姚静
- 作品数:23 被引量:83H指数:6
- 供职机构:南京农业大学更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 鸡破骨细胞分化因子(chODF)编码基因克隆与序列分析
- 2007年
- 目的克隆鸡破骨细胞分化因子(chODF)基因,并对其进行序列测定和分析。方法根据GeneBank报道的预测的鸡ODF基因(GeneBank登录号,XM425625)序列,设计引物。从鸡胚额骨分离培养的成骨细胞中提取总RNA,逆转录合成cDNA,用SOE-PCR的方法扩增鸡ODF基因全序列。将获得的预期大小的PCR产物插入pMD18-T克隆载体,转化E.coli感受态细胞,提取质粒,进行双酶切鉴定,对含有目的片段的克隆进行序列测定。结果从成骨细胞中成功地克隆鸡ODF基因片段,其结果与GeneBank上报道的预测序列具有很高的相似性,达到99.3%,与人、小鼠、犬的一致性分别为55.4%、52%和55.7%,提示该基因在进化过程的保守。ODF基因全长1203bp,其阅读框起始于第一个氨基酸,终止于最后一个氨基酸,无信号肽,共编码400个氨基酸。结论ODF作为惟一能够直接诱导破骨细胞分化和功能的细胞因子,对它的深入研究可为探讨骨质疏松等代谢性骨病的发病机制及预防、治疗开辟出广阔的领域。
- 王艳姚静侯加法
- 关键词:基因克隆
- rcIGF-Ⅰ对鸡胚额骨成骨细胞骨相关基因mRNA表达的影响被引量:3
- 2006年
- 目的在成功培养、纯化体外鸡胚额骨成骨细胞的基础上,探讨不同剂量重组鸡IGFⅠ(rcIGFⅠ)对成骨细胞骨相关基因(COLⅠ、OPG、IGFⅠR)表达的影响。方法应用酶消化法(0.1%Ⅱ型胶原酶)获取鸡胚额骨成骨细胞群并鉴定。取培养2d的2代成骨细胞,在rcIGFⅠ为0ngml、50ngml、100ngml的浓度中进行培养,采用RTPCR方法检测基因COLⅠ、OPG、IGFⅠR的相对表达情况,并用βactin作为内参照予以矫正。结果rcIGFⅠ可以在转录水平上增加鸡胚额骨成骨细胞骨相关基因的表达,并呈明显的剂量依赖关系。结论IGFⅠ促进成骨细胞的增殖、分化的作用可能是通过增加骨相关基因的表达水平来实现的。
- 张建峰侯加法张皎姚静
- 关键词:成骨细胞基因表达
- 行星驱动式深松机
- 本发明的行星驱动式深松机,其结构主要包括变速箱、2个十字形行星架、中心轴、太阳轮、中间轮、行星轮、刀轴和犁刀,所述十字形行星架的中心处分别固装在中心轴的两头,太阳轮固装在中心轴上,刀轴平行安装在2个十字形行星架的8个端点...
- 姚静丁启朔丁为民姬长英赵国柱
- 文献传递
- 褐飞虱眼色分化机制初探及对生物学特性的影响分析
- 复眼是昆虫接收信号和与外界沟通的重要感觉器官之一,对昆虫的取食、避敌和求偶等行为具有重要作用。复眼中的色素能够选择性吸收和反射自然界的光,使复眼呈现各种不同的颜色,这是昆虫重要的生物学特征之一。 在室内长期饲养的野生品...
- 姚静
- 关键词:褐飞虱生物学特性
- 鸡骨保护素(chOPG)基因的克隆、表达及生物学活性研究
- 骨保护素/(osteoprotegerin,OPG/)最先发现于哺乳动物,是一种能抑制破骨前体细胞分化、抑制成熟破骨细胞活性并诱导其凋亡的分泌型糖蛋白。体内调节骨代谢的许多激素和细胞因子最终通过调节OPG//RANKL的...
- 姚静
- 关键词:骨保护素生物活性破骨细胞骨质疏松
- 文献传递
- 鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究被引量:11
- 2005年
- 应用RT-PCR方法对雏鸡肝脏总RNA中鸡类胰岛素生长因子Ⅰ基因cDNA进行扩增,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,与已知序列同源性为100%。然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达,经Tricine-SDS-PAGE分析,原核表达产物为7.6kD的重组蛋白,占菌体总蛋白的23%,Western印迹表明重组蛋白具有IGF-Ⅰ抗原活性。表达产物以包涵体形式存在,经7mol·L-1盐酸胍的变性液溶解及0.5mol·L-1精氨酸复性液处理,表达产物随后进行脱盐、凝胶层析纯化、MTT法分析其对NIH3T3和鸡胚成骨细胞的增殖效应,结果表明重组鸡IGF-Ⅰ具有较高的生物学活性。
- 张建峰侯加法张皎姚静
- 关键词:MTT法活性研究中鸡SDS-PAGE分析
- GH、IGF-1对骨代谢调节的研究进展被引量:3
- 2004年
- 骨最主要的功能是构成机体的支架,起保护、支持、运动以及维持动物基本形态等作用.体内绝大部分的钙是以骨盐形式沉积在骨组织内,故骨组织是动物体最大的"钙库".骨是一种活器官,不断进行着生长和再生,最充分地完成其支持和保护功能,维护骨代谢平衡和机体内环境的稳定.骨代谢的调节是个复杂严密的过程,受多种因素制约和调节.人体内调节血钙和钙离子水平的三大器官是肠、骨和肾.许多调节骨代谢的调节激素也是通过这三大器官发挥作用.激素对骨代谢的调节作用十分重要.其中生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)作用十分关键.
- 周振雷张建峰姚静侯加法
- 关键词:骨代谢骨组织GH机体内环境
- 鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究
- 根据GenBank上发表的鸡(Gallus)类胰岛素生长因子-Ⅰ(Insulin like growth factor Ⅰ,IGF-Ⅰ)基因序列(M32791),设计二对引物,采用RT-PCR及亚克隆方法从雏鸡肝脏总RN...
- 张建峰张皎姚静侯加法
- 文献传递
- 鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究
- 本文根据GenBank上发表的鸡(Gallus)类胰岛素生长因子-Ⅰ(Insulin like growth factor Ⅰ,IGF-Ⅰ)基因序列(M32791),设计二对引物,采用RT-PCR及亚克隆方法从雏鸡肝脏总...
- 张建峰张皎姚静侯加法
- 关键词:生物学活性基因克隆
- 文献传递
- 鸡胚破骨细胞的分离培养与鉴定
- <正>目的:从18日龄鸡胚长骨(股骨和胫骨)中机械分离破骨细胞于盖玻片和骨片上进行培养,以建立鸡胚破骨细胞体外培养方法。方法:结合倒置相差显微镜、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、甲苯胺蓝染色及透射电镜(TEM)和扫描...
- 姚静钱存忠张皎张建峰侯加法
- 关键词:鸡胚破骨细胞
- 文献传递