张大伟
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 黄芪皂苷Ⅳ通过PKA途径减轻缺氧/复氧心肌损伤的机制研究被引量：6
- 2012年
- 目的:研究黄芪皂苷IV(astragaloside IV,As-IV)减轻缺氧/复氧所致心肌细胞损伤的机制。方法:胰酶多次消化法培养新生SD大鼠原代心肌细胞,建立缺氧/复氧模型,测定培养心肌细胞上清心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶(creatine kinase,CK-MB)含量,检测心肌细胞肌浆网钙ATP酶(sarcoplasmic reticulum Ca2+-ATPase,SERCA2a)活性、Real-Time PCR法测定PKA催化亚单位α(PKA C subunitα,PKA-Cα)基因的表达水平以及Western blot检测第16位丝氨酸磷酸化受磷蛋白(Ser16 phos-phorylated phospholamban,Ser16-PLN)的表达水平,同时以As-IV(30μmol/L)干预,观察其作用。结果:与正常组相比,缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)引起心肌细胞CK-MB释放增加,SERCA2a活性降低约35%、PKA-Cα基因表达下调28%以及Ser16-PLN表达下调51%,P值均﹤0.05,As-IV干预则可逆转上述变化,基本恢复至正常水平。结论:黄芪皂苷Ⅳ抑制缺氧/复氧所致心肌细胞损伤的机制可能是通过上调PKA-Cα基因表达,提高受磷蛋白(phosphorylated phospholamban,PLN)16位丝氨酸的磷酸化水平,解除PLN对SERCA2a的抑制,从而增强SERCA2a的功能。
- 张大伟徐晋妉卞智萍刘静吴恒芳顾春荣陈相健杨笛
- 关键词：心肌保护肌浆网钙ATP酶PKA受磷蛋白
- OX40/OX40L逆向信号对小鼠主动脉内皮细胞MMP-9表达及机制的研究被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨OX40配体(OX40 ligand,OX40L)逆向通路激活对培养的小鼠主动脉内皮细胞基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)表达及活性的作用。方法:分离与培养8～10周龄C57BL/6J小鼠主动脉内皮细胞,传代至第2代,用可溶性OX40(sOX40)、OX40L单克隆抗体(anti-OX40L)和钙离子螯合剂bapta-AM刺激内皮细胞,RT-PCR和Western blot方法检测内皮细胞MMP-9的mRNA和蛋白表达水平,明胶酶谱法检测内皮细胞培养上清MMP-9活性,应用钙离子成像方法观察内皮细胞胞浆游离钙离子浓度([Ca2+]i)的改变。结果:与对照组相比,可溶性OX40(0.1 mg/L)刺激后内皮细胞MMP-9的mRNA及蛋白表达水平均显著增高,内皮细胞培养上清MMP-9活性明显增高,内皮细胞胞浆[Ca2+]i也明显增高。分别应用可溶性OX40L单克隆抗体(0.1 mg/L)和Bapta-AM(20μmol/L)预处理培养内皮细胞后,由可溶性OX40引起的内皮细胞基因和蛋白表达水平明显降低,内皮细胞培养上清MMP-9活性明显下降。结论:内皮细胞OX40L逆向信号的激活可以通过调节胞内的游离钙离子水平参与内皮细胞中MMP-9表达的调控,这可能是OX40/OX40L逆向信号通路参与动脉粥样硬化的发生、发展的机制之一。
- 张丹丹夏文龙刘强张大伟徐晋妉吴恒芳陈相健杨笛
- 关键词：OX40配体基质金属蛋白酶-9内皮细胞
