林峰
- 作品数:8 被引量:0H指数:0
- 供职机构:天津大学更多>>
- 相关领域:生物学金属学及工艺轻工技术与工程化学工程更多>>
- 亲和融合谷胱甘肽巯基转移酶制备重组人白细胞介素-6
- 将人白细胞介素-6(IL-6)表达为谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白的原始菌株E.coliJM109,表达产物主要为无活性的包含体,包含体中的融合蛋白难以复性,不能用亲和纯化回收.从原始菌株中撮的表达质粒pHZ181...
- 林峰
- 关键词:融合蛋白
- 文献传递
- 一种材料氢脆的显微硬度表征方法
- 本发明公开了一种材料氢脆的显微硬度表征方法,该方法包括材料预处理和显微硬度法,采用显微硬度法分别测量未进行阴极保护的试样和在不同阴极保护电位下持续保护24小时后的试样的显微硬度,然后经过对比发现,试样在过保护条件下发生氢...
- 高志明林峰刘永长修妍韩夏冰
- 文献传递
- 贯流发电机用钢阴极保护技术及效果评价
- 阴极保护技术,随着现代科学技术的发展与进步已日趋完善,被公认为是海水环境中金属防护最有效的方式之一。贯流发电机由Q235,16Mn,304L和316L等多种材料组成,其共同保护需要进一步研究。本文通过模拟实验来确定阴极保...
- 林峰
- 关键词:阴极保护EIS显微硬度空泡腐蚀
- 文献传递
- 亲和色谱法从融合蛋白GST-IL-6中纯化重组人白细胞介素-6(英文)
- 2002年
- 研究用亲和融合谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)的方法纯化重组人白细胞介素 6(IL 6)的发酵和纯化工艺 ,使用含有质粒pHZl818的E .coliJMl0 9在 2XYT培养基中进行发酵表达 ,IL 6表达为与谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)融合的融合蛋白GST IL 6.融合蛋白存在可溶的活性蛋白和不可溶的包含体两种形式 ,此包含体无活性且无法复性 ,无法用亲和层析回收 ,通过实验优化摇床发酵的诱导温度和转速 ,以增加可溶融合蛋白的表达 .菌体超声破碎液后 ,上清液用作亲和柱层析 ,可将融合蛋白提纯至 80 00 ,每升发酵液可得 10mg融合蛋白 ,用凝血酶裂解处理 6h ,亲和标志物GST被特异性切除 ,裂解得到的IL 6用离子交换柱层析可纯化至 95 00 ,MTT法测得纯化的IL 6生物学活性为 1.0 2× 10 8IU/mg .
- 吴蕾甘一如林峰黄鹤
- 关键词:融合蛋白GST
- 重组人白细胞介素-6融合蛋白的大肠杆菌发酵工艺
- 1999年
- 研究了重组大肠杆菌表达人白细胞介素-6(rhIL-6)融合蛋白的发酵工艺。摇瓶实验对比了不同培养基对重组菌密度和rhIL-6表达量的影响,确定了以含0.1%葡萄糖的2×YT培养基为最适培养基。同时,还对诱导剂异丙基疏基半乳糖苷(IPTG)加入量进行优化,按每升发酵液加入0.02mmol,就能有效诱导rhIL-6的表达。在10 L发酵罐间歇实验中,以含0.1%葡萄糖的2×YT为培养基,比较了溶氧、pH、诱导前培养时间、诱导后培养时间对rhIL-6的表达量和菌密度的影响,得到最优培养条件为pH为6.8~7.0,接种量4%,温度37℃,诱导前溶氧量30%,在O.D._(600)为1.2~1.8时加入IPTG诱导,控制诱导后溶氧为5%~10%,再培养5 h,最终rhIL-6表达量为38%,菌体密度为5.8 g/L。
- 甘一如胡飞雄张瑛林峰马兰芳
- 关键词:融合蛋白发酵重组大肠杆菌化学诱导
- 亲和纯化重组人白细胞介素-6
- 1999年
- 研究了利用亲和融合谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的方法纯化重组人白细胞介素-6(IL-6)的发酵和纯化工艺,使用含有质粒pHZ1818的E.coli JM109在2×YT培养基中进行发酵表达,IL-6表达为与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)融合的融合蛋白GST-IL-6。融合蛋白存在可溶的活性蛋白和不可溶的包含体两种形式,此包含体无活性且无法复性,无法用亲和层析回收,因而通过实验优化了摇床发酵的诱导温度和转速以增加可溶融合蛋白的表达。菌体超声破碎液上清液用亲和柱层析,可将融合蛋白提纯至80%,每升发酵液可得到10 mg融合蛋白,用凝血酶裂解处理6 h,亲和标志物GST被特异性切除,裂解得到的IL-6用离子交换柱层析可纯化至95%,MTT法测得纯化的IL-6生物学活性为1.02×10~8 IU/mg。
- 林峰王贺玲甘一如
- 关键词:融合蛋白GST
- 一种铝合金着有色复合膜的制备方法
- 本发明公开了一种铝合金着有色复合膜的制备方法,该方法包括前处理和直流电解着色,直流电解着色采用由H<Sub>2</Sub>SO<Sub>4</Sub>、CuSO<Sub>4</Sub>、EDTA和水组成的复合电解液,其中...
- 高志明林峰
- 文献传递
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- 本发明公开了一种铝合金着有色复合膜的制备方法,该方法包括前处理和直流电解着色,直流电解着色采用由H<Sub>2</Sub>SO<Sub>4</Sub>、CuSO<Sub>4</Sub>、EDTA和水组成的复合电解液,其中...
- 高志明林峰