夏机良 作品数:9 被引量:14 H指数:2 供职机构: 南方医科大学基础医学院肿瘤研究所 更多>> 发文基金: 广州市科技计划项目 “重大新药创制”科技重大专项 广州市重大科技专项计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
六个肥胖相关基因在食蟹猴2型糖尿病不同发病时期的差异表达 被引量:7 2011年 2型糖尿病(T2DM)是一种与基因密切相关的高发性代谢性疾病。采用高脂饮食(其中含15%猪油)喂养25只中老年雄性食蟹猴的方法,制备T2DM模型,通过检测血糖与血脂水平确定疾病发展进程,并利用实时PCR对外周血白细胞中的6个肥胖相关基因mRNA表达量进行测定。食蟹猴T2DM在临床前期和临床期口服糖耐量实验(OGTT)2-h血糖值分别为(11.06±6.05)mmol/L和(13.12±2.89)mmol/L,显著高于正常组;空腹血糖在临床期达到最大值,为(7.58±1.56)mmol/L(P<0.01),说明其T2DM模型被成功诱导。但所检测的6个糖尿病肥胖相关基因中只有CDKN2B、IGF2BP2和FTOmRNA表达量与糖尿病发病进程呈正相关,且临床期IGF2BP2和FTO的表达量分别是对照组的65.92倍和4.30倍,差异极显著(P<0.01)。因此,基因CDKN2B、IGF2BP2和FTO可作为食蟹猴糖尿病早期诊断及预后评价的参考指标。 靳丽莎 郝香芬 彭白露 张艳春 万玉玲 季芳 夏机良 刘晓明关键词:食蟹猴 2型糖尿病 肥胖相关基因 基因表达 巢式PCR检测食蟹猴和猕猴中SRV和SFV 被引量:4 2010年 目的利用巢式PCR方法检测圈养的食蟹猴(Macaca fascicularis)和猕猴(Macaca mulatta)中猴D型逆转录病毒(Simian Type D Retrovirus SRV)和猴泡沫病毒(Simian foamy virus SFV)。方法针对SRV-env和SFV-pol基因的保守区序列设计特异性外引物,然后再设计特异性内引物。将外引物扩增出的片段克隆到PJET1.2blunt载体中作为阳性对照,运用NCBI中BLAST软件比对测序结果。用巢式PCR方法分别检测食蟹猴和猕猴中SRV和SFV。结果发现食蟹猴中SFV感染率为65.2%,SRV感染率为9.5%,猕猴中SFV感染率为60.5%,SRV感染率为12.8%。结论圈养的食蟹猴和猕猴SFV的感染率均较高,SRV感染率很低。 夏机良 王涛 季芳 孙云霄 彭白露 刘晓明 饶军华关键词:巢式PCR 食蟹猴 猕猴 2型糖尿病食蟹猴白细胞NF-κB和IκBα表达相关性分析 被引量:1 2011年 比较了食蟹猴2型糖尿病(T2DM)不同发病阶段与正常对照组的空腹血糖值(FPG)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)在血液中含量,及荧光定量PCR方法测定的NF-κB和IκBα在外周血白细胞中表达量。结果显示,FPG、CHOL和LDL-C随疾病进行呈上升趋势,而HDL-C先上升后下降,血糖血脂值变化表明,在T2DM临床前期就出现脂代谢异常;除IκBα表达量在模型初期显著降低,NF-κB表达量在临床期显著升高外,其他各阶段无差异,基因表达量变化表明,在疾病初期开始启动IκB/NF-κB信号通路,到临床期启动完全。根据以上结果推测,前期低水平炎症反应引起脂代谢异常,而后者又促进前者的发展,至临床期才出现明显炎症状态。 张艳春 郝香芬 夏机良 季芳 张秀娟 万玉玲 刘晓明 彭白露关键词:IΚBΑ NF-ΚB 荧光定量PCR 2型糖尿病 食蟹猴 食蟹猴2型糖尿病与NF-κB/IκBa信号通路表达相关性分析 目的:探讨食蟹猴2型糖尿病(T2DM)不同发病阶段与核转录因子(NF—κB)/IκB信号通路的相关性。
方法:比较食蟹猴T2DM不同发病阶段和正常对照组的空腹血糖值(FPG)、甘油三脂(TG)、胆固醇(CHOL... 张艳春 郝香芬 夏机良 季芳 张秀娟 万玉玲 刘晓明 彭白露关键词:2型糖尿病 信号通路 荧光定量PCR 核转录因子 动脉粥样硬化相关基因在高血脂食蟹猴中的差异表达 被引量:2 2011年 目的研究高血脂与动脉粥样硬化基因的相关性,从中筛选动脉粥样硬化早期诊断基因。方法采用温和的动脉粥样硬化膳食(0.22 mg胆固醇/卡路里,40%的能量来源于脂肪)单笼喂养中老年雄性食蟹猴,膳食诱导12个月后,从膳食诱导实验猴中筛选出10只高血脂猴。然后采用荧光定量PCR方法检测对照组和高血脂组食蟹猴外周血白细胞内113个动脉粥样硬化相关基因的表达差异。结果在食蟹猴外周血白细胞内共检测到66个动脉粥样硬化相关基因,其中18个基因随血脂升高表达显著上调(P<0.05),21个基因表达显著下调(P<0.05),另外还有27个基因无表达差异(P>0.05)。结论以上结果为后续大样本相关研究缩小了基因遴选范围,通过进一步研究可能从中筛选出基因表达水平上的动脉粥样硬化早期诊断指标。 夏机良 郝香芬 曾小明 靳丽莎 李学家 孙云霄 张秀娟 张艳春 季芳 饶军华 刘晓明 彭白露关键词:食蟹猴 荧光定量PCR 外周血白细胞 食蟹猴心血管病风险因素与心血管病相关基因在外周血白细胞表达的相关性 被引量:1 2011年 研究心血管病风险因素和心血管病相关基因表达的相关性有助于心血管病风险预警和早期诊断研究。该文采用温和的动脉粥样硬化膳食(0.053mg胆固醇/千焦、40%的能量来源于脂肪)喂养中老年雄性食蟹猴(Macaca fascicularis)(12个月),根据传统心血管病风险因素筛选低、高风险食蟹猴,然后采用荧光定量PCR技术检测113个心血管病相关基因在正常组、低风险和高风险组食蟹猴外周血白细胞内的表达差异。结果在食蟹猴外周血白细胞中共检测到65个心血管病相关基因,其中低、高风险组有16个基因相对于正常组表达上调(P<0.05),19个基因表达下调(P<0.05),另外,还有15个基因表达模式特异(P<0.05)。此外,还检测到42个心血管病相关基因在人和食蟹猴外周血白细胞内均有效表达,其中22个基因在两者之间表达模式一致。上述结果为进一步研究心血管病风险预警和早期诊断指标,缩小了基因遴选范围。 夏机良 郝香芬 曾小明 靳丽莎 周彤 李学家 孙云霄 饶军华 刘晓明 彭白露关键词:心血管病 风险预警 食蟹猴 荧光定量PCR 外周血白细胞 中老年食蟹猴群中糖尿病相关基因的表达状态 被引量:1 2011年 该研究选择10岁以上健康中老年食蟹猴138只,按空腹血糖值(FPG)将其分为低血糖组、血糖正常组和高血糖组。采用全自动血液生化仪分别检测各组血清中总胆固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平变化;采用荧光定量PCR分析食蟹猴外周血白细胞中37个糖尿病相关基因的mRNA表达情况。结果表明,血清血脂水平HDL-C、LDL-C、TCHO和TG都与FPG分组无显著相关性(P>0.05),而外周血白细胞中ACE、ACLY、PRKCB1、SLC2A4、SNAP23、VAPA、IGF2BP2、IFNG8个基因的mRNA表达水平随FPG的升高而显著上调(P<0.05)。 张秀娟 李学家 夏机良 颜孙兴 季芳 张艳春 刘晓明 彭白露关键词:食蟹猴 血脂 外周血白细胞 糖尿病 食蟹猴心血管病各风险期相关基因差异表达分析 目的心血管病是一种慢性代谢综合症,通常在出现临床症状时已进入后期,因此尽早预测心血管病对人类健康有重大意义。美国国家胆固醇教育计划(NCEP)将心血管病危险性划分为四个级别:高危险、中高危险、中危险、低危险。中高及其以下... 夏机良 郝香芬 颜孙兴 曾小明 刘晓明 彭白露关键词:食蟹猴 外周血白细胞 文献传递 IκBα低表达转基因小鼠的建立及其表达调控 2015年 目的构建IκBα低表达转基因小鼠并分析IκBα的表达调控机制,为体内考察IκBα基因的整体效应提供基础。方法构建转基因构件RV-IκBα-Loxp-Mut-Neo载体,将线性化载体电转入胚胎干细胞,Southern blot筛选阳性克隆,再将阳性克隆进行显微囊胚注射,获得嵌合鼠,嵌合鼠与C57BL/6N交配获得F1代杂合型IκBα knockin小鼠。纯合型IκBα knockin小鼠与Ella Cre鼠杂交,其后代自交获得删除Loxp位点区间的IκBα knockout纯合型小鼠,PCR分别鉴定基因型。Western blot检测转基因小鼠各器官IκBα的表达情况,以正常野生C57/B6小鼠为对照。结果经PCR方法鉴定得到IκBα knockin和IκBα knockout转基因小鼠;Western blot结果显示与野生型小鼠相比,F2代IκBα knockin纯合型小鼠的脾、胸腺、肺等器官中IκBα的表达量降低,在IκBα knockin杂合型小鼠中,除上述器官外,皮肤、鼻咽、胃等器官中突变型染色单体IκBα的表达量也比野生型低;F2代IκBα knockout小鼠多数器官中IκBα的表达量低于正常野生C57/B6小鼠。结论成功建立了在多数器官低表达IκBa的转基因鼠;其中κB位点可能参与调控胸腺、脾、肺、鼻咽、皮肤、胃等器官中IκBa的表达,而其上游3 kb调控序列可能参与调控肝、鼻咽、胃、胰腺、小肠等器官中IκBa的表达。 刘青言 夏机良 肖东 彭白露关键词:IΚBΑ 低表达 转基因