颜见
- 作品数:23 被引量:47H指数:4
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 联合位点突变的乙型肝炎病毒X蛋白可通过上调多重耐药基因-1表达促进肝癌细胞化疗抵抗被引量:1
- 2015年
- 目的观察联合位点突变的乙型肝炎病毒X蛋白对肝癌耐药性的影响,探讨乙型肝炎病毒在肝癌耐药机制中的作用。方法通过基因合成A1762T/G1764A/T1753A/T1768A位点联合突变后的乙型肝炎病毒X蛋白(HBx),慢病毒感染肝癌细胞株Huh7并构建稳定表达HBx蛋白的肝癌细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测转染后肝癌细胞对不同浓度化疗药物顺铂(15、30、60mg/L)的耐药性,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及Western blot法分别检测转染后肝癌细胞多重耐药基因-1(MDR-1)mRNA及蛋白的表达。结果经嘌呤毒素药物筛选后,可构建出稳定表达株,转染率达90%以上;在不同浓度顺铂(15、30、60mg/L)作用下,转染后肝癌细胞存活率为84.6%、76.7%、98.6%,明显高于对照组(57.7%、72.8%、77.3%)和空载组(55.0%、70.6%、78.9%),差异有统计学意义(P〈0.05),而对照组细胞存活率与空载组比较,差异无统计学差异(P〉0.05)。转染后细胞内MDR-1mRNA表达明显高于对照组和空载组,差异有统计学意义(P〈0.05),MDR-1蛋白表达明显增高。结论联合位点突变的乙型肝炎病毒x蛋白可通过上调肝癌细胞内MDR-1的表达提高其化疗抵抗性。
- 熊志勇姚志成李明亮颜见胡昆鹏范伟明许瑞云邓美海
- 关键词:乙型肝炎病毒X蛋白化疗耐药
- 乙型肝炎病毒相关性肝癌发生的分子机制研究进展被引量:12
- 2012年
- 原发性肝癌是常见的恶性肿瘤之一,乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是原发性肝癌发生和发展的最主要的危险因素之一,因此深入研究乙肝相关性肝癌的发病机制成为一项长期而艰巨的任务,为肝癌的预防及合理治疗提供依据。本文将近年来乙肝相关性肝癌的分子机制做如下综述。
- 颜见姚志成邓美海
- 关键词:HBV原癌基因抑癌基因HBX蛋白
- 应用新型生物补片减轻术后炎症反应的实验研究
- 目的 研究应用新型生物补片材料在腹外疝修补术中减轻局部及全身炎症反应的作用.方法 成功建立18只家兔腹外切口疝模型后,平分为三组:实验组应用新型生物补片材料进行修补,对照组为聚丙烯补片材料,空白组为单纯缝合组;三组均检测...
- 姚志成胡昆鹏钟跃思颜见李明亮刘波邓美海
- 肝癌相关间质干细胞通过分泌肝细胞生长因子促进肝癌细胞增殖的研究
- 姚志成颜见胡昆鹏李明亮陈骋邓美海
- 肝癌相关间质干细胞通过分泌HGF因子促进肝癌细胞增殖的研究
- 姚志成颜见胡昆鹏李明亮陈骋邓美海
- 家族聚集性肝癌组织中S期激酶相关蛋白2和增殖细胞核抗原蛋白的表达及其预后意义
- 姚志成颜见胡昆鹏李明亮陈骋邓美海
- 联合位点突变的乙肝病毒核心启动子转染L-02及对细胞增殖能力的影响
- 研究背景及目的HBV核心启动子(CP)与HBX基因部分重叠,大量临床研究表明,重叠序列中A1762T/G 1764A (TA),T1753A,T1768A位点突变,与肝癌的发生密切相关.本实验通过基因合成A1762T/G...
- 颜见姚志成胡昆鹏林继宗钟跃思李明亮陈骋许瑞云邓美海
- 乙肝病毒核心启动子A1762T/G1764A/T1753A/T1768A突变对细胞细胞核增殖抗原、核因子-κB和p21表达的影响被引量:1
- 2014年
- 目的通过基因合成A1762T/G1764A/T1753A/T1768A联合突变后的核心启动子,再以慢病毒感染的方式转染L-02细胞株,观察细胞内细胞核增殖抗原(Ki-67)、核因子-κB(NF—κB)和p21表达的变化。方法通过基因合成的方法,合成A1762T/G1764A/T1753A/T1768A联合突变后的核心启动子,在N末端加上乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)-Flag标记序列,分别双酶切pLenO—RTP载体和pUC57-CM—HBX,纯化酶切产物后进行定向连接,得到重组质粒pLenO—RTP—CM—HBX。钙转法将重组质粒转入293T细胞进行病毒包装然后转染L-02细胞株。Western blot法检测HBX—Flag在慢病毒感染后L-02中的表达以及转染后细胞内Ki-67、NF—κB、p21的表达。结果构建pLenO—RTP—CM—HBX核心启动子慢病毒载体可以效率较高地感染L-02细胞株(〉95%),并在细胞内转录、翻译、合成HBX—Flag。突变组Ki-67、NF—κB、p21的相对表达水平分别为2.103±0.346、2.201±0.486、0.771±0.338,空载组为0.221±0.016、0.232±0.117、2.032±0.215,空白对照组为0.323±0.017、0.334±0.207、2.141±0.305。同空载组和空白对照组比较,突变组Ki-67、NF—κB表达增加,p21表达降低(P〈0.05)。而空载组和空白对照组的各指标差异无统计学意义(P〉0.05)。结论乙肝病毒核心启动子联合突变可影响细胞内Ki-67、NF—κB和p21的表达。
- 肖刚颜见刘晓珑李宁磊韩鲁浙殷良春于晓园刘立新
- 关键词:乙肝病毒核心启动子联合突变
- 不同来源间质干细胞对大鼠肝纤维化的治疗作用被引量:3
- 2013年
- 目的观察脐带间质干细胞(UMSCs)和骨髓间质干细胞(BMSCs)对CCl4诱导大鼠肝纤维化的治疗作用。方法通过S0%CCl4橄榄油皮下注射10周建立大鼠肝纤维化模型,随机平均分为UMSCs组、BMSCs组及空白对照组,UMSCs组经尾静脉输注1mlUMSCs(2×10^9/L),BMSCs组输注1mlBMSCs(2×10^9/L),空白对照组输注1ml生理盐水,移植处理3周后处死所有大鼠。抽取血液检测移植处理前后各组大鼠肝功能指标[谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)],取肝脏标本苏木素-伊红(HE)染色行病理检查及量化计分。结果(1)移植处理3周后,与空白对照组大鼠AIJT、AST、TBIL指标[(637.60±42.38)U/L、(525.80±40.20)U/L、(17.26±0.68)μmol/L]比较,BMSCs组[(168.80±8.35)U/L、(352.00±33.64)U/L、(14.12±0.34)μmol/L]和UMSCs组[(163.60±7.30)U/L、(339.00±44.94)U/L、(13.96±0.29)μmol/L]均降低,差异均有统计学意义(P〈0.05),ALB指标差异无统计学意义(P〉0.05);与BMSCs组比较,UMSCs组大鼠ATJT、AST、TBIL及ALB指标差异均无统计学意义(P〉0.05)。(2)与移植处理前各组AlJT、AST、TBIL指标[空白对照组:(337.80±13.97)U/L、(436.40±23.27)U/L、(15.20±0.57)μmol/L;BMSCs组:(337.40±14.10)U/L、(439.40±15.27)U/L、(15.52±0.47)μmol/L;UMSCs组:(337.40±16.21)U/L、(437.20±25.15)U/L、(15.54±0.72)μmol/L]比较,处理3周后BMSCs组和UMSCs组相应指标均降低,空白对照组相应指标均升高,差异均有统计学意义(P〈0.05);移植处理前后各组大鼠ALB指标差异无统计学意义(P〉0.05)。(3)与空白对照组比较,BMSCs组和UMSCs组肝脏炎症活动度及纤维化程度均减轻,量化计分(空白对照组:13.20�
- 李明亮钟跃思徐见亮姚志成颜见邓美海
- 关键词:脐带间质干细胞骨髓间质干细胞肝纤维化细胞移植
- 肝细胞肝癌840例临床分析被引量:3
- 2012年
- 目的探讨肝细胞肝癌(肝癌)与乙型肝炎病毒(HBV)感染的相关性及不同治疗方法的疗效。方法回顾分析2001年1月至2006年6月中山大学附属第三医院收治的840例肝癌患者的临床资料。患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。收集患者合并肝硬化情况、肿瘤大小与数目、肝功能、肿瘤临床分期、HBV感染等相关资料,分析肝癌临床特征及其与HBV感染的关系。将病例按不同治疗方式分为手术切除组、肝移植组、消融和(或)介入组(综合治疗组)、保守治疗组,分别为191例、107例、349例、193例,分析4组患者的存活情况。结果 840例肝癌患者中合并肝硬化675例,占80.4%;小肝癌210例,占25%;单发肿瘤550例,占65.5%;肝功能Child ̄Pugh分级A级429例,占51.1%,B级287例,占34.2%,C级124例,占14.8%;巴塞罗那临床肝癌分期B^D期(中晚期)共725例,占86.3%。乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性者795例,占94.6%。606例肝癌患者接受了乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV ̄DNA)定量检测,定量检测阳性者488例,占80.5%;肝癌合并肝硬化患者的HBV ̄DNA含量明显高于无合并肝硬化的肝癌患者(t=2.32,P<0.05)。手术切除组1、2、5年存活率分别为85%(163/191)、75%(144/191)及31%(60/191);肝移植组相应为72%(77/107)、62%(67/107)、31%(33/107);综合治疗组相应为71%(248/349)、50%(176/349)、10%(34/349);保守治疗组相应为8%(16/193)、3%(7/193)、0。结论 HBV感染是导致肝癌发生的主要原因,大多数患者合并肝硬化。手术切除是治疗肝癌的首选方法,肝移植亦可以取得良好的治疗效果,对于不能手术切除和肝移植患者,积极综合治疗不失为有效的治疗措施,保守治疗效果较差。
- 颜见姚志成钟跃思李明亮邓美海
- 关键词:肝细胞肝癌乙型肝炎病毒肝硬化肝移植