刘祥
- 作品数：15 被引量：41H指数：5
- 供职机构：自贡市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金自贡市重点科技计划项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 四川泸县艾伯特埃希菌的分离与鉴定被引量：5
- 2017年
- 目的利用艾伯特埃希菌检测技术调查泸县地区家禽中艾伯特埃希菌的带染情况。方法采集市售鸭肠及鸡肠,肠内容物经EC肉汤增菌后,PCR检测eae基因,阳性增菌液接种麦康凯琼脂,挑取不发酵乳糖、eae阳性菌落进一步通过16S rDNA测序及MLST分析,确认为艾伯特埃希菌。结果本研究从147份鸡肠及内容物中检出12株疑似艾伯特埃希菌,经16S rDNA测序、MLST聚类分析表明该12株菌与艾伯特埃希菌参考菌株具有高度亲缘性,可证实为艾伯特埃希菌。结论本研究证实了泸县地区家禽中存在艾伯特埃希菌,表明艾伯特埃希菌检测技术有效可行,具有推广应用价值;获得的菌株为进一步推广研究艾伯特埃希菌生物学特征、流行病学等提供资源。
- 何雪连陈倚蒋双刘祥闫国栋王红
- 关键词：多位点序列分型RDNA
- 多位点序列分型(MLST)在艾伯特埃希菌鉴定中的应用被引量：13
- 2015年
- 目的探讨多位点序列分型技术在新病原艾伯特埃希菌发现与鉴定中的应用。方法采用MLST技术对生鲜肉中分离的30株疑似艾伯特埃希菌的7个管家基因进行PCR扩增、测序、DNAstar软件分析,核酸序列上传至大肠杆菌MLST数据库进行比对,确定其等位基因编号及基因序列型(ST型),并利用MEGA6.0软件Neighbor-joining法构建遗传进化树,与大肠埃希菌、志贺氏菌、艾伯特埃希菌和伤寒沙门氏菌参考菌株进行亲缘性分析。结果 30株菌可分为7种新序列型(16株)和4种已知序列型(14株),N-J分析显示与艾伯特埃希菌参考菌株具有高度亲缘性,而与大肠埃希菌、志贺氏菌、弗格森埃希菌和鼠伤寒沙门氏菌存在较大差异。结论 MLST在管家基因水平上准确地确定艾伯特埃希菌的种属关系,首次在国内发现艾伯特埃希菌的存在。
- 刘祥许彦梅王斌邓建平肖波孙松松周阳熊衍文王红
- 一种艾伯特埃希菌的检测方法
- 本发明公开了一种艾伯特埃希菌的检测方法，所述方法包括基于eae基因PCR初筛、乳糖不发酵等特点的艾伯特埃希菌分离培养初筛程序；诊断性三重PCR、基于16S rDNA序列分析、MLST分析的艾伯特埃希菌的鉴定程序。本发明利...
- 王红李群熊衍文刘祥张正东张玲邹年莉闫国栋
- 文献传递
- 艾伯特埃希菌快速鉴定方法比较研究被引量：4
- 2017年
- 目的评价目前用于快速鉴定艾伯特埃希菌方法的特异性。方法利用51株艾伯特埃希菌及其他对照菌株,分别评价基于clpX、lysP和mdh基因的三重聚合酶链式反应(PCR);基于EA0134基因的单重PCR;基于EACBF2103-EACBF2104基因的巢式PCR。结果 51株艾伯特埃希菌三重PCR均为阳性,鉴定吻合率为100%;巢式PCR两轮结果均为阳性,鉴定吻合率为100%,对照组第1轮PCR结果全部为阴性,但第2轮出现非特异条带。51株中49株EA0134基因为阳性,鉴定吻合率为96.08%,对照菌株中伤寒沙门菌和肠出血性大肠埃希菌O157∶H7扩增出大小类似的片段。结论 EA0134基因在一些菌株中缺失,会造成漏判,同时在部分肠道菌株中存在非特异性扩增,会造成误判。三重PCR和巢式PCR的第1轮扩增均具有高特异性,可作为目前艾伯特埃希菌分离株的PCR快速鉴定方法,为艾伯特埃希菌相关的临床诊断和突发公共卫生事件处置,提供准确快速的诊断依据。
- 刘祥张玲李新琼闫国栋邹年莉张正东李群熊衍文王红
- 关键词：特异性评价
- 一种艾伯特埃希菌的检测方法
- 本发明公开了一种艾伯特埃希菌的检测方法，所述方法包括基于eae基因PCR初筛、乳糖不发酵等特点的艾伯特埃希菌分离培养初筛程序；诊断性三重PCR、基于16S rDNA序列分析、MLST分析的艾伯特埃希菌的鉴定程序。本发明利...
- 王红李群熊衍文刘祥张正东张玲邹年莉闫国栋
- 3例单增李斯特菌感染的病原学、临床及流行病学特征分析被引量：12
- 2015年
- 目的分析四川省自贡市2014年3例单增李斯特菌感染的临床特征及其病原学特征。方法搜集临床病例信息;采用血清分型,脉冲场凝胶电泳技术和多位点序列分型方法对单增李斯特菌进行分子分型。结果 3例患者均为免疫力低下人群,有发热和败血症症状;3株单增李斯特菌中2株为1/2a血清型、ST8型,1株为1/2b血清型、ST778型,3株PFGE带型均不同。结论免疫力低下人群易受单增李斯特菌侵袭性感染。通过与国内外食品及病人单增李斯特菌相关流行学资料比较,提示国外流行克隆群以及国内某些流行型菌株可引起国内李斯特菌病散发,甚至成为将来暴发的隐患。
- 王红王艳张正东陈曦邓建平肖波刘祥王斌文海范晖叶长芸李群
- 关键词：单增李斯特菌流行病学特征
- 16SrDNA序列在艾伯特埃希菌鉴定中的应用被引量：8
- 2016年
- 目的通过16S rRNA基因序列分析快速鉴定艾伯特埃希菌。方法以30株疑似艾伯特埃希菌为材料,使用通用引物扩增其16S rRNA基因并进行测序。获得的序列与艾伯特埃希菌型菌株LMG 20976,基因组测序菌株KF1、NBRC107761、TW07627以及其他密切相关的细菌种(大肠埃希菌、赫曼埃希菌、费格森埃希菌、志贺菌和Shimwellia blattae)的16S rRNA基因序列进行比较,并使用N-J法构建进化树来分析其相关性。结果 30株疑似艾伯特埃希菌的16S rRNA基因序列与艾伯特埃希菌参考菌株的序列相似性最高,并与其聚类为一簇,为艾伯特埃希菌。结论 16S rRNA基因测序分析可用于艾伯特埃希菌的快速鉴定。
- 王斌王红熊衍文许彦梅刘祥肖波孙松松周阳白锐张玲
- 关键词：RDNA
- 一种同时检测艾伯特埃希氏菌O1‑O7血清型的试剂盒
- 本发明提供了一种同时检测艾伯特埃希氏菌O1‑O7血清型的试剂盒，属于多重PCR检测技术领域。本发明的试剂盒含有分别针对艾伯特埃希氏菌O1‑O7血清型的特异性引物对和一对内参引物，特异性引物对的核苷酸序列分别如SEQ ID...
- 李群郑翰王红熊衍文李新琼张正东刘祥张玲邹年莉闫国栋
- 艾伯特埃希菌多重PCR检测方法的建立
- 2018年
- 目的建立一种快速检测艾伯特埃希菌的多重PCR检测方法。方法根据lysP和EA0134基因建立多重PCR反应体系,并对引物浓度、反应时间及温度等反应条件进行优化,同时评价其灵敏性和特异性。运用该方法对实验室分离的63株艾伯特埃希菌菌株及增菌液和非艾伯特增菌液进行了检测。结果两对引物均能特异性扩增相应的基因,其灵敏性均为25 CFU/反应(500 CFU/ml)且非常特异。对本实验分离的艾伯特埃希菌增菌液和非艾伯特埃希菌增菌液的检测结果与之前传统方法的一致。结论本研究建立的多重PCR方法可用于艾伯特埃希菌的初步筛查和分离株的鉴定,为艾伯特埃希菌的快速鉴定和鉴别提供了一种新的检测方法。
- 李新琼张正东熊衍文许彦梅刘祥张玲闫国栋邹年莉李群王红
- 关键词：多重PCR基因
- 艾伯特埃希菌PFGE分子分型及其数据库的建立被引量：1
- 2018年
- 目的建立艾伯特埃希菌PFGE分子分型方法,分析不同来源艾伯特埃希菌间的同源关系,并建立其PFGE分型数据库。方法参考非O157大肠埃希菌PFGE分型方法,对从自贡、泸县地区分离的63株艾伯特埃希菌和1株艾伯特埃希菌参考菌株LMG20976进行PFGE分析,利用Bio Numerics 7.5软件分析PFGE图谱并建立数据库,并对分型结果与样本来源、类型、ST型、intimin亚型等进行关联性分析。结果 64株艾伯特埃希菌分型效果明显,被分为46种PFGE带型,分别命名为EASX01001~EASX01046,相似度为55%~100%,包含9种克隆群(≥2种带型形成克隆群),同种带型超过2株的带型共有8种。结论非O157大肠埃希菌PFGE分型方法适用于艾伯特埃希菌分型研究,比MLST技术具有更高的分辨能力,通过图谱分析发现艾伯特埃希菌具有遗传多样性的特点。同时,建立的数据库为深入了解艾伯特埃希菌的分子流行病学特征提供科学依据。
- 刘祥张玲闫国栋张正东王红李群
- 关键词：脉冲场凝胶电泳
