乔仁良
- 作品数：13 被引量：18H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军南京军区军事医学研究所更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用国产重组抗原研制丙肝病毒抗体检测试剂被引量：1
- 1999年
- 用克隆表达的丙型肝炎病毒核心蛋白及非结构 3区蛋白、非结构 4区蛋白和非结构 5区蛋白作为抗原 ,研制装配了第三代丙肝病毒抗体检测试剂。用该试剂检测国家第三代丙肝病毒抗体检测试剂标准血清 ,40份阴性血清全部符合 ,40份阳性血清出现 1份假阴性。
- 李越希乔仁良周宗安陶开华邓小昭仲晓萍
- 关键词：丙型肝炎病毒抗体酶联免疫吸附法
- 丙型肝炎病毒核心蛋白基因在大肠杆菌内的表达及应用被引量：4
- 1994年
- 将从中国丙肝病人血清中扩增克隆的丙型肝炎病毒核心蛋白基因（４０８ｂｐ）酶切处理后插入表达载体ｐＪＬＡ５０２内，获得高表达核心蛋白的重组工程菌。将重组菌经４２℃热诱导５ｈ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明，表达的核心蛋白占菌体蛋白总量的２０％。经分子筛和吸附层析纯化后获得的核心蛋白，ＥＬＩＳＡ检测证实有较好的抗原性和特异性。用表达的核心抗原加用表达的ＮＳ＿３抗原（Ｃ＿３３）装配的抗－ＨＣＶ试剂盒，经用标准血清验证及与国外第二代抗－ＨＣＶ试剂盒比较，证实符合丙肝诊断试剂要求。
- 李越希唐家琪史江赵学忠乔仁良
- 关键词：丙型肝炎病毒
- 用杆状病毒载体在家蚕细胞中表达HBeAg基因被引量：8
- 1998年
- 以ＰＣＲ技术扩增含有ＰｒｅＣ信号肽序列及完整的ＨＢｅＡｇ基因的序列（即ＨＢｃＡｇ基因５′端４４７ｂｐ），在５′端加上合适的酶切位点，克隆到家蚕核多角体病毒转移载体ｐＢｍ０３０上，与野生型ＢｍＮＰＶＤＮＡ共转染家蚕ＢｍＮ细胞，空斑纯化后得到多角体基因失活的重组病毒。ＥＬＩＳＡ法测定表明培养液上清中ＨＢｅＡｇ效价达１∶３２０００，细胞内ＨＢｅＡｇ效价为１∶２０００，培养液及细胞内的ＨＢｃＡｇ含量极低（＜１∶１６０）。研究结果表明，ＢｍＮ细胞能正确识别与切割ＨＢｅＡｇ信号肽序列，所表达的ＨＢｅＡｇ效价高，纯度好。
- 邓小昭刁振宇何亮乔仁良张林元
- 关键词：E抗原家蚕乙型肝炎病毒
- 简易实用的抗HBsEIA诊断药盒的研制及其在新兵体检中的应用
- 1995年
- 研制了一种价廉、质量稳定、操作简便、特别适用于基层部队和广大农村的抗ＨＢｓＥＩＡ诊断药盒，该药盒４℃下保存３个月与新制备药盒性能相似。用本药盒与市售精装药盒对比检测４４９份新兵血清标本，一致率为９８．８９％，阳性率（３０．５％，１３７／４４９）略高于市售药盒（２９．４％，１３２／４４９）。阳性标本经中和试验证明特异性良好。
- 吴鸿银乔仁良
- 关键词：表面抗体酶免疫测定诊断药盒
- 用家蚕细胞表达HBeAg及其应用
- 1998年
- 对经重组病毒感染的ＢｍＮ细胞的表达产物ＨＢｅＡｇ进行实验研究，并与菌产ＨＢｅＡｇ进行了比较。结果表明用家蚕细胞表达的ＨＢｅＡｇ分别作为捕获和酶标抗原建立的检测抗ＨＢｅ方法，不仅传统方法检测的阳性标本全部阳性，而且在传统方法阴性（抗ＨＢｃ阳性）组中，检出２例阳性，在抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ全部阴性的４２例标本中，也发现２例阳性。说明本法的敏感性高于传统方法。同时，用此方法制备的ＨＢｅＡｇ，在相同的蛋白浓度下，其抗原反应性也比用原核细胞表达的ＨＢｅＡｇ高出１００倍，且与抗ＨＢｃ交叉反应低１００倍，表明用家蚕细胞表达的ＨＢｅＡｇ不但效价高，且特异性、敏感性均优于大肠杆菌表达系统产生的ＨＢｅＡｇ。
- 李保同邓小昭乔仁良何亮刁振宇高健
- 关键词：乙肝病毒E抗原基因表达家蚕细胞
- 甲型肝炎病毒在3株细胞中的增殖和连续传代被引量：1
- 2001年
- 目的 :观察甲型肝炎病毒 (HAV )在 3个不同的细胞株中连续传代时的增殖特点。 方法 :将 HAV NJ- 3株先以常规传代方式适应不同的细胞株 :FRh K4细胞、PL C/ PRF/ 5细胞、2 BS,然后将适应病毒接种于细胞 ,并随细胞传代。用 EIA、IFA和激光扫描共聚焦显微镜观察带毒细胞连续传代中的病毒增殖。 结果 :1NJ- 3株 / K4细胞于第 5代 HAAg出现阳性 ,第 17、18代时达到高峰 ,2 4代直至 35代均为阴性。 2 NJ- 3株 / 2 BS细胞仅在第 6代出现一次弱阳性 ,传至 35代均呈阴性。 3NJ- 3株 / PL C则在第 3代即可测得 HAAg,第 7代 A值达 0 .80 2 ,P/ N值13.9,并保持此水平至少 70代以上。病毒产量稳定 ,细胞形态良好。冻存 10年的 HAV/ PL C株复苏后 ,仍保持良好的产毒性能。HAV/ PL C传代或收获的最佳周期为 5天。 结论 :HAV NJ- 3株能适应三种不同的传代细胞株 ,但只能在 PL C/ PRF/ 5细胞中长期随细胞传代 。
- 郑纪山何亮王宏周宗安邓小昭乔仁良
- 关键词：甲型肝炎病毒细胞培养连续传代
- 精装HbsAgEIA诊断药盒稳定性的动态观察
- 1994年
- 精装ＨｂｓＡｇＥＩＡ诊断药盒稳定性的动态观察吴鸿银，乔仁良（南京军区军事医学研究所，２１０００２）检测ＨＢｓＡｇ不仅在临床及流行病学的研究中有重要意义，而且在筛选献血员、确保血液及血液制品的安全性等方面更有突出的意义［１］，我所是国家定点生产病毒性肝...
- 吴鸿银乔仁良
- 关键词：药盒献血员血液制品标准品免疫学检验
- 检测血清HBcAg的简易法被引量：2
- 1992年
- 自从Almeida等用吐温80裂解Dane颗粒发现乙型肝炎核心抗原(HBcAg)以来,国内外学者对检测血清HBcAg十分关注。他们认为,检测血清HBcAg可作为判断乙肝预后及检定无症状HBsAg携带者有无传染性的一项指标。由于过去所用的一些检测方法需要超速离心机、反复离心洗涤或用滤膜抽滤,因此难以推广应用。我们通过实验探索,建立了一种敏感性高、血清标本用量小、操作简便的检测血清HBcAg的新方法,现介绍如下。
- 吴鸿银潘秀珍乔仁良
- 关键词：乙型肝炎核心抗原血清
- 广谱高特异性重组丙型肝炎病毒抗原的制备纯化及鉴定
- 1996年
- 利用逆转录PCR技术克隆了中国株HCV的核心蛋白基因和非结构3区蛋白基因,DNA序列无分析显示克隆的基因片段属HCV-Ⅰ型。将二个基因片段分别克隆至质粒表达载体内,构建了多株表达融合和非融合核心蛋白的工程菌及表达非结构3区蛋白的工程菌。建立了二种重组蛋白的纯化方法,
- 李越希唐家琪乔仁良陶开华何亮潘秀珍李先富郭恒彬于明明
- 关键词：基因片段重组蛋白特异性工程菌非结构中国株
- 丙肝病毒非结构4区和5区抗原的克隆表达及纯化鉴定
- 1999年
- 通过分析丙肝病毒（ＨＣＶ） 的非结构４ 区（ＮＳ４） 和５ 区（ＮＳ５）蛋白的氨基酸序列，推测确定抗原决定簇位点。用ＲＴ－ ＰＣＲ 技术从中国丙肝病人血清中扩增克隆含抗原决定簇基因的ＮＳ４ 及ＮＳ５ 基因，将该两段基因分别克隆至质粒表达载体ｐＥＴ２８ａ（ ＋ ） 内，转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３） ，构建成功了高效表达ＮＳ４ 和ＮＳ５ 蛋白的工程菌，ＩＰＴＧ 诱导后两蛋白在工程菌内的表达量分别约占菌体蛋白的３３ ％ 和２８ ％ 。经Ｓｅｐｈａｒｃｒｙｌ Ｓ－ ２００ 分子筛及Ｎｉ－ ＮＴＡＳｅｐｈａｒｏｓｅ 螯合层析纯化，获得了较纯的重组ＮＳ４ 和ＮＳ５ 蛋白。用纯化的ＮＳ４ 和ＮＳ５ 蛋白作抗原ＥＬＩＳＡ 法检测ＨＣＶ抗体阴、阳性血清，证实它们有较好的抗原性和特异性。
- 李越希周宗安陶开华乔仁良邓小昭郑纪山仲晓萍
- 关键词：HCV蛋白纯化抗原
