刘维薇 作品数:75 被引量:196 H指数:6 供职机构: 同济大学附属第十人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家临床重点专科建设项目 上海市科学技术委员会资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 政治法律 自动化与计算机技术 更多>>
运用不同荧光定量PCR系统检测HBV—DNA定量检测的偏差评估 被引量:2 2012年 随着定量PCR在实验诊断领域的广泛应用,许多PCR实验室同时使用两台以上不同的荧光定量PCR仪参与日常检验报告的发送。但是,由于不同的检测系统间存在着差异,导致在结果判读时产生疑问:不同仪器系统检测的结果之间究竟存在多大的差异?是否在可接受范围之内?是否需要对结果进行修正?然而,目前国内在评估定量PCR检测的结果时,对于同一实验室内所出具的报告之间一致性并没有明确的体系可供参考。室内、室间质评的监测也只能说明质控合格的系统所出具的报告是可接受的,但无法对不同系统之间的结果进行比较分析。 胡婷婷 刘维薇 陈宇明 袁超 关明关键词:CR系统 DNA HBV 定量PCR检测 乙型肝炎病毒耐药基因测序检测性能验证 被引量:2 2014年 目的:探讨在ISO15189以及美国病理学家协会( CAP)实验室认可体系下,建立使用一代测序(Sanger测序法)进行乙型肝炎病毒(HBV)耐药基因检测的项目性能验证标准。方法方法学建立。2012年8至12月收集复旦大学附属华山医院肝炎门诊及住院患者中临床表现HBV耐药患者25例。从测定下限、精密度、正确性、分析特异性、可报告范围/参考范围等方面进行性能评估。测序质量的验证基于整体测序图谱的荧光信号值、性噪比、测序峰图、QV值等评估参数进行。结果可检测出正常背景下10%~20%的突变;有较好的精密度;正确性100%;未发现有明显干扰及交叉污染。结论测序方法的性能验证要结合实际应用。特别是测序分析的质量评估需要针对不同的检测目的以及检测对象建立相关标准并适当进行调整以符合临床需要。本试验方法检测乙型肝炎耐药基因可应用于临床检测。 胡婷婷 陈宇明 关明 刘维薇关键词:肝炎病毒 乙型 病毒 病毒 病毒载量 DNA SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测脑胶质瘤中RASSF1A mRNA 被引量:6 2004年 目的 建立检测RASSF1A(RASassociationdomainfamily 1ARASSF1A)mRNA的SYBRGreenⅠ实时定量PCR的方法 ,了解脑胶质瘤中RASSF1A的表达水平 ,研究RASSF1AmRNA的表达和肿瘤恶性程度的关系。方法 构建克隆载体作为定量模板 ,RocheLightCycler 定量检测 4 8例不同恶性程度胶质瘤组织和 6例正常脑组织标本。结果 4 8例脑胶质瘤组织中有 5例未检出RASSF1AmRNA。与内参照三磷酸甘油醛脱氢酶基因GAPDH(glyceraldehycle 3 phosphatedehydrogenase,GAPDH)比较后 ,RASSF1AmRNA的表达范围从 0 .0 8~ 1.0 0 /μg ,均值为 (0 .5 0± 0 .0 0 4 ) /μg。 6例正常脑组织标本均有RASSF1AmRNA的表达 ,范围从 0 .70~ 1.80 /μg ,均值为 (1.0 5± 0 .0 8) /μg。各期胶质瘤中RASSF1A的mRNA的表达水平均低于正常脑组织 ,但胶质瘤不同病理级别组之间的差异无显著意义。结论 胶质瘤中RASSF1A的mRNA的表达水平均低于正常脑组织。成功地建立了SYBRGreenⅠ实时定量检测RASSF1A基因表达方法 ,为研究RASSF1A表达水平下调的机制、表达水平和肿瘤的恶性程度、转移。 高云霞 关明 苏兵 刘维薇 陈宇明 张万忠 吕元关键词:脑胶质瘤 SYBR GAPDH 克隆载体 MS—HRM检测结直肠癌患者外周血AKAP12基因及其临床意义 被引量:4 2010年 目的 探讨MS-HRM法定量检测结直肠癌患者外周血中AKAP12基因甲基化程度及其临床意义.方法 采用MS-HRM法定量检测80例结直肠癌患者和20名健康人外周血中AKAP12基因的甲基化水平,并分析评价其与病理分期分级的关系.同时对MS-HRM法的重复性和与传统MSP法检测的灵敏度和检出率进行比较.结果 MS-HRM法从80例结直肠癌患者中检测到38例(47.5%)AKAP12基因启动子区域不同程度的甲基化患者(甲基化1%~20%的24例,20%~60%的12例,60%~100%的2例),20名健康人中仅检测到甲基化〈10%的2名.MS-HRM法检测AKAP12基因甲基化的灵敏度(1%)优于传统的MSP法(10%).AKAP12基因甲基化水平与结直肠癌患者的年龄、性别的差异无统计学意义(x2分别为3.13、1.70,P均〉0.05),但与结直肠癌的Dukes分期和分化程度的差异均有统计学意义(x2分别为5.93、8.41,P均=0.01).结论 外周血MS-HRM定量检测AKAP12基因甲基化程度的方法比传统MSP法灵敏度更高,AKAP12基因甲基化有望成为结直肠癌进展评估的分子指标. 刘维薇 关明 李骥 胡婷婷 李敏 刘春芳 林勇 魏取好 吕元关键词:甲基化 结直肠肿瘤 综合医院医学科创中心建设之十院模式 同济大学附属第十人民医院(以下简称“十院”)以“临床需求为驱动推行管理模式、运行模式、诊疗模式创新,聚焦优势学科提升临床技能、临床研究、成果转化创新能力”为医院转型发展战略。为实现医院转型发展的新升级、新跨越,十院积极布... 王克生 王勤婉 鲍美玉 刘维薇 徐辉雄 秦环龙关键词:诊疗模式 结直肠癌中AKAPO12基因甲基化及其肿瘤抑制作用 结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是我国最常见的恶性肿瘤之一,居肿瘤发病率第4位,居癌症死亡率第3位。随着饮食结构日渐精细化,高脂肪和低纤维素饮食,致使结直肠癌的发病率呈明显上升趋势,在大中城市较明显... 刘维薇关键词:结直肠癌 肿瘤抑制基因 基因甲基化 色素上皮衍生因子抑制肿瘤的生长及其机制 关明 吕元 张弢 刘维薇 姜昊文 项目所属科学技术领域:肿瘤分子生物学、细胞分子生物学胶质瘤是最常见的脑部恶性肿瘤,恶性度高,手术后容易复发,迫切需要新的治疗手段。色素上皮衍生因子(PEDF)是一种具有营养脑细胞、抑制血管新生和促进细胞分化功能的多功能蛋...关键词:关键词:肿瘤治疗 肿瘤分子生物学 胶质瘤 抗肿瘤药物 胃癌幽门螺杆菌感染与微卫星不稳定性的研究 2001年 目的 通过研究胃癌幽门螺杆菌 (Hp)感染与微卫星不稳定性 (MSI)的关系 ,探讨幽门螺杆菌在胃癌发生中的作用。方法 采用PCR为基础的方法对 41例胃癌组织中HpCagA基因以及 4个微卫星位点BAT2 6 ,TP5 3,D2s12 3,D2s119进行检测 ,分析Hp感染与微卫星不稳定性之间的关系。 结果 胃癌Hp和CagA的阳性率分别为 6 3.4% (2 6 / 41) ,6 9.2 % (18/ 2 6 )。BAT2 6 ,TP5 3,D2s12 3,D2s119位点MSI的检出率分别为2 1.9% (9/ 41) ,2 9.3% (12 / 41) ,2 9.3% (12 / 41)和 14.6 % (6 / 41)。Hp阳性组各位点MSI检出率与Hp阴性组比较无显著差异 (P >0 .0 5 )。CagA+ Hp组与CagA-Hp组各位点MSI检出率差异亦无显著性 (P >0 .0 5 )。 结论 Hp感染与MSI无显著相关 。 时俊 林庚金 钱立平 关明 刘维薇关键词:胃癌 幽门螺杆菌 微卫星不稳定性 HP MSI 结直肠癌中AKAP12的表达及其甲基化研究 收集一组结直肠癌及手术切缘远端的正常结直肠粘膜,进行AKAP12基因检测及其甲基化分析,并探讨其意义。 刘维薇 关明 陈宇明 林勇 刘春芳 张涛 吕元关键词:结直肠癌 基因表达 甲基化 文献传递 国外实验室自建项目管理带给我们的启示 被引量:5 2014年 实验室自建项目(laboratory developed tests,LDTs)在个体化诊断中发挥越来越重要的作用,同时也变得越来越复杂,风险很高,存在的问题和隐患亟待解决。国外,尤其是美国对LDTs的监管经历了几十年演变,逐步认识并强调监管的重要性,进一步规范各项监管措施。我国目前虽未允许LDTs在临床应用,但临床转化指日可待。理想的监管模式应该包括公正的、基于风险管理的监管方案、逐步监管、能力验证、临床有效性和实用性以及紧急使用授权规定等多个方面。LDTs是检验医学发展的一次机遇,应逐步建立并完善。 刘维薇 郑特 徐科 关明