朱烨
- 作品数：70 被引量：249H指数：9
- 供职机构：第二军医大学长征医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会基础研究重点项目上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- B细胞激活因子水平ELISA检测方法的建立及临床初评被引量：2
- 2004年
- 目的:建立血清B细胞激活因子(B lymphocyte stimulator,BlyS)水平的ELISA检测方法,并初步探讨其临床价值。方法:以商品化的抗人BlyS单克隆抗体、生物素化抗人BlyS多克隆抗体,采用双抗夹心法自行建立BlyS血清水平的ELISA检测方法;并对80例风湿性疾病患者［50例系统性红斑狼疮(SLE)、20例类风湿关节炎(RA)、10例干燥综合征(SS)］、60例自身免疫性肝病患者［35例原发性胆汁性肝硬化(PBC)、25例自身免疫性肝炎(AIH)］和40例正常人的血清BlyS水平进行检测。结果:成功建立血清BlyS水平的ELISA检测法且重复性较好,80例风湿性疾病患者的血清BlyS水平为(8.23±1.42)ng／ml,60例自身免疫性肝病患者为(3.40±0.79)ng／ml,40例正常人的血清BlyS水平为(3.19±0.88)ng／ml。与正常人相比,风湿性疾病组的BlyS血清水平明显升高(P<0.01),而自身免疫性肝病组的BlyS血清水平升高则不明显。结论:本研究所建立的BlyS血清水平ELISA检测方法简便、可靠、准确,为后续研究BlyS与自身免疫性疾病尤其是风湿性疾病的关系奠定了基础。
- 周琳屠小卿朱烨刘海英陆慧琦候晓菁陈洁谭龙益孔宪涛仲人前
- 关键词：B细胞激活因子酶联免疫吸附测定自身免疫疾病
- 用重组M2三联体抗原建立原发性胆汁性肝硬化免疫检测法被引量：8
- 2002年
- 目的 建立原发性胆汁性肝硬化 (PBC)特异性免疫学检测方法。方法 在重组质粒表达的基础上 ,用亲和层析进一步纯化重组蛋白后 ,用酶免疫吸附法检测M2抗体。结果 在PBC组 1 1例患者中全部检出M2抗体 ,阳性率为 1 0 0 % ,而非PBC组 75例患者中无一检出M2抗体。本法与病理检查和临床诊断的相关性有非常显著意义 (P <0 .0 1 )。结论 本法检测M2抗体有较好的敏感性及特异性 。
- 姜小华仲人前胡寅范列英王皓朱烨侯晓菁孔宪涛
- 关键词：胆汁性肝硬化自身抗体免疫测定质粒原发性PBG
- 人源抗-HBs Fab表达系统的转换与效果被引量：1
- 2004年
- 目的:重新克隆抗-HBs Fab基因于pBAD载体,改变诱导方式与表达条件,提升原核表达人源抗体片段的经济性与实用性。方法:经3次基因扩增,分步克隆,将Fd、Lc与pBAD／Lc基因先后插入到pBAD载体中,形成单载体双启动、定向表达形式。筛选双重插入菌落,阿拉伯糖诱导表达,PAGE和Western印迹鉴定抗一HBs Fab的表达效果。结果:酶切克隆载体,琼脂糖电泳证实Fd和pBAD／Lc基因的正确插入;PAGE可见明显的相对分子质量近50 000的蛋白区带,Western印迹显示该区带确为Fab;HBsAg特异印迹表明表达产物具有抗原结合活性。结论:比较原pComb3表达系统,改变后的pBAD表达系统明显提高了抗-HBs Fab的表达量(可达70 mg／L)并保持了抗体活性,为该抗体的批量制备与临床应用提供了条件。
- 韩焕兴陆慧琦郑大勇叶伟民朱烨罗荣城
- 关键词：抗-HBSFAB基因表达
- 自身免疫性肝病148例临床特点分析被引量：10
- 2006年
- 目的分析自身免疫性肝病(autoimmune liver diseases,ALDS)的临床、生化及自身抗体特点。方法分析我院1996年-2005年148例ALDS患者其中自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)患者52例,原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosi,PBC)患者96例的临床表现,并分析有关实验室检查资料。结果两组患者临床症状均不典型,肝功能各项指标普遍异常,AIH组以ALT升高更为明显,而PBC组患者ALP和GGT升高更为显著(P<0.01)。在自身抗体检测情况两组有极大的差异。AIH患者主要以高效价的抗核抗体(antinuclear antibodies,ANA)(44/52)和/或抗平滑肌抗体(antismooth muscle antibodies)(35/52)为主,此外,尚有9.6%(5/52)和3.8%(2/52)的AHI患者出现抗可溶性肝抗原抗体(auti-soluble liver antigen autoantibdies,抗SLA)和抗肝/肾微粒体(liver/kidney microsomal,LKM)抗体阳性。PBC组以抗线粒体抗体(mitahondrial anto-antibodies,AMA)阳性(99.0%)为主,93.8%的患者AMAM2阳性。结论AIH及PBC的诊断可结合临床、生化、自身抗体检查的结果,其中自身抗体的检测尤为重要。
- 屠小卿朱烨周琳吴萍耿红莲竺蓓顾鹏飞仲人前
- 关键词：自身免疫性肝炎原发性胆汁性肝硬化自身抗体
- 原发性胆汁肝硬化患者血清中抗线粒体抗体及其亚型和抗核抗体的联合检测的临床价值被引量：1
- 2006年
- 为了分析原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者的抗线粒体抗体(anti-mitochondria antibody,AMA)及其M2、M4、M9亚型、抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)的阳性率。应用间接免疫荧光法检测ANA、AMA,免疫斑点法检测AMA M2、M4、M9。结果显示91例PBC患者中AMA有89例为阳性。其中96.7%(88/91)的患者M2型阳性,45.1%(41/91)M4型阳性,2.2%(2/91)M9型阳性。39/91例患者ANA阳性,其中21例为核膜型。ANA、AMA及其M2、M4、M9亚型联合检测对于PBC患者的诊断有重要价值。
- 朱烨屠小卿周琳仲人前孔宪涛
- 关键词：原发性胆汁性肝硬化抗线粒体抗体抗核抗体
- 转化生长因子-β1在原发性胆汁性肝硬化患者血清中的表达及临床意义研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在原发性胆汁性肝硬化患者(PBC)及慢性乙型肝炎患者血清中的表达水平及其临床意义。方法应用ELISA方法检测30例PBC患者、20例慢性乙型肝炎患者和30例健康对照血清TGF-β1浓度;同时检测血清γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)浓度,比较TGF-β1与临床指标的相关性。结果PBC和慢性乙型肝炎患者血清TGF-β1水平明显高于健康对照组(P<0.01),但两疾病组之间差异并无统计学意义(P>0.05);PBC患者血清GGT和ALP水平明显高于健康对照和疾病对照(慢性乙型肝炎)组(P<0.01),慢性乙型肝炎患者组亦明显高于健康对照组(P<0.01);PBC患者血清TGF-β1与GGT及ALP呈显著的相关性,而慢性乙型肝炎患者相关性并不明显。结论PBC患者血清TGF-β1水平明显上调且与GGT及ALP呈显著相关性,表明TGF-β1的异常表达可能与PBC的肝内胆管损伤及其严重程度有关。
- 朱烨杨再兴梁艳李畅仲人前
- 关键词：转化生长因子-Β1原发性胆汁性肝硬化慢性肝炎
- 他克莫司在临床检测中的方法学比较
- 目的通过方法学比较为临床推荐一种更精确可靠的检测方法并为临床用药提供科学客观的参考依据。方法以目前常用的酶联免疫法(ELISA)和微粒子酶免疫(MEIA)技术,检测58例肝移植和肾移植患者血清中他克莫司的浓度,比较两者间...
- 叶伟民陆慧琦朱烨李畅韩焕兴
- 关键词：他克莫司酶联免疫法微粒子酶免法
- 文献传递
- 系统性红斑狼疮患者血清B细胞激活因子水平的检测被引量：15
- 2005年
- 目的建立检测血清B细胞激活因子(B lym phocyte stim ulator,BlyS)水平的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,并检测系统性红斑狼疮(SLE)患者的血清BlyS水平,初步探讨BlyS与SLE发病机制的关系。方法以商品化的抗人BlyS单克隆抗体、生物素化抗人BlyS多克隆抗体,采用双抗夹心法建立检测BlyS血清水平ELISA方法。对59例SLE确诊患者和40名正常健康献血者的血清BlyS水平、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)浓度、自身抗体[抗双链DNA抗体(抗dsDNA抗体)]滴度进行检测,比较SLE患者的血清BlyS水平与免疫球蛋白浓度、自身抗体滴度的相关性。结果59例SLE患者的血清BlyS水平为(8.4±1.6)ng/m l,40名正常人的血清BlyS水平为(3.2±0.9)ng/m l,SLE组的BlyS血清水平明显高于正常人组(P<0.01);且伴随着血清BlyS水平的升高,SLE患者的血清IgG浓度明显升高(r=0.442,P=0.0005);SLE患者的BlyS血清水平与抗dsD NA抗体的滴度也有明显的相关性(r=0.850,P<0.01)。结论本研究所建立的BlyS血清水平ELISA检测方法简便、可靠、准确,为后续研究BlyS与其他自身免疫性疾病的关系奠定了基础。SLE患者的血清BlyS含量是明显升高的,并伴随着血清IgG浓度、抗dsD NA抗体滴度的升高;提示Blys异常表达可能是SLE发病的重要环节,其对自身反应性B细胞的活化。
- 周琳屠小卿朱烨陆慧琦许臻范列英侯晓菁孔宪涛仲人前
- 关键词：B细胞激活因子抗DSDNA抗体BLYS特异性自身抗体血清IGG健康献血者
- 人Toll样受体3基因表达水平的实时荧光定量PCR测定被引量：3
- 2007年
- 目的建立检测人Toll样受体3（TLR3）mRNA表达水平的实时荧光定量逆转录PCR（FQ-RT-Pert）法，及探讨其在外周血单个核细胞（PBMC）中的表达水平。方法用Beacon Designer2．1软件设计TLR3基因特异性引物和荧光探针，逆转录扩增目的片段，构建重组体pMD18-T-TLR3作为定量标准品。在ABIPrism7000型荧光定量分析仪上，通过荧光强度达到一定阈值时的循环数来定量起始模板，建立标准曲线；并检测30名正常人及20例原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者，20例慢性乙型肝炎肝硬化患者外周血PBMCTLR3基因的荧光强度，根据标准曲线及循环阈值，由软件自动计算样本中TLR3mRNA的起始拷贝数。结果FQ-RT-PCR检测TLR3基因的线性范围为10^2～10^8拷贝数／μl RNA（r=0．9974），内参β-actin的线性范围为10^3～10^8拷贝数／μl RNA（r=-0．9984）；高浓度样本批内和批间变异系数（CV）分别为6．7％和8．7％，低浓度样本批内及批间CV分别为12．3％和14．0％，30名健康人，20例PBC及20例慢性乙型肝炎肝硬化患者PBMC中均有TLR3 mRNA的表达，分别为3．46×10^2～4．51×10^3拷贝／μg RNA、4．92×10^2～1．42×10^4拷贝／μg RNA和2．58×10^2～7．17×10^3拷贝／μg RNA。结论成功建立检测TLR3 mRNA的FQ-RT-PCR方法，可作为临床和基础研究TLR3基因表达的工具。
- 杨再兴梁艳李畅曾贤铭朱烨仲人前
- 关键词：TOLL样受体3单个核细胞聚合酶链反应
- 自身抗原BCOADC-E2融合蛋白的重组表达和鉴定
- 2006年
- 周晔姚定康陈燕朱烨蒋廷旺吴传勇钱琤邓安梅仲人前
- 关键词：融合蛋白纯化鉴定自身抗原原发性胆汁性肝硬化抗线粒体抗体
