马晓瑞
- 作品数：7 被引量：18H指数：3
- 供职机构：四川大学生命科学学院微生物与代谢工程四川省重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划四川省自然科学基金四川省科技创新产业链示范工程更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 播娘蒿耐寒基因DsKIN1的克隆、序列分析及冷诱导表达分析
- 2017年
- 播娘蒿是极端耐寒的冷诱导植物,研究其低温胁迫下的冷响应基因对于揭示其抗寒性具有重要意义.根据拟南芥At KIN1和At KIN2同源比对,设计同源引物进行播娘蒿KIN基因克隆,通过RACE技术克隆得到Ds KIN1基因,利用Vector NTI11.5软件对其进行序列分析,采用Realtime-PCR测定Ds CBF1、Ds CBF2、Ds COR和Ds KIN1基因在不同处理方式[整株低温处理、同一植株局部低温处理和局部未受低温处理(两部分植株)]下各时间段(0.2 h、0.5 h、1 h、2 h、6 h、12 h、24 h)的表达,采用String数据库预测分析与Ds KIN1相互作用的蛋白.结果显示,Ds KIN1基因序列全长为462 bp,开放阅读框ORF长度为198 bp,编码66个氨基酸,分子量(Mr)为6.61×10~3,理论等电点为9.10,亲水性好.播娘蒿Ds CBF1和Ds CBF2在0.2 h开始表达,在2 h达到最大,随后下降.在冷诱导0.2 h后,Ds CBF调控的耐寒基因Ds COR和Ds KIN1基因开始表达,均呈现上调的趋势.整株、局部冷诱导植株与同一植株上未受低温胁迫部位的耐寒基因Ds COR和Ds KIN1表达模式类似.此外发现与Ds KIN1相互作用的蛋白大部分为低温诱导蛋白、盐和渗透压胁迫响应的信号蛋白、与渗透调节有关的家族蛋白、RING-H2锌指蛋白2B以及未知蛋白等.本研究说明播娘蒿局部冷诱导时,冷信号可进行传递,使未受冷诱导部位获得耐寒性能.
- 田磊常斐斐秦世尚唐滋一陈麒名马晓瑞徐辉乔代蓉曹毅
- 关键词：播娘蒿基因克隆低温胁迫
- 一种磁性载体固定化脂肪酶制备生物柴油的方法
- 本发明公开了一种磁性载体固定化脂肪酶制备生物柴油的方法，该方法利用固定化脂肪酶磁性纳米颗粒催化剂对反应进行催化，所述固定化脂肪酶磁性纳米颗粒催化剂由磁性纳米颗粒作为载体采用共价交联的方法对产脂肪酶菌进行固定化制备而成。本...
- 曹毅乔代蓉曹瑜徐辉马晓瑞
- 文献传递
- 溶菌酶在畜牧业领域的开发应用被引量：6
- 2013年
- 目前,抗生素使用泛滥,带来的负效应日益凸显,细菌及真菌对抗生素的抗药性正逐渐增强,这些问题的出现推动了科研人员对新型有效抗生素替代品的开发研究。溶菌酶是生物体内重要的非特异性免疫因子,同时自身也是一种蛋白质,具有与抗生素不同的抗菌机制,在抑杀病原体的同时不易产生抗药性,溶菌酶以其无毒、无害、无残留、抗菌谱广、活性稳定及安全性高等优良的抗菌特性,逐渐受到科研人员的青睐并应用于现实生产。阐述溶菌酶在畜牧业中的应用、在转基因工程中的研究现状、市场需求及开发前景。
- 张鹏马晓瑞王永
- 关键词：溶菌酶转基因畜牧业
- 大熊猫肠道产果胶酶细菌的多样性及产酶特性被引量：3
- 2016年
- 为探究大熊猫肠道微生物与消化的相互关系,利用果胶筛选培养基,从大熊猫新鲜粪便中分离具有产果胶酶活性的细菌,对获得的菌株采用生理生化特征和16S r DNA进行鉴定分类,探讨产果胶酶细菌多样性,并研究菌株的最适生长特性及产酶特性.共分离得到产果胶酶的细菌31株,属于志贺菌属(Shigella)、埃希氏菌属(Escherichia)、克雷伯氏菌属(Klebsilla)3个属,其中最高酶活为334.44 U/m L,最低酶活为15.6 U/m L.PF-4菌株具有最高的酶活,鉴定为肺炎克雷伯氏菌,生长温度范围为16-45℃,生长p H范围是5-8,最适产酶时间为24 h,最适产酶温度为37℃,最适产酶p H为6.结果为研究大熊猫消化系统中微生物果胶酶的来源及性质提供了参考.
- 郭明月黄国印马晓瑞魏从翀陈芳芳胡超徐辉乔代蓉曹毅
- 关键词：果胶酶细菌多样性
- Fe_3O_4@SiO_2-CHO共价固定脂肪酶条件的响应面优化及固定化酶催化生产生物柴油被引量：4
- 2017年
- 生物柴油是一种可再生且环保的化石燃料的替代品,研究固定化酶生产生物柴油对解决石化燃料耗尽和环境保护具有重要意义.将制备的纳米材料Fe_3O_4@SiO_2-CHO与伯克霍尔德氏菌脂肪酶以共价交联的方式固定,通过响应面法(RSM)优化其固定化的条件,然后以固定化酶催化橄榄油生产生物柴油,并对影响生物柴油制备的因素进行优化,最后通过GC-MS检测转酯产物的成分.结果表明:在加酶量30.22 m L、戊二醛浓度2%、固定化温度40℃、固定化时间4 h时得到最大的固定化脂肪酶酶活和固定化效率,分别为10 038 U/g和96.9%.然后以此最佳条件制得的固定化酶催化制备生物柴油,得到最优条件为加酶量1.5 g、醇油比4:1、反应温度30℃、反应时间4 h.最后用GC-MS分析所得产物,得到最大转酯效率为98.84%,且固定化酶重复转酯10次后,转酯效率仍可达90%.本研究获得的Fe_3O_4@SiO_2-CHO固定化酶不仅能在短时间内催化得到很高的生物柴油产量,且易回收、可重复使用、生产成本大大降低,是工业化生产生物柴油的一种高效环保的生物酶催化剂.
- 马晓瑞秦家亮吴海珍许毅曹瑜乔代蓉曹毅
- 关键词：生物柴油
- 黑曲霉木聚糖酶XynB耐热性的定向改造及表达、纯化被引量：5
- 2014年
- 酶活性高的木聚糖酶在工业中具有巨大应用潜力,但大部分野生木聚糖酶不能耐受工业生产过程中的极端环境比如高温,因此很有必要通过分子生物学的方法改造木聚糖酶.本文通过分子动力学模拟和定点突变的方法以提高黑曲霉(SCTCC400264)来源的木聚糖酶Xyn B的耐热性.利用定点突变技术获得突变载体p ET32a-Xyn B-T79V并转化大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3),经IPTG诱导成功表达木聚糖酶Xyn B-T79V.在镍亲和层析纯化蛋白后测定了突变酶的耐热性.突变体Xyn B-T79V在30、40、50℃处理120 min后酶活几乎没有损失,当处理温度升高到60-80℃时,酶活开始下降.温度升到80℃时,残余酶活仍有37%,而此时野生型Xyn B的活性几乎完全丧失.突变体Xyn B-T79V半衰期t1/2提高了8.7 min.本研究获得的突变酶Xyn B-T79V耐热性显著提高,为工业应用提供了新的酶资源.
- 余英鹏姜腾飞李茜马晓瑞宋济君刘博乔代蓉曹毅徐辉
- 关键词：木聚糖酶耐热性分子动力学模拟定点突变
- 藏山羊瓣胃溶菌酶基因TGOLyz的克隆及组织表达分析
- 2013年
- 基于物种同源性,应用PCR和RT-PCR技术,克隆得到藏山羊瓣胃溶菌酶基因cDNA编码序列,并命名为TGOLyz,应用生物信息学软件对TGOLyz基因核苷酸序列及预测的蛋白序列进行了分析,并预测该蛋白的三级结构;应用qRT-PCR技术检测了TGOLyz在5个组织中的定量表达。结果表明,藏山羊瓣胃溶菌酶基因TGOLyz cDNA编码区长444 bp(Accession No.KC558501),编码147个氨基酸,分子量为16.29 kDa,等电点为6.08。同源性对比显示,TGOLyz与牛胃1(Cow stomach 1)的同源性最高,达95.24%,与牦牛胃(Yak stomach)的同源性最低,仅为67.61%;系统进化树显示,该基因属于c型溶菌酶(c-type lysozyme)家族;qRT-PCR分析表明,TGOLyz基因在5个组织中均有表达,在瓣胃中表达量最高。这为进一步深入研究TGOLyz的抗菌及消化功能的分子调控机制提供了理论基础。
- 张鹏江明锋马晓瑞方毅王永
- 关键词：藏山羊克隆
