周青
- 作品数：220 被引量：638H指数：11
- 供职机构：教育部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 人S-100β表达载体的构建、体外表达和表达产物的纯化被引量：2
- 1999年
- 目的构建人Ｓ－１００β表达载体并体外表达和表达产物的纯化。方法用ＲＴ－ＰＣＲ产生人Ｓ－１００βｃＤＮＡ，插入质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ中构建成表达载体，经ＩＰＴＧ体外诱导表达并经ＤＥ－５２和Ｐｈｅｎｙｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－ＣＬ４Ｂ纯化。结果重组质粒经限制性酶切图谱分析为人Ｓ－１００β；表达载体经ＩＰＴＧ诱导表达，其表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ证实为人Ｓ－１００β。结论所获人Ｓ－１００β表达载体为设计构建，体外表达的产物为人Ｓ－１００β，为进一步研究奠定基础。
- 周青汪凯刘虎汪渊
- 关键词：S-100Β蛋白质粒纯化
- 抑癌基因FHIT第8和第5外显子在原发性肝癌中纯合性缺失与点突变的研究被引量：4
- 2002年
- 目的 对 2 0例原发性肝细胞肝癌 (HCC)的抑癌基因 FHIT外显子 5、外显子 8的纯合性缺失和点突变进行检测。方法 收集 HCC手术标本 ,提取癌细胞 DNA,采用 PCR方法研究 FHIT外显子 5、外显子 8的纯合性缺失 ;使用 PCR- SSCP方法研究 FHIT外显子 5和外显子 8的点突变。结果 发现在 2 0例 HCC中外显子 5的纯合性缺失率为 10 .0 (2 / 2 0 ) ,外显子 8的纯合性缺失率为 30 .0 % (6 / 2 0 ) ;有 1例外显子 5和外显子 8均缺失 ;FHIT的异常率为 35 .0 % (7/ 2 0 )。在被检的肿瘤组织细胞中 ,未发现 FHIT外显子 5和外显子 8存在点突变。在被检的正常细胞中未发现 FHIT缺失和点突变的情况。结论 FHIT的缺失只发生在 HCC的肿瘤细胞中。在 HCC中 ,外显子 (尤其是外显子 8)的纯合性缺失是 FHIT基因失活的重要方式之一。点突变可能不是 HCC中
- 孙立峰周青汪渊袁凌云郑树
- 关键词：抑癌基因FHIT原发性肝癌外显子点突变
- 615系可移植性白血病小鼠血浆脂蛋白和血清蛋白质的变化
- 1994年
- 观察了两批共５１只Ｌ６１５小鼠血浆脂蛋白、ＴＧ、单个核细胞、肝、脾胆固醇及血清蛋白质水平的变化。与对照组比较，模型组脂质变化显著，除单个核细胞内、脾脏胆固醇降低外，大多数检测指标均明显升高，总胆固醇和ＶＬＤＬｃｈ增加最多，ＬＤＬｃｈ／Ｔｃｈ无什么变化，而ＨＤＬｃｈ／Ｔｃｈ降低非常明显（Ⅰ、Ⅱ组）并呈现外周血白细胞数愈高，降低愈多的关系。这些变化主要是ＶＬＤＬ降解速度慢。肝外组织摄取利用胆固醇能力降低所致。血清蛋白质变化主要是总蛋白、α１和γ球蛋白升高，反映急性反应性蛋白增加和体液免疫活性增强。我们的结果显示Ｌ６１５小鼠脂质代谢变化与人类白血病间存在一定差异，这种差异可能与白血病类型和动物种属有关。
- 汪渊张在和张蔡周青季秀生
- 关键词：白血病脂蛋白蛋白质615小鼠血浆血清
- 改良的碱裂解法提取动物细胞附加体DNA被引量：1
- 2009年
- 目的利用一种快速、简便的方法提取动物细胞附加体DNA。方法通过电转移的方法介导pEGFP-N1转染小鼠成纤维细胞NIH3T3和中国仓鼠卵巢癌细胞CHO等细胞系。转染后48h,收集转染细胞。用STET缓冲液重悬细胞,加入碱裂解液裂解细胞,再用7.5mol/L醋酸胺中和。离心收集上清,用1∶1酚/氯仿抽提2次,氯仿抽提1次,乙醇沉淀附加体DNA。TE溶解DNA。提取的DNA通过PCR和Southern blot方法进行分析。结果PCR和Southern blot结果证实利用改良的碱裂解法可以从动物细胞提取附加体DNA。结论利用简便快速的碱裂解法可以提取哺乳动物细胞附加体DNA。
- 周海胜汪渊秦宜德储斌张胜权周青沈继龙
- 关键词：质粒DNA
- 一原发性开角型青光眼家系的临床特点及致病基因的筛查被引量：3
- 2011年
- 目的对一常染色体显性遗传原发性开角型青光眼(POAG)家系患者进行临床特点的观察,并对致病基因MYOC/TIGR、OPTN、WDR36进行基因突变筛查。方法收集一常染色体显性遗传的POAG家系,其中8例患者,27例非患者。对该家系POAG患者进行视力、眼压、裂隙灯、前房角镜、眼底、部分行视野和光学相干断层成像(OCT)检查。抽取患者、家族成员及正常对照者外周静脉血,提取基因组DNA。应用聚合酶链式反应(PCR)方法扩增候选基因MYOC/TIGR、OPTN、WDR36的外显子及两侧翼部分内含子。将扩增出的PCR产物纯化后行双向测序以筛选突变位点。结果此POAG家系患者发病年龄均在24岁左右,患者进行性视神经萎缩、视野缺损,多数患者有二次手术史,眼压控制不佳,预后较差。PCR产物直接测序结果均未发现MYOC/TIGR、OPTN、WDR36基因的突变。结论通过对患者致病基因筛查,排除了该POAG家系是由MYOC、OPTN、WDR36基因突变引起,可能由其他相关致病基因突变所致。
- 高次子李寿玲江江汪渊周青孙安薛敏
- 关键词：系谱遗传筛查
- 乙型肝炎病毒前C区1896位点突变的PCR分析法被引量：2
- 1999年
- 李旭汪渊周青
- 关键词：乙型肝炎病毒PCR
- 临床医学专业留学生生物化学与分子生物学教学质量评价体系建设被引量：3
- 2016年
- 安徽医科大学于2010年开始招收来华学习的全英文教学本科临床医学专业留学生,随着对外交流的进一步加强,留学生的招生数量和招生规模也有所增加。该校高等教育中,留学生教育已成为重要组成部分。在医学专业留学生必修的课程中,生物化学与分子生物学是一门非常重要的专业基础课程,如何提高留学生对生物化学与分子生物学课程的学习兴趣并提高学习效果,是该课程教学中要研究的重要方向。根据历年教学中总结的经验和留学生本身的特点,该教研室提出在生物化学与分子生物学教学中建立一套新的适合留学生教学的教学质量评价体系,以提高留学生对该课程学习的兴趣、减轻学习压力,最终达到提高该课程学习效果的目的。
- 张素梅周青汪渊朱华庆
- 关键词：生物化学与分子生物学留学生教学教学质量评价体系
- 褪黑素对肝癌细胞系HepG2的增殖抑制作用及其与G蛋白-cAMP信号途径的关系被引量：3
- 2008年
- 目的研究褪黑素(melatonin,MT)对肝癌细胞系HepG2细胞的增殖抑制作用以及其对G蛋白-cAMP通路的影响。方法采用MTT法检测MT对HepG2细胞生长的影响,放免法检测细胞内cAMP水平,Westernblot法检测抑制型G蛋白α1(Gαi1)、抑制型G蛋白α2(Gαi2)、抑制型G蛋白α3(Gαi3)、刺激型G蛋白(Gαs)表达水平。结果MTT检测结果表明,MT在10-8～10-5mol.L-1的浓度范围内,72h共培养后,可有效抑制HepG2细胞增殖,且呈一定的时间浓度依赖关系。为进一步研究MT细胞增殖抑制作用与G蛋白-cAMP信号通路的关系,检测浓度为10-5mol.L-1的MT作用HepG2细胞后0、15、30、45、60、90、120min后Gαi1、Gαi2、Gαi3和Gαs和细胞内cAMP水平变化,结果发现MT作用HepG2细胞30min后可明显下调Gαi1、Gαi2、Gαi3的表达水平,但对Gαs表达无明显影响,同时发现MT处理后cAMP水平有下降的趋势,但是没有统计学意义。结论MT呈时间浓度依赖性的抑制体外培养的HepG2细胞生长,其机制可能与影响G蛋白-cAMP信号通路有关。
- 胡超杰朱华庆周青汪道兵胡冰汪渊王华
- 关键词：褪黑素G蛋白
- 抗人内皮细胞特异性分子-1单克隆抗体的研制和初步鉴定被引量：12
- 2004年
- 运用B淋巴细胞杂交瘤技术 ,以人内皮细胞特异性分子 1(ESM 1)蛋白为抗原 ,经PEG融合 ,有限稀释法筛选 ,获得了 7株稳定分泌抗人ESM 1的杂交瘤细胞株 ,其中 3A7细胞株特异性尤为显著 ,效价高达 1∶6 0 0 0。所分泌抗体亚型为IgG2b ,Westernblot结果表明对内皮细胞中的ESM 1蛋白及细胞培养上清中的ESM 1均可特异性识别。并观察到ESM 1主要分布在内皮细胞的细胞胞质伴胞核中。在肾组织中 ,ESM 1定位于血管内皮细胞 ,且肾癌标本中ESM 1阳性表达显著高于正常肾组织。免疫组化结果表明所获单抗具有一定的特异性和实用性。
- 熊江霞张素梅王雪胡向阳桂淑玉周青汪渊
- 关键词：内皮细胞特异性分子-1单克隆抗体特性分析免疫组化肾癌
- PMA对4-HPR抑制HepG2细胞体外迁移的影响被引量：1
- 2019年
- 目的观察乙酸肉豆蔻佛波醇(PMA)对N-(4-羟基苯基)维生素甲酰胺(4-HPR)抑制肝癌细胞HepG2体外迁移的影响,并探讨相关机制。方法 PMA单独或联合4-HPR处理HepG2细胞,倒置显微镜下观察HepG2细胞形态学变化和药物对生长的影响;细胞划痕实验检测HepG2细胞体外迁移能力的变化;Western blot法检测迁移相关蛋白神经钙黏蛋白(N-cadherin)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达和肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化程度。结果 PMA联合4-HPR处理组细胞密度小,形态更为细长;二者联合处理细胞迁移距离明显减少,而PMA单独处理细胞迁移距离增加(P <0. 05);抑制细胞迁移过程中,N-cadherin、MLCK表达减少,MLC磷酸化亦降低(P <0. 05)。结论 PMA联合4-HPR可抑制HepG2细胞的迁移,相比4-HPR组能更显著减少MLCK的表达和MLC的磷酸化,为进一步探讨4-HPR联合PMA治疗肝癌提供实验基础。
- 张玲张玲魏翔张素梅周青
- 关键词：肌球蛋白轻链激酶肝癌HEPG2迁移
