崔南
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：兰州大学更多>>
- 发文基金：甘肃省新药临床前研究重点实验室开放基金国家大学生创新性实验计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 新型非病毒载体O-CHCS携带HBD2转染L929细胞及表达产物活性检测
- 2011年
- 目的研究O-胆甾醇基壳聚糖(O-CHCS)作为基因载体进行人β防御素-2(HBD2)基因转染小鼠纤维母细胞L929的可行性及检测目的基因表达产物的生物活性。方法构建重组质粒pCMV-hBD2,通过O-CHCS介导转染于L929细胞,提取转染细胞总RNA,用RT-PCR检测HBD2基因转录水平;收集转染细胞培养上清液,用Westernblotting检测HBD2基因蛋白的表达;用Kirby-Bauer纸片法检测HBD2抗菌活性,同时以Lipofect脂质体转染试剂作为阳性对照。结果经过O-CHCS介导转染的L929细胞,目的基因HBD2在转录水平和蛋白水平均有表达,转染细胞上清液对金黄色葡萄球菌有抑菌圈形成,结果同Lipofect的转染效果基本一致。结论成功构建了真核表达载体pCMV-hBD2,证实了O-CHCS可以作为基因载体用于目的基因HBD2的转染,且目的基因表达产物具有生物活性,为基因工程合成HBD2提供一条经济便捷的途径。
- 崔南房晓楠张妮陈名懋李学敏陈新年
- 关键词：人Β-防御素-2非病毒载体
- hBD1稳定表达细胞株的建立及其表达产物对多重耐药菌的活性检测
- 人防御素是一类富含精氨酸的阳离子抗菌肽,主要分为α防御素和p防御素两类,具有广谱抗菌活性、细胞毒性、抗肿瘤及免疫趋化等作用,是人体天然免疫的重要组成部分之一,因其独特的抗菌机制,使微生物不易产生耐药性,近年逐渐受到研究者...
- 崔南
- 关键词：多重耐药菌人Β-防御素-2非病毒载体真核表达
- 文献传递
- LPS诱导L929细胞β防御素2和schlafen-2基因的表达及其信号转导被引量：2
- 2010年
- 目的:通过研究LPS对于小鼠成纤维细胞(L929)β防御素(defb)和schlafen(slfn)基因表达的影响及其信号转导通路,探讨纤维细胞对病原微生物的防御作用。方法:LPS(200ng/ml)处理L929细胞2、4、6小时,提取细胞总RNA,用RT-PCR和荧光定量PCR的方法检测defb1,2和slfn1,2,3基因表达;应用Westernblot的方法检测了defb2蛋白的表达。NF-κB和P38MAPK两种信号转导通路的化学抑制剂BMS345541和PD169316检测defb2和slfn2基因表达的信号转导通路。结果:LPS能诱导小鼠成纤维细胞defb2的表达,并增强slfn2的表达;P38MAPK和NF-κB信号转导通路调控小鼠成纤维细胞defb2和slfn2的表达。结论:在感染时,小鼠成纤维细胞可能通过诱导defb2的产生而发挥抵御病原微生物的作用。
- 张妮房晓楠崔南陈新年
- 关键词：信号转导
- hBD1稳定表达细胞株的建立及其表达产物对多重耐药菌的活性检测被引量：1
- 2011年
- 目的 构建人β防御素1（ hBD1）稳定表达细胞株并检测其对多种多重耐药菌的抗菌活性.方法 将重组质粒pCMV-hBD1通过阳离子脂质体转染于非洲绿猴SV40转化的肾细胞（COS-7细胞）,经过G418压力筛选后获得单克隆细胞株；提取细胞总RNA,用RT-PCR检测目的基因在转录水平的表达；收集细胞培养上清液,用Western blot检测hBD1基因蛋白的表达；将含有表达产物hBD1的细胞培养上清液分别同各耐药菌液混合,37℃孵育不同时间后涂布于LB平板,以各实验组和对照组的菌落数的比值作为该耐药菌的存活率.结果 经过G418压力筛选所得到的稳定表达细胞株,在转录水平和蛋白水平均检测到目的基因hBD1的表达,在表达产物hBD1的作用下,多重耐药鲍氏不动杆菌、多重耐药大肠埃希菌存活率和多重耐药肺炎克雷伯杆菌的存活率可以分别降至9%、22%和50%,多重耐药嗜麦芽窄食单胞菌的存活率同对照组没有明显差异.结论 成功获得hBD1稳定表达细胞株,目的基因hBD1的表达产物对多种多重耐药菌均具有抗菌活性.
- 崔南陈新年魏莲花李娟邹凤梅
- 关键词：多重耐药生物活性
