李思袖
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 具有中和活性抗人类腺病毒单克隆抗体的制备、鉴定及应用被引量：2
- 2009年
- 目的:制备具有中和活性抗人类腺病毒(HAdv)单克隆抗体(mAb),并进行鉴定与应用。方法:以活的人类腺病毒3型(HAdv-3)滴鼻免疫BALB/c鼠,用细胞融合技术制备抗HAdv的mAb细胞株,采用中期分裂相秋水仙素阻抑法对mAb细胞株染色体进行分析;使用鼠mAb亚型鉴定试剂盒进行抗体亚型鉴定,通过ELISA、Western blot和间接免疫荧光技术进行特异性鉴定。建立HAdv-3感染动物模型,用获得的HAdv-3 mAb进行保护性研究。结果:细胞融合率为86%,抗HAdv抗体阳性孔率为51.4%。鉴定1株杂交瘤细胞(1A4),染色体数为98条,抗体亚类属IgG2a/κ,抗体腹水ELISA效价达10-5。ELISA、Western blot和间接免疫荧光证实该mAb特异性好。该mAb对HAdv-3感染动物有保护性作用。结论:成功地制备具有中和活性的抗HAdv mAb。该mAb识别的是HAdv六邻体蛋白,对HAdv-3感染动物有保护作用。
- 李思袖张国成许东亮聂晓晶李小青汪志华张学红
- 关键词：腺病毒单克隆抗体中和活性
- 西安地区EV71感染手足口病的临床特征被引量：11
- 2010年
- 目的了解西安地区EV71感染手足口病患儿的临床特征。方法采集手足口病患儿的疱液和(或)咽拭分泌物进行RT-PCR检测;分析EV71感染手足口病患儿的临床特征。结果 96例手足口病患儿中28例为EV71感染;男女比为1.8∶1;0～5岁27例(96.4%);19例为城区患儿(67.9%),其中幼托机构和小学患儿19例(67.9%)。临床表现中发热16例(57.1%),发热多发生在出疹之前;出疹部位为手足24例(85.7%)、臀部11例(39.3%)、肛周5例(17.9%)、膝部16例(57.1%)、肘部5例(17.9%),臀部皮疹以1岁以下患儿为主(81.8%,9/11);所有患儿均痊愈,病程5～11 d,无后遗症。获得了2008年西安地区EV71流行株,将核苷酸序列提交NCBI Genbank,获得核苷酸登录号EU812461。结论本次流行发生于春末夏初;5岁以下儿童是主要感染人群;幼托机构和小学患儿占比例高,可能与EV71经接触传播有关;给予对症治疗后均痊愈。
- 聂晓晶张国成李思袖李亚绒许东亮孙新张学红李小青
- 关键词：肠道病毒71型手足口病儿童
- 抗呼吸道合胞病毒免疫噬菌体抗体库的构建及初步鉴定
- 2008年
- 目的:构建小儿呼吸道合胞病毒感染患者人源性噬菌体抗体库,搭建人源性抗体制备的技术平台,为小儿呼吸道合胞病毒感染发病机制的研究、诊断、治疗和预防提供新的有效途径。方法:从52例呼吸道合胞病毒感染患儿外周血淋巴细胞中提取总RNA,并逆转录为cDNA。用PCR扩增轻链和重链Fd段(即重链的可变区和第一恒定区)基因,并将扩增的轻链和重链基因片段克隆于pComb3x噬粒载体,电转化XL1-Blue大肠杆菌,经辅助噬菌体M13K07超感染后构建成Fab段噬菌体抗体库。对此抗体库双酶切进行鉴定,并用呼吸道合胞病毒颗粒作抗原进行初步筛选。结果:经过重轻链基因的重组,成功构建一免疫噬菌体抗体基因库,共有2.6×106个不同的克隆菌,其中70%的克隆均含有轻链和重链Fd基因。因此,所构建的噬菌体抗体库的库容量为1.8×106,经初步筛选,抗体库得到了不同程度的富集。结论:利用基因重组技术和噬菌体展示技术,成功构建小儿呼吸道合胞病毒感染患者人源性免疫噬菌体抗体库,为进一步的研究奠定了基础。
- 汪治华张国成许东亮孙新李小青李思袖张学红聂晓晶豆玉凤
- 关键词：抗体库噬菌体展示技术FAB抗体呼吸道合胞病毒
