周剑锋
- 作品数:133 被引量:500H指数:11
- 供职机构:华中科技大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学建筑科学航空宇航科学技术更多>>
- Mcl-1基因在HL-60细胞对全反式维甲酸耐药机制中的作用被引量:10
- 2005年
- 目的探讨髓系白血病-1(Mcl-1)基因在HL60细胞对全反式维甲酸(ATRA)耐药中的作用。方法采用少量、递增、反复ATRA诱导HL-60细胞,建立ATRA耐药细胞系HL60/ATRA;利用鸡尾酒法制备Mcl-1基因的小片段干扰RNA(SmallinterferenceRNA,siRNA),并通过脂质体介导将其导入HL60/ATRA细胞;Westernblot检测Mcl-1蛋白在细胞中的表达;MTT实验、NBT还原反应实验、TUNEL免疫组化染色法分别检测细胞的增殖、分化和凋亡情况。结果HL60/ATRA细胞Mcl1蛋白相对灰度值为0.624±0.127,较野生型HL60细胞(相对灰度值为0.162±0.127)明显高表达,并可耐受100nmol/L的ATRA,而不发生分化、凋亡[凋亡率为(1.0±0.5)%];Mcl1siRNA导入HL60/ATRA细胞后,Mcl1蛋白表达下调(相对灰度值为0.267±0.086),恢复对ATRA的敏感性[凋亡率为(18.5±4.5)%]。结论Mcl1基因可能参与了HL60细胞ATRA耐药的形成;抑制Mcl-1基因可能成为一种新的逆转ATRA耐药的策略。
- 付劲蓉刘文励周剑锋孙汉英郑邈黄梅李春蕊冉丹罗莉
- 关键词:MCL-1基因HL-60细胞维甲酸耐药机制免疫组化染色法
- 干扰素-γ对脐血造血干/祖细胞细胞周期蛋白D各亚型表达的影响(英文)
- 2004年
- 体外观察干扰素 γ(interferon γ ,IFN γ)对脐血造血干 /祖细胞细胞周期蛋白D (cyclinD)不同亚型表达的影响 ,以探讨IFN γ造血抑制的机制。用免疫磁珠阳性分选的方法分离脐带血CD34+细胞 ,并进行体外扩增 ;用甲基纤维素半固体培养方法 ,观察IFN γ对脐血造血干 /祖细胞CFU GM形成的影响 ;用半定量RT PCR检测IFN γ对脐血造血干 /祖细胞cyclinD不同亚型表达的影响。结果显示IFN γ可以显著抑制脐血CFU GM的形成 ,并可以从mRNA水平抑制cyclinD2和CyclinD3亚型的表达。由此得出结论 ,IFN γ可以显著抑制cyclinD的表达 ,这可能是IFN γ介导造血抑制的一种机制。
- 孟凡凯谭细友刘文励孙汉英周剑锋周银莉吴宁孙岚
- 关键词:干扰素-Γ细胞周期蛋白D
- 104例非霍奇金淋巴瘤诊断回顾分析被引量:3
- 2007年
- 目的 总结现今非霍奇金淋巴瘤确诊途径和方法及病理类型.方法 回顾我院1995~2006年104例非霍奇金淋巴瘤诊断方法和临床主要症状,并对其病理诊断类型加以总结.结果 104例淋巴瘤患者结内发病62例,其中颈部,锁骨上淋巴结确诊50例.结外发病42例,其中皮疹和皮下结节活检确诊9例,脾切除确诊9例,胃镜活检确诊6例,骨髓形态学诊断6例.病理分型弥漫大B细胞淋巴瘤占32例,外周T细胞淋巴瘤15例,滤泡型12例,MALT 8例.结论 颈部和锁骨上淋巴结活检是确诊淋巴瘤的主要途径,但由于淋巴瘤的结外发病,使其诊断相当困难,组织活检是确诊的金指标.病理类型诊断非常重要,其中弥漫大B细胞淋巴瘤是NHL的主要类型.
- 汤屹刘文励周剑锋孙汉英郑邈李春蕊
- 关键词:非霍奇金淋巴瘤
- 临床病例讨论第317例——反复发热、肝、脾肿大
- 2005年
- 黄梅周剑锋赵婕冉丹刘文励
- 关键词:反复发热脾肿大临床病例讨论诱因体温用药
- MRP-1/CD9与高转移人乳腺癌MDA-MB-231细胞恶性行为相关性的体外研究被引量:1
- 2006年
- 目的:观察MRP-1/CD9对高转移人乳腺癌细胞系MDA-MB-231体外增殖和侵袭的抑制效应,并初步探讨其作用机制。方法:应用MRP-1/CD9特异性扩增引物,借助RT-PCR获得MRP-1/CD9全长cDNA片段,正向插入pcDNA3.1表达载体中,并将重组质粒导入MDA-MB-231细胞中,G418稳定筛选;应用CFSE-流式细胞仪检测,单层伤口愈合实验,软琼脂克隆形成实验等方法观察了MDA-MB-231细胞转染前后,细胞体外增殖及侵袭能力等指标的变化。Western blot检测AKT、p-AKT和SRC在转染前后的细胞中的表达变化。结果:成功构建全长MRP-1/CD9真核表达载体,将其转染入MDA-MB-231细胞后获得稳定表达MRP-1/CD9的MDA-MB-231克隆株(MDA-MB-231/CD9)。与空质粒转染后的MDA-MB-231细胞相比,MDA-MB-231/CD9细胞运动能力明显减弱,侵袭能力降低;p-AKT和SRC在MDA-MB-231/CD9细胞中表达明显降低。结论:MRP-1/CD9对细胞的运动和侵袭有抑制作用,这种作用与p-AKT和SRC的下调引起E-cadherin介导的粘附增强有关。
- 陈颖吴明富李琼游岚瑛魏军成周剑锋徐刚卢运萍马丁
- 关键词:MRP-1/CD9
- 伏立康唑治疗血液病合并侵袭性真菌病61例临床观察
- 2015年
- 目的:观察伏立康唑治疗血液病合并侵袭性真菌感染(IFD)患者的疗效。方法:回顾性分析61例伏立康唑治疗血液病合并IFD患者的临床资料。结果:足量足疗程的伏立康唑治疗血液病合并IFD的总有效率为67.2%,其中预防治疗31例中24例(77.4%)有效,经验治疗24例中13例(54.2%)有效,两者的差异无统计学意义(P>0.05)。9例患者用药后出现肝功能轻度异常,2例出现皮疹,1例出现恶心呕吐,均不影响治疗。结论:足量足疗程的伏立康唑治疗血液病合并IFD患者有一定疗效,不良反应较少。
- 李晓娟陈晓房金梅洪振亚孟力周剑锋张义成邓金牛
- 关键词:伏立康唑侵袭性真菌病血液病
- 应用重组人血小板生成素(rhTPO)临床观察被引量:20
- 2005年
- 目的 评价沈阳三生的重组人血小板生成素(rhTPO)对血小板减少患者的疗效和安全性。方法 11例血液恶性肿瘤患者和7例难治性ITP患者皮下注射rhTPO(1 0 μg/kg·d) ,动态监测注射后血小板生长情况。结果 肿瘤化疗组使用rhTP0 9d后,血小板计数较对照组明显升高(P <0 0 5 ) ,血小板恢复至10 0×10 9/L需19±9 4d ,较对照组2 4±6 .2d明显缩短。难治性ITP组显效6例,良好1例,总有效率10 0 %。无明显不良反应。结论 rhTPO对化疗后骨髓抑制引起的血小板减少及难治性ITP患者的血小板严重减少有促进增生作用。
- 黄梅张东华孙汉英邓金牛周剑锋刘文励
- 关键词:血小板减少
- 丁酸钠选择性诱导子宫颈癌细胞凋亡及其机制被引量:16
- 2003年
- 目的研究丁酸钠诱导子宫颈癌细胞株HeLa和原代培养的人胚肺成纤维细胞凋亡情况,建立丁酸钠选择性诱导子宫颈癌细胞凋亡模型,并探讨其诱导凋亡机制。方法倒置相差显微镜下观察细胞形态改变;MTT法检测药效动力学特征;流式细胞仪检测药物作用前后细胞凋亡情况;琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征性梯状条带,RT-PCR检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2转录水平。结果丁酸钠抑制细胞生长呈时效和量效关系,其对HeLa细胞的生长抑制作用较对人胚肺成纤维细胞的作用明显;亚G1峰和AnnexinV/PI、DNALadder结果显示,丁酸钠作用后HeLa细胞72h后出现的凋亡率显著高于人胚肺成纤维细胞;RT-PCR结果显示丁酸钠作用前后HeLa细胞中凋亡相关基因Bax和Bcl-2表达水平无明显改变。结论一定浓度的丁酸钠可以选择性诱导子宫颈癌细胞株HeLa凋亡,而对正常人二倍体细胞毒性较小,并且这种凋亡诱导作用并非通过调控Bax和Bcl-2的转录水平而实现。
- 奚玲吴明富冯永东王薇卢运萍周剑锋马丁
- 关键词:细胞凋亡丁酸钠流式细胞仪BAXBCL-2子宫颈癌
- 川芎嗪对骨髓移植小鼠骨髓中硫酸肝素表达水平的影响被引量:3
- 2001年
- 任天华孙汉英刘文励戴琪琳徐慧珍路武房明浩周剑锋
- 关键词:川芎嗪骨髓移植骨髓硫酸肝素
- 线粒体参与HL-60细胞耐药机制的研究
- 2005年
- 目的研究线粒体膜参与肿瘤耐药的可能机制。方法提取HL60及其耐药细胞线粒体,检测线粒体总ATP酶活性及Ca2+诱导下线粒体膜通透改变孔道开放和线粒体膜电位下降程度。结果HL60细胞线粒体总ATP酶活性明显高于其耐药细胞,Ca2+诱导下HL60细胞线粒体膜电位下降和膜通透改变孔道开放程度与其耐药细胞相比更明显。结论线粒体总ATP酶活性及Ca2+诱导下膜电位下降及膜通透改变孔道开放的程度与肿瘤细胞耐药有关。
- 黄伟张瑶珍李登举周剑锋
- 关键词:线粒体ATP酶线粒体膜电位耐药