齐雪峰
- 作品数:85 被引量:215H指数:8
- 供职机构:西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金四川省重点科学建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 溶葡萄球菌素对小鼠肠道菌群结构的影响被引量:2
- 2012年
- 【目的】研究溶葡萄球菌素对小鼠肠道菌群结构的影响,为溶葡萄球菌素的食用安全性评估提供参考。【方法】将24只7周龄ICR小鼠随机分为3个试验组和对照组,3个试验组分别提供溶葡萄球菌素含量为1μg/mL(低剂量)、5μg/mL(中剂量)和15μg/mL(高剂量)的饮水10mL/(只.d),于饮用第0(饮用前),1,3,7,14,21天以及停饮第3,7,14天采集小鼠新鲜粪便样品,采用PCR-DGGE技术检测小鼠肠道菌群结构变化。【结果】DGGE图谱显示,各组小鼠试验前后不同时间肠道内的优势菌种相似;经UPGMA聚类分析,与对照组相比,低、中剂量溶葡萄球菌素对小鼠肠道菌群结构影响较小,高剂量溶葡萄球菌素对小鼠肠道菌群结构影响较大;差异性分析结果显示,试验组饮用各阶段带谱与试验前的相似性与对照组相应阶段的相似性差异均不显著(P>0.05),溶葡萄球菌素低、中和高剂量组在停饮后第7天带谱与饮用前的相似性分别达到了70.8%,66.9%和63.8%;对图谱中主要条带进行测序和比对分析,结果表明,高剂量溶葡萄球菌素对小鼠肠道中Lactobacillus taiwanensis和1株不可培养细菌有促进作用。【结论】溶葡萄球菌素对小鼠肠道菌群结构的改变具有浓度依赖性,且停饮后小鼠肠道菌群结构有一定程度的恢复。
- 苏运芳李义齐雪峰马会明张涌赵献军
- 关键词:肠道菌群变性梯度凝胶电泳
- 嗜酸乳杆菌体外黏附山羊子宫内膜上皮细胞条件的优化被引量:2
- 2011年
- 【目的】优化嗜酸乳杆菌对永生化山羊子宫内膜上皮细胞体外黏附的条件。【方法】通过革兰氏染色法,研究山羊子宫内膜上皮细胞的生长状态,嗜酸乳杆菌菌液浓度、菌体生长状态和pH值以及孵育时间对菌体黏附性能的影响。【结果】当山羊子宫内膜上皮细胞培养48 h,嗜酸乳杆菌菌液浓度为1.0×109mL-1,pH值为4.0,孵育时间120 min,嗜酸乳杆菌培养24 h时,嗜酸乳杆菌对山羊子宫内膜上皮细胞的黏附性最好。【结论】永生化山羊子宫内膜上皮细胞作为细菌黏附性能研究的体外模型是有效可行的。
- 白东宁齐雪峰赵献军段连茂靳亚平李义王大会王芳
- 关键词:嗜酸乳杆菌子宫内膜上皮细胞体外培养
- 基于TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR对DPV弱毒在家鸭体内侵染、增殖和排泄规律的研究
- 探讨鸭瘟弱毒苗在不同途径免疫鸭体内侵染、增殖和排泄规律,鸭病毒性肠炎病毒(DEV)弱毒Cha株经皮下、口服和滴鼻途径免疫20日龄樱桃谷鸭后,应用TaqMan-MGB 探针实时荧光定量PCR(FQ-PCR)对实验鸭免疫后第...
- 齐雪峰杨晓燕程安春汪铭书郭宇飞贾仁勇陈孝跃
- 关键词:TAQMAN-MGB探针实时荧光定量PCR鸭病毒性肠炎病毒排泄规律
- 文献传递
- 壳聚糖及其衍生物作为疫苗佐剂研究进展被引量:7
- 2020年
- 近年来,随着新型基因工程疫苗的快速发展,其在疫病防控中发挥越来越重要的作用。与传统疫苗相比,新型疫苗特异性好、安全性高,但同时也存在免疫原性弱,难以诱导机体产生有效的免疫应答等不足。如何利用安全有效的免疫佐剂来增强新型疫苗免疫效果已成为当前亟待解决的突出问题。壳聚糖是来源于甲壳质的天然高分子化合物,具有良好的黏膜吸附性、生物相容性、安全性和可改造性,与传统免疫佐剂相比,它不仅能够协助疫苗激活机体的体液免疫,更能有效激活机体的细胞免疫,尤其是其可增强疫苗诱导的黏膜免疫效应。论文就近年来有关壳聚糖及其衍生物的理化特性、作为疫苗佐剂的优势及机制等进行综述,以期为壳聚糖及其衍生物佐剂作用机理研究与临床应用提供参考。
- 周佳升潘熙李云香杨文霞齐雪峰
- 关键词:壳聚糖黏膜免疫免疫佐剂
- 复合植物精油对猪源3种细菌的体外抑菌作用被引量:3
- 2022年
- 为了解由香芹酚、肉桂醛和百里香酚配制的复合植物精油对猪源肠道致病菌的体外抑菌活性及其对细胞炎症反应的影响,分别采用纸片扩散法、宏量肉汤稀释法测定复合植物精油对3种致病菌的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC),并采用透射电镜观察复合植物精油作用后3种致病菌形态结构变化,将3种致病菌与猪小肠上皮细胞共孵育建立体外炎症损伤模型,通过荧光定量PCR检测复合植物精油对该模型炎性细胞因子mRNA表达的影响。结果表明,复合植物精油对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的抑菌圈直径分别为(15.60±0.79)mm、(19.17±0.85)mm、(11.43±0.31)mm,其对3种致病菌的最小抑菌浓度均为0.42μL/mL;经复合植物精油处理6 h后,3种细菌细胞壁、膜结构完整性被破坏,细胞内容物泄漏,细胞产生空腔甚至空化;与对照组相比,炎症损伤模型中细胞IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA水平极显著上调(P<0.01),与复合植物精油共孵育6 h后炎症损伤模型中细胞IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA水平极显著降低(P<0.01)。结果表明,复合植物精油对猪源肠道致病菌有显著抑制作用,且能显著降低致病菌感染的猪小肠上皮细胞炎性细胞因子表达水平。
- 杨阳聂丰秋邹盼盼史立建王朝霞王春江王迈曹省艳齐雪峰
- 关键词:抑菌活性炎症
- 实时荧光定量PCR检测感染小鼠肠道内容物的LT肠毒素基因
- 2011年
- 构建LT-PMD19质粒标准品,进行SYBR Green荧光定量PCR检测产肠毒素大肠杆菌(ETEC)LT基因,以确定该方法的特异性和灵敏度,绘制标准曲线;通过腹腔注射0.2mL ETEC菌液建立小鼠腹泻模型,分别于感染后4h、15h、2d、7d和14d各处死2只,通过建立的荧光定量PCR方法对小肠液中的ETEC的LT基因进行定量检测。研究结果显示,用建立的荧光定量PCR检测LT基因无非特异性扩增,标准曲线呈良好的线性关系(R2=0.999),标准品的熔解曲线均呈单峰,灵敏度为8.18×103拷贝数/μL;小鼠感染4h后LT毒素含量最高,剖检可见小肠肿大,充满黄绿色的内容物,感染后7d、14d均未检测出LT毒素,肠道未见明显病变,表明LT肠毒素在肠道内的生成规律与肠道病变损伤呈正相关。
- 王芳赵献军雷萌桐白东宁王大会齐雪峰
- 关键词:产肠毒素大肠杆菌SYBR
- 妊娠山羊子宫uNK细胞与VEGF动态分布研究被引量:2
- 2014年
- 探讨子宫内自然杀伤细胞(uNK)及血管内皮细胞生长因子(VEGF)在正常妊娠山羊子宫的动态分布规律。采用免疫组织化学技术对uNK细胞和VEGF在妊娠山羊子宫内的分布以及含量的动态变化进行研究,并通过RT-PCR技术检测VEGF mRNA的动态转录水平。结果显示:在妊娠早期,uNK细胞和VEGF大量存在于蜕膜部;妊娠中期,在子宫基质、腺体和肌层血管处检测到大量uNK细胞和VEGF表达;在妊娠后期,uNK细胞量和VEGF表达急剧减少。RT-PCR技术检测显示,妊娠早期和妊娠中期VEGF mRNA的转录量差异不显著,但均显著高于妊娠晚期VEGF mRNA的转录水平(P<0.05)。山羊子宫内uNK细胞和VEGF在妊娠不同时期的分布规律呈现一定相关性。
- 丁培阳刘艳利曹阳坡李笑靳亚平王爱华齐雪峰
- 关键词:山羊UNK细胞VEGFRT-PCR
- 鸭瘟抗体间接ELISA检测试剂盒的研制及初步应用
- DPV经过鸭胚成纤维细胞增殖、反复冻融、差速离心、蔗糖密度介质离心制备纯化抗原,建立了用于检测鸭血清中抗DPV特异性IgG抗体的间接ELISA方法,并对该法进行了标准化研究,确定了最佳工作条件。在此基础上研制了相应的检测...
- 齐雪峰程安春汪铭书杨晓燕陈孝跃
- 关键词:试剂盒血清流行病学血清检测
- 文献传递
- 陕西省致仔猪腹泻大肠埃希菌的耐药性及其质粒谱型研究被引量:2
- 2010年
- 【目的】研究陕西省致仔猪腹泻大肠埃希菌的耐药性及其与质粒谱型之间的关系。【方法】对分离自陕北、关中、陕南等地7个猪场腹泻仔猪粪便的104株致病性大肠埃希菌,采用K-B法测定其对11类26种抗生素的耐药性。对11株大肠埃希菌耐药菌株进行质粒分子分型及同源性聚类分析。【结果】陕西省致仔猪腹泻大肠埃希菌对哌拉西林、头孢他啶、多粘霉素B和痢特灵的耐药率为0;对先锋Ⅴ、先锋Ⅵ、先锋必素、头孢呋辛的耐药率分别为15%,12%,12%和8%;对丁胺卡那霉素、新霉素、氧氟沙星的耐药率分别为23%,27%和27%;对青霉素、强力霉素、四环素、羧苄西林、复方新诺明、氯霉素、氨苄西林的耐药率均在85%以上;而对苯唑西林、氯洁霉素的耐药率均为100%。多重耐药性检测结果表明,分离菌株的耐药性以8~13耐居多,占71%,1~7耐的菌株占17%,13耐以上占12%。质粒检测结果表明,相同地区、相同时间分离的菌株,其耐药谱相似,质粒谱型相同或相似;不同来源的菌株,耐药谱可相似也可不同,而质粒谱一般不同。同源性聚类分析表明,陕西省各地区耐药菌株质粒的流行存在地区差异,其差异性保持在35%以内。【结论】陕西省致仔猪腹泻大肠埃希菌耐药性较严重,且呈自南向北递增的趋势,不同地区大肠埃希菌分离株的耐药性差异与其携带的质粒有关。
- 赵宝赵献军王春江郝艳阳齐雪峰
- 关键词:仔猪腹泻大肠埃希菌耐药性
- 陕西省致仔猪腹泻ETEC的分子流行病学调查被引量:17
- 2010年
- 【目的】对陕西省致仔猪腹泻产肠毒素大肠埃希菌(Enterotoxigenic E.coli,ETEC)的肠毒素及黏附素进行分子流行病学调查。【方法】采集陕西省陕北(子洲、甘泉)、陕南(汉中、城固)和关中(杨凌、西安、户县)3个地区7个大型养猪场1~50日龄腹泻仔猪的粪便样品,进行大肠埃希菌的分离与鉴定。采用普通和多重PCR方法,检测已知能表达毒素的大肠埃希菌标准菌株,以验证试验方法的可行性;采用多重PCR方法,对分离自陕西省腹泻仔猪粪便样品中的大肠埃希菌进行肠毒素(STa、STb、LT)和黏附素(K88、K99、987P、F41)检测。【结果】试验共分离鉴定出104株大肠埃希菌,其中表达肠毒素的菌株有45株,STa、STb、LT和STa+LT阳性的菌株数量分别为28,5,8和4株;表达黏附素的共31株,K88、K99、987P和K88+987P阳性的菌株分别为4,22,2和3株。在被检测的样品中,同时表达肠毒素和黏附素的大肠埃希菌有14株;陕南地区仅检测出STa肠毒素和K99黏附素,陕北地区较复杂,各毒素类型均有出现。在1~7日龄,致仔猪腹泻大肠埃希菌表达的毒素主要是K99和STa;到20~30日龄时,各种毒素均有不同程度检出。【结论】陕西省致仔猪腹泻ETEC表达的肠毒素主要是STa,表达的黏附素主要是K99;毒力因子的分布与区域和仔猪日龄有密切关系。
- 王春江赵献军赵宝郝艳阳齐雪峰
- 关键词:ETEC分子流行病学