朱慧新 作品数:14 被引量:86 H指数:6 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 留学回国人员科技活动基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 更多>>
唐古特山莨菪毛状根对去氢表雄酮的生物转化 被引量:9 2004年 目的 通过生物转化对去氢表雄酮进行结构修饰 ,以期获得更有意义的转化产物。方法 利用唐古特山莨菪毛状根液体悬浮培养体系对去氢表雄酮进行生物转化 ,通过柱色谱及制备薄层色谱进行分离纯化 ,利用核磁共振、ESI MS等光谱鉴定结构。结果 分离得到了 5个转化产物 ,即 :androst 4 ene 3,1 7 dione (I) ;6α hydroxyandrost 4 ene 3,1 7 dione (II) ;6α ,1 7β dihydroxyandrost 4 ene 3 one(III) ;androst 4 ene 3,6 ,1 7 trione (IV) ;1 7β hydroxyandrost 4 ene 3 one (V)。结论 所得到的 刘颖 程克棣 朱平 冯文化 孟超 朱慧新 何慧霞 马小军关键词:毛状根 去氢表雄酮 生物转化 结构修饰 蝙蝠蛾拟青霉与冬虫夏草关系的分子系统学研究 被引量:35 2008年 以5月和6月两个不同时段采集的分别产于青海省化隆县和四川省康定县的冬虫夏草(Cordycepssinensis)新鲜子实体为材料,采用分子生物学方法,以rDNA-ITS序列为分子标记,对蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyceshepiali)与冬虫夏草之间的关系进行了探讨。以真菌通用引物ITS1/ITS4分别对蝙蝠蛾拟青霉及冬虫夏草子座和僵虫基因组DNA进行PCR扩增,获得的片段克隆到pMD18-TVector上进行测序,结果表明,随机挑取的46个克隆与某些已在GenBank中注册的中国被毛孢(Hirsutella sinensis)或冬虫夏草的rDNA-ITS序列的一致性均在99%以上,但与蝙蝠蛾拟青霉的rDNA-ITS序列的一致性约为72%。根据蝙蝠蛾拟青霉的rDNA-ITS序列设计了两对特异引物,分别以不同产地及不同生长时期共4个批次的冬虫夏草子座和僵虫基因组DNA为模板,进行PCR及巢式PCR扩增,均得到了相应片段,该片段与蝙蝠蛾拟青霉的rDNA-ITS序列具有100%的一致性。在GenBank中注册号为AB067740的另一个标明为冬虫夏草的rDNA-ITS序列与注册号为AJ309353的中国被毛孢的rDNA-ITS序列一致性仅为87.3%,但根据AB067740序列设计特异引物,也从冬虫夏草基因组DNA中扩增到其相应序列。研究结果表明,在天然冬虫夏草中除了中国被毛孢之外,还普遍存在着蝙蝠蛾拟青霉等内寄生菌。 杨金玲 肖薇 何惠霞 朱慧新 王淑芳 程克棣 朱平关键词:冬虫夏草 中国被毛孢 系统发育分析 中国被毛孢的初步培养与生活力的观察 被引量:9 2003年 以大米为基本培养材料 ,分别补充各种营养物质 ,培养中国被毛孢 ,探讨培养物在几种温度条件下经过 90d处理后的生活力和恢复生长后的生长速度。结果表明 :补充酵母膏加富的麦麸煮汁有利于保持此菌的生活力和促进生长 ,保持温度以 0~ 10℃为宜。 王淑芳 朱慧新 朱平关键词:中国被毛孢 生活力 培养物 冬虫夏草 50mL-管摇床培养暨24孔板法筛选麦角菌突变株 被引量:5 2000年 麦角菌原生质体用0.3mg/mL亚硝基胍(NTG)分别处理20,40,60和80min。随机挑取NTG处理后的原生质体再生单菌落共80个,分别接种到50mL离心管(内装10mL液体培养基)中,在24℃、220r/min摇床上培养12d。在紫外灯(254um)下选出46株荧光相对较强的培养物在24孔板上作Van Urk蓝色反应分析。挑选9株呈深蓝色反应的菌株作HPLC分析,其结果与24孔板法有明显的相关性。在麦角隐亭产率上,No.45最佳(来自NTG 80min剂量组),No.18、 No.26次之(来自NTG 40min剂量组)。50mL-管摇床培养与24孔板法相结合,有效地提高了筛选速度和成功率。 朱平 王全 朱慧新 何惠霞关键词:诱变育种 一种7-木糖紫杉烷糖基水解酶、其基因的核苷酸序列及其应用 本发明涉及一种7-木糖紫杉醇糖基水解酶,其氨基酸序列,包括SEQ ID NO:2所示序列的至少8个氨基酸序列;还涉及编码7-木糖紫杉醇糖基水解酶的核苷酸序列,以及含有该核苷酸序列的表达载体及宿主细胞;本发明还涉及7-木糖... 朱平 程海立 赵瑞玉 程克棣 何惠霞 孟超 朱慧新文献传递 一种7-木糖紫杉烷糖基水解酶、其基因的核苷酸序列及其应用 本发明涉及一种7-木糖紫杉醇糖基水解酶,其氨基酸序列,包括SEQ ID NO:2所示序列的至少8个氨基酸序列;还涉及编码7-木糖紫杉醇糖基水解酶的核苷酸序列,以及含有该核苷酸序列的表达载体及宿主细胞;本发明还涉及7-木糖... 朱平 程海立 赵瑞玉 程克棣 何惠霞 孟超 朱慧新赤霉菌原生质体DNA转化 被引量:10 2000年 Methods for the protoplast preparation and DNA transformation of Gibberella fujikuroi were established. The protoplasts were transformed with plasmid pAN7-1, which carries hygromycin B resistant gene (hPh), and the transformation frequency was about 10. Some transformants grew vigorously on the selectivemedium containing 400μg / ml of hygromycin B, while the minimum inhibitory concentration (MIC) of the antibiotic to the recipient strain was oniy 20μg / ml. Southern hybridization showed that the hph gene has integrated into the genomic DNA of the recipient strain in different manners. 朱平 杨金玲 朱慧新 程克棣关键词:赤霉菌 原生质体 DNA转化 具有β-木糖苷酶和β-葡萄糖苷酶活性的新的糖基水解酶及其应用 本发明提供了一种具有β-木糖苷酶和β-葡萄糖苷酶活性的新的糖基水解酶。该糖基水解酶能将7-木糖紫杉烷类化合物转化为7-羟基紫杉烷类化合物。 朱平 程海立 赵瑞玉 程克棣 何惠霞 孟超 朱慧新文献传递 不完全酶切去除载体多个相同酶切位点的简易方法 被引量:1 2003年 以去除真核表达载体pIGF3的3个EcoR 位点为例,介绍一种通过不完全酶切去除载体多个相同酶切位点的方法。本方法步骤简单,经济实用。 杨金玲 黄镇太 朱慧新 朱平 程克棣关键词:真核表达载体 质粒 长春花悬浮细胞培养体系对脱氢表雄酮的生物转化 被引量:3 2004年 利用长春花(Catharanthus roseus(L.)G.Don)悬浮细胞培养体系对脱氢表雄酮进行了生物转化,通过柱层析及制备薄层层析进行分离纯化,并利用核磁共振氢谱、碳谱以及ESI等仪器分析手段进行了化合物的结构鉴定,分离到13个转化产物,并对其中的9个进行了结构鉴定,它们分别是:androst-4-ene-3,17-dione(Ⅰ)、6α-hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione(Ⅱ)、6α-17β-dihydroxyandrost-4-en-3-one(Ⅲ)、6β-hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione(Ⅳ)、17β-hydroxyandrost-4-en-3-one(Ⅴ)、15α-17β-dihydroxyandrost-4-en-3-one(Ⅵ),15β,17β-dihydroxyandrost-4-en.3-one(Ⅶ)、14α-hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione(Ⅷ)和17β-hydroxyandrost-4-ene-3,16-dione(Ⅸ)。所鉴定的9个化合物均为首次通过生物转化的方法从长春花悬浮细胞培养体系中分离得到。 刘颖 程克棣 朱平 冯文化 孟超 朱慧新 何慧霞 马小军关键词:细胞培养 生物转化 脱氢表雄酮