张珍珍
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：温州医学院检验医学院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- SARS冠状病毒多抗原表位融合蛋白的表达及其诊断应用
- 2013年
- 目的制备SARS冠状病毒(SARS-CoV)多抗原表位融合蛋白,建立一种可特异性诊断SARS的血清学方法,用于SARS的明确诊断和流行病学调查研究。方法设计含有SARS冠状病毒S、M和N蛋白优势抗原表位区的多表位融合蛋白SMN,利用大肠杆菌表达SMN蛋白,并作为包被抗原建立ELISA方法,用于SARS患者血清检测。结果设计出包含S603-635、M2-31、N362-412表位区的多表位融合蛋白SMN,并在大肠杆菌中成功表达。以SMN蛋白为包被抗原,ELISA检测74份SARS患者血清全部为阳性,另44份非SARS-CoV感染的发热病人血清和62份健康人血清均为阴性。结论 SARS-CoV多抗原表位融合蛋白SMN在大肠杆菌中成功表达,以SMN为检测抗原建立的ELISA方法为SARS血清学诊断奠定了基础。
- 张珍珍郭彦于虹高基民邱洪杰赵光宇周育森
- 关键词：SARS冠状病毒表位蛋白表达酶联免疫吸附测定
- 一种展示SARS冠状病毒受体结合区的重组枯草杆菌芽孢的制备及免疫原性分析被引量：1
- 2013年
- 目的:利用枯草杆菌芽孢呈递技术制备表达SARS冠状病毒S蛋白受体结合区(RBD)的重组芽孢。方法:将枯草杆菌CotB基因构建到基因组整合质粒pDG1664中,再将RBD基因连接到CotB基因的下游,构建成重组质粒pDG1664-CotB-RBD,通过同源重组整合到PY-79枯草杆菌基因组中;利用红霉素抗性筛选重组菌并进行PCR和DNA测序鉴定,Western印迹鉴定重组菌芽孢表面RBD蛋白的表达情况;用表达RBD的重组芽孢以口服方式免疫小鼠,通过ELISA和流式细胞术检测重组芽孢的免疫原性。结果:制备出枯草杆菌基因组整合了RBD抗原基因的重组菌株RS1931,形成的重组芽孢表达相对分子质量约62×103的CotB-RBD融合蛋白;重组芽孢免疫的小鼠血清RBD抗原特异性IgG抗体滴度在末次免疫后2周可达1∶10 880,重组芽孢初免后18周的小鼠脾细胞中IFN-γ+CD4+、IL-4+CD4+和IFN-γ+CD8+T细胞比例上调,表明重组芽孢经口服免疫产生良好的体液免疫和细胞免疫应答。结论:针对SARS冠状病毒S蛋白RBD建立了枯草杆菌芽孢呈递技术方法,制备出在枯草杆菌芽孢表面稳定表达外源RBD蛋白的重组株,获得的重组芽孢具有良好的免疫原性,为开发芽孢呈递型SARS疫苗奠定了基础。
- 苗雨张珍珍郭彦唐健邱洪杰于虹孙世惠寇志华赵光宇周育森
- 关键词：枯草杆菌芽孢SARS冠状病毒
