张磊亮
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：北京大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 新型双功能溶栓剂的研究
- 溶栓疗法是对心血管疾病常用的治疗方法.该论文主要从两个方面开发研究溶栓药物:一是对现有溶栓药物进行改造,赋予新特性,以尿激酶原为基础构建了新型溶栓抗栓双功能分子,并研究了其体外和体内的性质;二是从更广泛的生物来源中筛选溶...
- 张磊亮
- 关键词：水蛭素血小板聚集抗凝血酶活性丝氨酸蛋白酶
- 赤子爱胜蚓丝氨酸蛋白酶ARSP1的表达与性质
- 血管栓塞是一类对人类危害极大的疾病。现有治疗药物,由于其副作用,使用受到一定程度的限制。从自然界中寻找安全、有效、方便的溶血栓药物当是一条很好途径。蚯蚓俗称地龙, 为我国传统的治疗心血管疾病的药物。1983年,日本宫崎医...
- 张磊亮俞梅敏茹炳根
- 文献传递
- 抗栓肽(Decorsin)在大肠杆菌中的克隆及表达被引量：6
- 2001年
- 将人工合成的寡核苷酸片段进行体外连接 ,得到编码抗栓肽 (decorsin)的cDNA .将此cDNA克隆到表达载体pMAL p2x中 ,经核苷酸序列测定结果正确 .在大肠杆菌TB1中通过IPTG进行诱导表达 ,融合蛋白的表达量为 8%左右 .融合蛋白通过亲和柱一步纯化 ,SDS PAGE显示为一条主要蛋白质电泳条带 .血小板聚集实验表明 ,融合蛋白具有较强的抑制血小板聚集的功能 ,抑制常数IC50为 3 70nmol L .
- 焦建伟张磊亮俞梅敏茹炳根
- 关键词：血小板聚集CDNA基因克隆
- 溶栓与抗栓双功能尿激酶原突变体的模拟、构建与表达被引量：4
- 2004年
- 将抗栓肽 ( Decorsin)嫁接到低分子量尿激酶原 ( scu PA-3 2 k)上 ,可以期望获得既具有抗血小板聚集活性 ,又具有溶栓活性的新型基因工程蛋白质分子 .利用计算机辅助分子设计手段模拟了该融合蛋白的分子结构 ,证明其活性区可以正常发挥功能 .根据大肠杆菌偏好密码子合成 Decorsin的基因 ,与 scu PA-3 2 k基因融合在一起 ,构建新的嵌合体基因 dscu PA,并在大肠杆菌中通过 IPTG进行诱导表达 ,该重组蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式存在 .对包涵体进行变性和复性并通过层析纯化得到目的蛋白质 .用纤维蛋白平板法测得重组蛋白的比活为 92 0 0 0 IU/mg.激活纤溶酶原的酶促动力学性质与天然低分子量尿激酶相似 ,且有较强的抑制血小板聚集的功能 .重组蛋白 dscu PA不但具有较强的溶栓功能 ,而且具有抗栓功能 .
- 张磊亮焦建伟邵开峰俞梅敏茹炳根
- 关键词：血小板聚集
- 抗栓肽和尿激酶原(B链)嵌合体的构建与表达
- 2004年
- 通过基因工程重组技术 ,将抗栓肽 (decorsin)基因与尿激酶的B链即scu PA(B)基因用柔性Linker((Gly4Ser) 3 )融合在一起 ,构建新的嵌合体基因dscuPA(B) ,在大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS中通过IPTG诱导表达 ,并考察了重组质粒在Rosetta(DE3)plysS在传代中的分离稳定性。该融合蛋白在大肠杆菌中是以包涵体的形式存在 ,对包涵体进行变性及复性后 ,并通过Zn2 + 螯合柱和SP阳离子交换柱进行纯化。质谱分析表明分子量为 33 735kD ,与理论值相符。目的蛋白质的纯度可达90 %。纤维蛋白平板法测得嵌合分子的比活为 90 0 0 0IU mg ,与scuPA 32k的比活相近。体外血小板聚集实验表明融合蛋白有较强的抑制血小板聚集的功能 ,抑制常数IC5 0为 0 31 μmol L。以上这些结果表明 ,该融合蛋白不但具有较强的溶栓功能 ,而且具有抗栓功能 。
- 张磊亮管胜昔姜靓靓俞梅敏茹炳根
- 关键词：尿激酶原质粒稳定性血小板聚集
