兰磊
- 作品数:5 被引量:5H指数:2
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- 优良玉米自交系丹598和丹988幼胚愈伤组织的诱导和再生被引量:2
- 2009年
- 采用玉米自交系丹598和丹988的幼胚作为外植体,以N6和MB培养基为基本培养基,探讨基因型、培养基种类、激素种类和浓度对愈伤组织诱导率的影响,分析不同基因型愈伤组织生长旺盛时期的异同。结果显示:基因型对愈伤组织诱导率高低影响显著,且基因型和培养基之间存在相互作用。2,4-D对玉米幼胚愈伤组织的诱导形成是必需的,浓度为2.0mg/L时大多能诱导出胚性愈伤组织。本试验建立了玉米自交系丹598和丹988的优良再生体系,为以后的基因转化工作打下了良好基础。
- 牛亚玲王丕武曲静高雯雯王俊玲王薇兰磊
- 关键词:玉米幼胚愈伤组织
- 酸性蛋白酶pepB基因植物表达载体的构建及在玉米中的转化被引量:2
- 2009年
- 以黑曲霉基因组DNA为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增了酸性蛋白酶pepB基因序列,并将其克隆到pMD18-TVector上,对重组子进行了PCR检测和限制性内切酶分析并测序。DNA序列分析表明:克隆片段长为1340bp,与已发表的pepB基因序列同源性达99.85%。将pepB基因片段插入到带有耐盐基因的表达载体pCAMBIA1301-BADH上,构建了无抗生素选择标记的重组质粒pB-pepB-35S,从而得到了植物表达载体,该载体利用耐盐基因BADH替代抗生素基因作为筛选标记。通过花粉管通道法将其导入玉米自交系,获得了转基因植株,并得到了转化植株的种子。
- 王巍王丕武王俊玲付永平兰磊杨金慧
- 关键词:玉米基因转化
- 植物防御素D1玉米种子特异表达载体构建及在玉米中的转化
- 本研究首次成功地将防御素dl基因导入了重要的禾谷类作物玉米,并拓宽了农杆菌转化玉米的基因型,成功地转化了2个新型当地玉米自交系丹598, 988的愈伤组织,经分化诱导出苗后进行分子生物学检测,获得了可育的转基因植株,相对...
- 王俊玲王巍付永平马建兰磊牛亚玲王丕武
- 关键词:玉米种子农杆菌分化诱导玉米转基因
- 文献传递
- 植物防御素D1基因种子特异表达载体构建及在玉米中的转化被引量:1
- 2010年
- 以绿豆基因组DNA为模板,通过PCR技术扩增了绿豆防御素D1基因序列,与GenBank中绿豆防御素基因的相应片段有99.08%同源性,克隆片段长为355bp。将种子特异启动子sbeIIb和D1基因插入到带有耐盐基因的表达载体pCAMBIA1301-BADH中,构建了无抗生素选择标记的种子特异表达载体pSBEIIb-D-B,该载体是利用耐盐基因BADH替代抗生素基因作为筛选标记,消除了对环境及肠道微生物的潜在威胁。将该载体利用超声波辅助农杆菌介导法转化了2个玉米自交系丹598、988的愈伤组织,经分化诱导出苗后进行PCR检测,证明得到转基因阳性植株,相对转化率最高达到7.8%。
- 王俊玲王丕武王巍付永平马建兰磊牛亚玲
- 关键词:玉米防御素表达载体构建转基因技术
- 植物防御素D1玉米种子特异表达载体构建及在玉米中的转化
- 作为一种重要的广谱抗菌多肽,防御素(Defensin)能在较低浓度下对多种病原菌具有杀伤作用,而无毒副作用,具有广阔的开发应用前景。然而天然防御素提取困难,而且制备成本高。因而
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- 文献传递