李富珍
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
- 供职机构:徐州医学院更多>>
- 发文基金:江苏省高校自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- Calbindin-D28K经PI-3K/Akt信号通路抑制6-OHDA诱导的DA神经元凋亡
- 本实验研究了PI3 K/A KT信号转导通路在Calbindin-D28K(CaBP)抑制6-OHDA诱导的DA神经元凋亡中的作用。以pcDNA3-GFP转染MN9D细胞作为对照,用含有CaBP cDNA的真核表达载体p...
- 孙申李富珍高秀先朱园园陈静朱孝荣袁红花高殿帅
- 小鼠Calbindin-D28k基因体外表达及其抗凋亡作用的研究
- 2010年
- 目的:研究钙结合蛋白D28k(calbindin-D28k,CaBP)体外表达及其对神经元细胞抗凋亡作用。方法:RT-PCR从小鼠脑组织中扩增出小鼠CaBP的cDNA片段;重组构建pTH-CB质(pcDNA3-TH-CB),脂质体包裹pTH-CB质粒转染MN-9D细胞(多巴胺能杂交瘤神经元细胞);RT-PCR、免疫沉淀法检测CaBP的cDNA在细胞内表达情况;Hoechst染色、Caspase-3活性检测、AnnexinV/PI法对CaBP过表达的抗凋亡作用进行检测。结果:小鼠脑组织RT-PCR扩增出785bp条带,测序结果与Genebank中报道完全一致。脂质体包裹重组构建pTH-CB质粒转染MN-9D细胞后,转染pTH-CB质粒的MN-9D细胞中,CaBP的mRNA表达量和CaBP水平显著高于转染pc-DAN3组和正常MN-9D细胞组(P<0.05),3种细胞凋亡检测方法结果显示,CaBP过表达的细胞抗凋亡能力显著提高。结论:体外克隆CaBP的cDNA能在细胞内表达,过表达的CaBP通过抑制细胞的caspase-3活性,起抗凋亡作用。
- 朱孝荣朱园园李富珍袁红花孙怀昌高殿帅
- 关键词:基因表达凋亡小鼠