刘盛邦
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
- 供职机构：四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 乳糖诱导重组尿酸酶基因在大肠杆菌中的表达被引量：12
- 2009年
- 对用乳糖替代异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组产朊假丝酵母尿酸酶基因在E.coliJM109(DE3)中表达进行了研究,拟建立一种高效低成本的生产重组尿酸酶的工艺路线。通过摇瓶试验对诱导所采用的乳糖浓度,诱导时机和诱导持续时间进行了优化,并考察在乳糖诱导下的目的产物表达动力学,随后在5L发酵罐上进行扩大化培养以验证摇瓶优化的结果,进一步将乳糖作为诱导剂应用于高密度发酵过程。实验结果表明乳糖诱导的最佳浓度为5g/L,最佳诱导时机是对数生长期中后期,诱导持续时间为9～10h;按照优化的条件在摇瓶和5L发酵罐上进行分批培养,重组尿酸酶最大表达量可达菌体总蛋白的26%左右,可溶性蛋白的36%左右,略高于IPTG的诱导效果;高密度发酵过程菌体终密度达到OD600值40以上,尿酸酶表达量占菌体总蛋白25%左右。
- 邓永康吴民泸刘盛邦杜林方伍黎黎李曼孟延发
- 关键词：尿酸酶乳糖高密度发酵
- 苦瓜籽α-苦瓜素的分离纯化及其生物活性的研究被引量：3
- 2010年
- 目的建立一种快速、高效制备α-苦瓜素的方法 ,并初步研究其部分生物活性。方法用硫酸铵分级沉淀、SP-Sepharose FF离子交换层析、Sephacryl S-100分子筛层析以及Macrocap SP离子交换层析等方法 ,从苦瓜籽中纯化出苦瓜蛋白(α-MMC);通过MTT实验,研究了α-MMC的抗肿瘤活性;测定HepG2.2.15 cell的培养上清液中HBsAg和HBeAg的含量,研究了α-MMC的抗HBV活性。结果与结论α-MMC具有抑制HBV和肿瘤细胞增殖的作用,呈时效和量效依赖性。
- 刘盛邦吴民沪黄文虎杨梅强邓缅姚兴川孟延发
- 关键词：分离纯化抗肿瘤活性抗病毒活性
- 苦瓜籽MAP30的聚乙二醇化学修饰条件优化及纯化研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨聚乙二醇修饰苦瓜籽核糖体失活蛋白(MAP30)的反应条件以及修饰产物的纯化方法。方法在不同条件下,将聚乙二醇活性酯(mPEG)2-NHS与MAP30反应,用SDS-PAGE分析不同反应条件对产物成分的影响;采用Sephacryl S-300HR分子筛柱色谱法对修饰产物进行分离纯化,TNBS法测定目标产物PEG-MAP30的氨基修饰度。结果聚乙二醇修饰MAP30的最优反应条件为4℃,pH8.5硼酸硼砂缓冲液,MAP30质量浓度1mg/mL,MAP30与(mPEG)2-NHS质量比1∶10为最佳修饰条件,5min内反应完全;反应产物进一步纯化,经SDS-PAGE检测目标产物PEG-MAP30中不含未修饰的MAP30;TNBS法测定MAP30的氨基修饰度为44.9%。结论初步确定了聚乙二醇修饰MAP30的反应条件和修饰产物的纯化方法。
- 张永明刘盛邦黄凯聂宇孟延发
- 关键词：聚乙二醇化学修饰
