刘洵
- 作品数：6 被引量：47H指数：3
- 供职机构：湖南农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 嗜水气单胞菌Lamp检测方法的建立及应用被引量：22
- 2007年
- 基于嗜水气单胞菌气溶素（aerolysin）基因的序列，设计了1套引物，通过条件优化，成功建立了针对致病性嗜水气单胞菌的环媒恒温基因扩增（Lamp）检测法。采用Lamp法对病原菌进行了扩增，并对病鱼血样进行了检测。结果表明，该法只检出致病性嗜水气单胞菌。对不同浓度的细菌悬液扩增结果表明，Lamp检测嗜水气单胞菌的最低菌液浓度为1．4～14／μL。
- 程天印刘洵常小斌
- 关键词：嗜水气单胞菌
- 应用解旋恒温基因扩增技术检测沙门氏杆菌被引量：2
- 2007年
- 为寻求快速简便的检测沙门氏杆菌及其他病原生物新方法,以沙门氏杆菌invA基因为目的片段,设计特异性引物,通过条件优化,建立了检测沙门氏杆菌的HDA法,用4株沙门氏杆菌和6种其他病原菌(大肠埃希菌、志贺氏菌、变形杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、链球菌)考核特异性,用稀释法测定灵敏度.结果表明,本研究建立的HDA法可在恒温水浴锅中进行,扩增时程75 min;阳性检测率为100%,无假阳性;用HAD法检测12份饲料样品,结果检出沙门氏杆菌呈阳性的3份,阳性率为25%.HDA法极适合基层实验室使用.
- 刘洵程天印王晓君
- 关键词：沙门氏杆菌
- 水孔蛋白与生理学理论的更新
- 2007年
- 水孔蛋白(Aquaporins,AQP)是新近发现的一组与水通透有关的细胞膜转运蛋白,广泛存在于动物、植物及微生物细胞膜上.目前已有很多文献介绍水孔蛋白的发现过程和研究进展,但有关知识还没有融入高校的专业教材或及教学中去.本文首先对水孔蛋白作简单介绍,随后提出了将该进展融入生理学,更新其理论的设想.
- 程天印刘洵
- 关键词：水孔蛋白水通道动物生理学
- 环介导等温基因扩增技术及其应用研究进展被引量：14
- 2006年
- 本文简单综述了环介导等温基因扩增方法(LAMP法)的基本原理,操作方法及其研究进展。LAMP法是一种简便、快速、高效、特异性很强的基因扩增方法,尤其适合于人类和动物疫病的检测。
- 常小斌刘洵程天印王小君陈宇明
- 内引物在环媒恒温基因扩增技术中的作用研究
- 2008年
- 目的研究内引物在环媒恒温基因扩增(LAMP)中的作用,确定利用LAMP的同一套特异性引物区别具有单核苷酸差异的不同株型或同一株型的病原菌基因的可行性。方法采用PCR介导定点突变法对沙门氏菌invA基因定点突变,使其T669→A669、T725→A725,用原LAMP特异性引物扩增含单核苷酸差异序列,观察扩增结果。结果制备的点突变模板C大小与预期值(1 371 bp)一致。LAMP扩增的伤寒沙门氏菌CMCC50098标准株DNA产物的电泳条带呈梯状,而扩增模板C未扩出反应产物。结论LAMP不能利用同一套引物扩增具有单核苷酸差异的不同株型或同一株型的病原菌,即可利用同一套引物区分这些病原菌。
- 刘洵程天印王晓君
- 关键词：基因突变
- 赖解旋酶恒温基因扩增技术的原理、应用和展望被引量：12
- 2007年
- 赖解旋酶恒温基因扩增方法(HDA法)是新近发明的一种简便、快速、高效的体外恒温基因扩增技术.该法依靠DNA解旋酶解开双链DNA、单链DNA结合蛋白(SSB)维持单链状态、DNA聚合酶催化靶片段的扩增.研究表明,HDA能扩增微生物基因组DNA、病原菌DNA、质粒DNA和cDNA等,从灵敏性、准确性和可操作性几方面看,该方法具有广阔的实用前景.
- 刘洵程天印常小斌王小君
- 关键词：DNA解旋酶
