黄永国
- 作品数：33 被引量：151H指数：7
- 供职机构：武汉市妇女儿童医疗保健中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 酶联免疫吸附试验临床检测信号临界区(灰区)患者血清HBsAg携带状况的研究
- 2009年
- 目的探讨乙肝HBsAg酶联免疫吸附试验（ELISA）检测信号灰区与血清免疫逃逸变异HBsAg之间的关系。方法采用市售ELISA对一组临床患者做常规检测,根据检测结果选留ELISA信号处灰区（即P/C 1.2~5.0之间）的实验标本。采用G6-ELISA（本室研制,有极强免疫逃逸变异HBsAg检测能力）与市售（基本不具备免疫逃逸变异HBsAg检测能力）对选留标本进行检测,以差减ELISA确认其免疫逃逸变异HBsAg阳性数量,并采用雅培-化学发光及PCR对检测结果的特异性进行复核。结果自10 231例受检者中筛选HBsAg ELISA信号灰区标本244例。以G6-ELISA与市售ELISA检测结果并做差减分析显示免疫逃逸变异HBsAg阳性率为11.07%（27/244）,亚临界,临界及超临界各组阳性率分别为9.30%（8/86）,10.34%（15/145）及30.77%（4/13）,后者组阳性率显著高于前两组（P〈0.01）。考核结果显示,经ELISA差减分析确认的免疫逃逸变异HBsAg阳性血清雅培-化学发光检测阳性率为94.44%（17/18）,HBV DNA阳性率为33.33%（6/18）,其中两份单项G6-ELISA检测最低阳性信号标本的HBsAg特异性亦为雅培-化学发光检测所证实。结论临床HBsAg检测样本中存在少量A（或P/C）值在ELISA信号灰区的异质化标本;免疫逃逸变异HBV感染是造成这一现象的主要原因之一。
- 张春燕龚劲松刘静华彭静黄永国张小燕李方和
- 关键词：乙型肝炎病毒基因变异乙型肝炎表面抗原酶联免疫吸附试验
- 军团菌肺炎患儿血清铁蛋白水平变化及意义被引量：6
- 2012年
- 目的探讨军团菌肺炎患儿血清铁蛋白(serum ferritin,SF)水平变化及临床意义。方法回顾性分析79例确诊为军团菌肺炎患儿的临床资料,用化学发光法检测患儿治疗前后SF水平,并与同期细菌性肺炎、病毒性肺炎、支原体肺炎、肿瘤住院患儿比较治疗前后SF水平。结果军团菌肺炎组治疗前SF水平为(1 589.2±254.8)ng/mL,其与肿瘤组[(867.9±62.7)ng/mL]均显著高于其他各组(P<0.05);细菌性肺炎组和病毒性肺炎组的SF水平为正常水平,支原体肺炎组有部分患儿呈轻度升高。军团菌肺炎组经治疗后患儿SF水平显著下降,与其他组比较差异有统计学意义(P<0.01),而4个对照组SF水平治疗前后差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SF水平显著升高对军团菌肺炎具有较高的诊断价值,SF水平高于正常值5～6倍时,军团菌肺炎的可能性较大。监测军团菌肺炎患儿治疗前后SF水平有助于病情判断,且对临床疗效有评价作用。
- 李长振饶菁菁黄永国王蓉孙红艾洪武
- 关键词：军团菌肺炎支原体肺炎血清铁蛋白
- 武汉地区新生儿感染鲍曼不动杆菌耐药性监测与分析
- 目的了解武汉地区新生儿感染鲍曼不动杆菌(aba)对常见抗生素的耐药性变迁。方法采用K-B法进行药物敏感试验,按CLSI2008年版判断结果。使用×2检验分析耐药性的变化。结果新生儿感染分离aba458株,分离率呈逐年上升...
- 鲍连生虞涛黄永国刘芳杜桃枝余星吴旻
- G145R变异重组HBsAg ELISA检测质控参照品制备的初步研究被引量：3
- 2007年
- 目的:实验性制备G145R变异重组乙型肝炎表面抗原(rHBsAg)质控参照品。方法:收集含G145R变异rHBsAg的细胞培养上清,采用50%饱和硫酸铵盐析,根据其在D12-ELISA中的检测信号,以卫生部颁布的HBsAgELISA质控血清精确标定盐析物中靶物质的含量,适量稀释分装,置-20℃冻存。采用不同方法对制备物的特异性与稳定性进行考核,并将其试用于对几种市售试剂盒检测变异能力的评价。结果:制备物中靶物质含量在0.50～32.00ng/mLwcHBsAg之间,在D12-ELISA检测中其信号的线性关系与质控血清有很好的一致性;反复冻融对其稳定性无显著影响;采用不同市售ELISA试剂检测时其反应信号强度各不相同。结论:本研究制备的G145R变异rHBsAgELISA质控参照品具有较高的稳定性、特异性与实用性;其研制为乙肝病毒免疫逃逸现象在基础、临床、诊断试剂研发,以及流行病学调查等方面研究的开展提供了重要的物质基础。
- 张波陈妍龚劲松张春燕黄永国张小燕田拥军杨东亮李方和
- 关键词：酶联免疫吸附测定
- 武汉地区新生儿感染鲍氏不动杆菌耐药性监测与分析
- 2011年
- 目的了解武汉地区新生儿感染鲍氏不动杆菌(ABA)对抗菌药物的耐药性变迁。方法采用K-B法进行药物敏感试验,按CLSI 2008年版判断结果,使用χ2检验分析耐药性的变化。结果新生儿感染分离ABA 458株,分离率呈逐年上升趋势;2007-2009年分离ABA对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、头孢他啶、亚胺培南、美罗培南的耐药率均呈逐年显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论武汉地区新生儿分离ABA耐药率明显低于成人分离株,但其耐药性呈逐年上升趋势,提示加强医院感染管理,合理使用抗菌药物及耐药菌监测的重要性。
- 鲍连生虞涛黄永国刘芳杜桃枝余星吴?
- 关键词：鲍氏不动杆菌新生儿医院感染耐药性
- ELISA差减分析--一种简便实用的免疫逃逸变异HBsAg检测新方法被引量：1
- 2010年
- 目的:立足现有实验技术与试剂,建立一项血清免疫逃逸变异HBsAg检测的新方法。方法:以市售ELISA试剂筛选其检测信号在灰区范围的HBV感染者;采用2种不同免疫逃逸变异HBsAg检测能力的ELISA试剂对选留血清进行检测,以"ELISA差减分析"方式确认免疫逃逸变异HBsAg阳性者;以中和实验及雅培化学发光试剂验证检测结果的特异性;并对部分免疫逃逸变异HBsAg阳性者以PCR及直接测序做HBV DNA分析。结果:自10231例受检者中筛选HBsAgELISA检测信号灰区标本244例;复核检测显示G6ELISA、市售ELISA两者对野生HBsAg检测敏感性分别为0.0625ng/ml,与0.125ng/ml;检测阳性率分别为16.80%(G6ELISA)及5.73%(市售ELISA)。ELISA差减分析确定免疫逃逸变异HBsAg阳性者27例,阳性率为11.07%。对部分免疫逃逸变异HBsAg阳性血清做进一步考核,抗HBs中和强度为(84.07%±6.32%),中和率100%(13/13);雅培化学发光试剂复核阳性率为94.4%(17/18,阳性者中包括两份单项G6-ELISA检测最低阳性信号标本);HBV DNA阳性率36.9%(7/19),略低于同期HBsAg低信号阳性者(6/14,42.9%,P<0.05);直接测序发现其中"a"区变异3例,分别为P142L、T126A及M133T/K160T;S蛋白亲水区非"a"决定簇变异1例,变异类型为L109Q。结论:ELISA差减分析法能有效地用于部分免疫逃逸变异HBsAg的临床诊断,其诊断能力视所依托试剂免疫逃逸变异检测能力不同而有显著差别。
- 李方和李佩珊刘静华彭静张春燕黄永国陈妍
- 关键词：乙肝病毒基因变异HBSAGELISA
- HBV G145R突变对S蛋白及“a”决定簇合成肽抗原性影响被引量：2
- 2007年
- 人工合成G145R突变后HBsAg"a"决定簇多肽G145R-SP24,将G145R-SP24、重组G145R变异S蛋白及重组野生型HBsAg分组免疫BALB/c小鼠,制备相应抗血清。通过观察各免疫原与抗血清或抗G145R变异HBsAg McAb的免疫反应特征,分析并比较G145R突变后对S蛋白及"a"决定簇合成肽抗原性的影响。结果,几种免疫原均取得理想的免疫效果,ELISA证实各抗血清均有较好的特异性。G145R-SP24和G145R变异S蛋白免疫小鼠获得的抗血清效价较野生型HBsAg略低,且抗原性也发生了明显改变,G145R突变后"a"决定簇仍然具有较好的免疫原性;另外G145R-SP24与G145R变异S蛋白之间也显示出不同的抗原性,提示孤立的G145R变异HBsAg"a"决定簇与完整G145R S蛋白的"a"决定簇可能形成不同的空间构象。本研究为进一步探讨"a"决定簇突变后空间结构的变化规律与抗原性改变的特点奠定一定的基础。
- 黄永国李方和龚劲松田拥军张春燕张小艳杨东亮
- 关键词：基因变异合成肽多克隆抗体
- 武汉地区入托儿童Anti-HBs定量测定结果分析及意义被引量：1
- 2013年
- 目的：了解2011年武汉地区入托儿童乙肝表面抗体浓度情况，评价乙肝疫苗免疫效果，为低龄儿童的乙肝防治提供参考依据。方法：运用电化学发光技术定量测定样本乙肝表面抗体（Anti～HBs）浓度值，应用统计软件按性别、不同年龄段进行数据分析。结果：总体Anti—HBs阳性率为85．9％，男女差异无统计学意义，年龄〈4岁儿童Anti—HBs阳性率及Anti—HBs浓度随年龄的增长而下降，不同年龄组问Anti—HBs阳性率差异有统计学意义（P〈0．05）；4岁以后，Anti—HBs阳性率及Anti—HBs浓度出现回升，与一4组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；不同Anti—HBs浓度所占比例不一样，100～1000IU／L之间占大部分（49．4％），三组之间比较有显著差异（P〈0．05）结论：武汉地区入托儿童乙肝免疫处于较高水平，但乙肝疫苗免疫效果随免疫年限的增长而渐弱，无性别差异，接种乙肝疫苗后定期应检验接种效果，以便及时加强免疫。
- 李长振饶菁菁黄永国孙红艾洪武
- 关键词：入托儿童乙肝表面抗体疫苗免疫效果
- 鼠IgG定量ELISA实验参比品的制备及其应用
- 2007年
- 目的 制备一组用于小鼠IgG定量ELISA检测的实验参比品。方法 将三株杂交瘤细胞制备的小鼠腹水等体积混合，以葡萄球菌A蛋白（SPA）亲和层析纯化IgG，凯氏定氮法测定IgG含量，SDS-聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）电泳作纯度鉴定并据此校正其IgG浓度，以特定保存液将其稀释成既定浓度系列，根据其在ELISA中的反应特征，制备浓度（自然对数）-A450值标准曲线，并将其用于对一组杂交瘤细胞培养上清中鼠单克隆抗体的IgG定量测定。结果提纯的鼠IgG经鉴定纯度达97．1％，且反应特性良好，其IgG含量与ELISA检测信号间有高度的相关性（r=0．990）。不同浓度的稀释系列经8次反复冻融，检测信号无显著变化，变异系数（CV）为1．87％～6．47％。将标准曲线计算所得浓度对设定浓度做回收实验分析，回收率89．1％～108．3％。并用其测得一组杂交瘤细胞培养上清的鼠IgG含量为8．0～51．5mg／L。结论 鉴定结果显示制备物定量准确，浓度范围适中，稳定性好，对于早期杂交瘤细胞分泌能力以及抗体稳定性的评价、单抗制剂的鉴定具有一定的应用价值。
- 黄永国张春燕龚劲松陈妍张波李方和
- 关键词：酶联免疫吸附试验单克隆抗体小鼠
- 武汉地区12125例呼吸道感染患儿非细菌病原体IgM抗体检测结果分析被引量：33
- 2012年
- 目的检测武汉地区住院呼吸道感染患儿非细菌病原体IgM抗体,为临床诊疗提供依据。方法取诊断为呼吸道感染的12 125例住院患儿的血清,采用间接免疫荧光法检测9种呼吸道感染非细菌病原体的IgM抗体。结果 3 597份标本(29.7%)非细菌病原体IgM抗体检测阳性,其中肺炎支原体(MP)的阳性率最高为21.6%,其次为腺病毒(ADV)和乙型流感病毒(Flu B),阳性率最低为肺炎衣原体(CP)和Q热立克次体(COX);混合感染563例,其中主要是2种病原体的混合感染。各年龄组(0～30 d、～6个月、～1岁、～3岁、～9岁)的总检出率分别为30.4%、18.7%、35.4%、68.4%、55.2%,各组间差异有统计学意义(χ2=89.5,P<0.05)。冬季非细菌病原体检出率最高(53.4%),秋季最低(24.9%),差异有统计学意义(χ2=760.3,P<0.05)。结论武汉地区呼吸道感染患儿的非细菌病原体主要是MP、ADV和Flu B;MP和其他非细菌病原体的混合感染比较普遍;1～3岁幼儿感染率较高;冬季更易感。
- 李长振饶菁菁黄永国孙红艾洪武
- 关键词：呼吸道感染住院患儿肺炎支原体
