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张惠媛: 作品数：34 被引量：203H指数：9; 供职机构：北京出入境检验检疫局更多>>; 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家高技术研究发展计划教育部留学回国人员科研启动基金更多>>; 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学农业科学更多>>

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利用分子马达技术检测霍乱弧菌被引量：6: 2012年; 利用载色体chromatophore上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器,建立了应用在食品检测中的快速检测方法。首先在ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-ompW探针,将待测霍乱弧菌和阴性对照分别与此生物传感器结合,比较其催化ATP合成30 min后的ATP产生量,进而对霍乱弧菌的DNA进行检测。ATP合成的量可以通过环境H+的量进行测定,H+的量通过F-DHPE所体现的荧光强度大小标定。结果表明,Chro ompW的浓度在0.078 mg/mL,单核增生李斯特菌DNA浓度在40 ng/mL为最适检测条件。通过与实际检测样品的传统检测方法及PCR检测方法对照,具有良好的检测符合性。; 张捷向丽萍汪琦张惠媛张昕王宇顾德周王佩荣温铮陈广全乐加昌; 关键词：霍乱弧菌

基于分子马达生物传感器技术的副溶血性弧菌分子分型方法的初步研究被引量：7: 2013年; 【目的】建立基于分子马达技术的简便快速的分子分型方法,对携带和非携带毒力基因的副溶血性弧菌进行快速分类。【方法】以F0F1-ATPase为核心构建分子马达,以副溶血性弧菌毒力基因tdh、trh和种特异性基因tlh、toxR为靶基因设计4个探针。通过生物素-亲和素系统将探针与分子马达连接构建F0F1-ATPase分子马达生物传感器,对10株副溶血性弧菌分离株进行分类,并与PCR-电泳-凝胶成像结果进行比较;同时对生物传感器的检测灵敏度和特异性进行研究。【结果】10株试验菌株中10株tdh阳性,0株trh阳性,而10株菌都携带tlh和toxR,与PCR-电泳-凝胶成像结果一致;分子马达生物传感器的最低检测限为1 pg/反应体系,且能够对副溶血性弧菌特异性识别,PCR-电泳-凝胶成像方法的最低检测限为10 pg/PCR反应体系。【结论】建立了基于分子马达的分子分型方法,能够对副溶血性弧菌的致病性进行快速诊断,检测灵敏度比PCR-电泳-凝胶成像方法高了10倍,而且特异性非常高。该方法简便、快速、省时、省力,适用于地方疾控部门和口岸检疫部门的基层实验室开展副溶血性弧菌监测和流行病学溯源工作。; 张捷李兆杰王煜张惠媛陆琳王静刘岩顾德周汪琦张昕王佩荣乐加昌陈广全; 关键词：副溶血性弧菌分子马达分子分型毒力基因

进口三文鱼单核细胞增生李斯特菌污染检测被引量：3: 2008年; 目的对2003～2006年由北京口岸挪威进口的三文鱼进行单核细胞增生李斯特菌污染情况监控，并对分离的单核细胞增生李斯特菌进行血清分型。方法采用美国食品药品管理局颁布的检测方法对单核细胞增生李斯特菌进行分离和血清分型。结果挪威三文鱼的单核细胞增生李斯特菌的检出率为1．2％～6．3％。在2003～2006年呈下降趋势；血清分型结果显示，分离自三文鱼的单核细胞增生李斯特菌的血清型主要是1／2a、1／2b和4b型，分别占分离菌株的85％，6％和6％。结论首次对分离自挪威三文鱼的单核细胞增生李斯特菌进行血清分型，所分离的菌株中97％是引起人类李斯特菌病的菌株。; 曾静魏海燕张西萌陈广全饶红张惠媛汪琦张昕; 关键词：三文鱼单核细胞增生李斯特菌血清型

肉类食品加工环境中病原菌生物被膜的形成与控制: 李春雷王松张惠媛马腾胡雅洁王建张文启; 2007年，国家质检总局下达了科技计划项目“肉类食品加工环境中病原菌生物被膜的形成与控制”（计划编号2007IK165）。该项目属于技术开发类项目。技术原理：1、该项目建立了肉类食品加工过程中常见病原菌（金黄色葡萄球菌，...; 关键词：; 关键词：肉类食品加工环境病原菌生物被膜

食品中诺沃克样病毒检测方法的研究: 陈广全饶红张惠媛付浦博冯骞; 该项目开展了食品中诺沃克病(Norwalk Virus)毒检测研究。在样品处理过程中加入抑制因子去除剂，消除抑制因素，提高方法灵敏度。筛选出了最佳的病毒富集方法，选用了简便、快速、有效的RNA提取方法和灵敏度最高的试剂用...; 关键词：; 关键词：食品

利用F_0F_1-ATPase分子马达生物传感器检测食品中的副溶血性弧菌被引量：2: 2012年; 利用载色体上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器对副溶血性弧菌检测快速检测。在ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-toxR探针,将待测副溶血性弧菌标准菌株和阴性对照分别与生物传感器结合后,比较其催化ATP合成30min后的ATP产生量,可以对副溶血性弧菌的DNA进行检测。ATP合成的多寡可以通过环境中H+的量进行测量,而H+的多寡通过F-DHPE所体现的荧光强度大小来获得。结果表明,chro toxR的质量浓度在0.156mg/mL,副溶血性弧菌DNA质量浓度在40ng/mL时为最适检出条件。通过与实际检测样品的传统检测方法及聚合酶链式反应检测方法对照,具有良好的符合性。; 张捷顾德周张惠媛刘岩汪琦张昕王佩荣陶雨风范斐陈广全乐加昌; 关键词：生物传感器副溶血性弧菌

细菌磁小体的修饰及其在病原物检测中的应用被引量：10: 2010年; 趋磁细菌可以在细胞内合成Fe3O4或F3S4颗粒,称为磁小体。磁小体粒径为纳米级,晶形稳定,有质膜包被,在免疫检测、临床诊断、靶向治疗、污水处理等方面均有很好的应用前景。文章主要介绍采用化学法和生物法对磁小体进行修饰,并利用修饰后的磁小体对病原物进行免疫磁性分离、前期诊断和痕量检测的方法。; 李爱华唐涛张惠媛汪琦田杰生李颖; 关键词：磁小体免疫磁性分离免疫检测

水产品中副溶血性弧菌脉冲场凝胶电泳分型被引量：4: 2012年; 目的采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对水产品中副溶血性弧菌进行分子分型。方法采用PFGE技术,对80株分离自11个国家和中国浙江省和山东省的水产品中的副溶血性弧菌进行分子分型;基因组DNA用Not I和Sfi I 2种酶进行消化。结果 Not I和Sfi I 2种内切酶均得到68种带型,综合系统树图中分成70种带型;Not I和Sfi I的分辨率分别为78.8%和76.3%;14株来自加拿大的菌株分聚成相似度100%的4组,其中有4株菌和10株菌分别聚成相似度91.8%和93.3%的2组;挪威和新西兰分别有3株和2株菌相似度为100%;其他国家的菌株无与本国相同的菌株。结论 2种酶均适合于副溶血性弧菌的PFGE分型,Not I的效果略好于Sfi I;菌株间的亲缘关系与来源地无明显关联,但具有毒性基因的菌株更易在系统发育树上处于较近的分枝上。; 张昕汪琦张惠媛陈广全张捷; 关键词：副溶血性弧菌分子分型

用RT-PCR法检测食品中诺沃克样病毒被引量：10: 2004年; 使用RTPCR法对贝类样品中的诺沃克样病毒进行了检测。对食品中不同的病毒富集方法进行了研究,评价了CHCl3和Frezon去除RTPCR抑制剂的效果,筛选出最佳的病毒富集方法即2次PEG6000(终浓度12%PEG6000,03mol/LNaCl)沉降病毒,并使用CHCl3除去RTPCR抑制剂。此富集方法的回收率为135%。另外,对不同的RNA提取方法的灵敏度进行了比较,最终确认硅胶膜法为简便、快速、有效的RNA提取方法。并且,使用了Superscript反转录酶进行反转录,提高了检测的灵敏度。选用了289和290混合引物进行食品中NLVs的检测,这一引物组合可同时检测Ⅰ型和Ⅱ型NLVs,扩增出1个319bp的特异性片段。通过以上条件的优化,建立了通过RTPCR检测贝类中NLVs的有效方法。该方法的NLVs最低检出限为10×103RT-PCR50/15g。对32件贝类样品进行了NLVs的检测,其中2份毛蚶中被检出NLVs。; 陈广全饶红张惠媛付溥博冯骞; 关键词：RT-PCR法 CHC 食品贝类 RNA提取方法

利用PCR方法快速检测食品中的沙门氏菌被引量：36: 2005年; 本文介绍了一种快速检测食品中沙门氏菌的方法。操作步骤为,在缓冲蛋白胨水(BPW)中增菌18-24h,生理盐水洗菌2次后煮沸裂解细胞,以invA为目的基因进行PCR,琼脂糖凝胶电泳检测,两天时间即能得到明确结果。以全脂奶粉、生牛肉和加工过的鸡肉为实验对象,人为添加沙门氏菌,检测结果与传统培养方法和BAX(r)系统检测结果一致。实验检出限为100cfu/25g,准确性达100%。; 汪琦张昕张惠媛陈广全; 关键词：沙门氏菌 PCR PCR方法食品琼脂糖凝胶

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