EV)属于小RNA病毒科肠道病毒属,可导致手足口病、无菌性脑膜炎、脑炎、脊髓灰质炎等多种神经系统相关的疾病。在乙型脑炎病毒得到有效控制后,肠道病毒已上升为我国病毒性脑炎的第一位病原。近年来,分子分型方法结合种系发生分析的应用使人们对肠道病毒遗传进化特点有了更加深入的了解。本文将对此做简要综述。
- 沈琮孟红
- 关键词:肠道病毒种系发生进化