陶明亮 作品数:28 被引量:17 H指数:3 供职机构: 西北农林科技大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 Scientific Research Foundation for the Returned Overseas Chinese Scholars, State Education Ministry 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
丙型肝炎病毒p7蛋白反式调节基因p7TP2的克隆化及生物信息学分析 目的:克隆丙型肝炎病毒(HCV)p7蛋白反式调节未知功能新基因p7TP2,构建其真核表达载体,并应用生物信息学初步探讨其结构及功能。方法:应用PCR技术从HepG2细胞提取的cDNA扩增p7TP2基因,选用 pGEM-T... 袁菊 郭江 成军 陶明亮 蓝贤勇 洪源 靳亚平 毛羽文献传递 丙型肝炎病毒p7蛋白反式调节新基因p7TP3及其剪切体克隆化和生物信息学分析 目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)p7病毒蛋白在HCV致病过程中的作用,应用基因芯片技术对于转染和未转染p7蛋白基因的肝母细胞瘤细胞系HepG2进行分析,筛选HCV p7病毒蛋白反式调节的新的靶基因p7TP3, 克隆p7T... 陶明亮 成军 王春花 郭江 袁菊 毛羽 靳亚平文献传递 人类HBxAg蛋白反式激活基因5的原核表达及其蛋白纯化 被引量:1 2007年 为了更深入研究XTP5蛋白(也称人类次要组织相容性抗原(mHA-8))的生物学功能,以HepG2细胞总RNA为模板、应用RT-PCR技术获得XTP5基因,再利用基因工程技术对其进行克隆和原核重组表达载体构建和诱导表达,成功克隆XTP5基因,并成功构建原核重组表达空载体pET-32a(+)-XTP5;阳性重组质粒转化大肠杆菌E.coliBL21后,在37℃经终浓度1 mmoL/L IPTG诱导5 h后,受体菌大量表达76.88 ku XTP5重组蛋白;West-ern-blot证实宿主菌表达的蛋白特异性好;肝素亲和层析柱纯化表达产物XTP5蛋白效果良好。结果表明,成功克隆了人类XTP5基因,并获得纯度较高的融合蛋白XTP5。 蓝贤勇 成军 陈宏 张黎颖 陶明亮 伦永志 洪源 郭江丙型肝炎病毒p7蛋白反式调节新基因p7TP3及其剪切体克隆化和生物信息学分析 目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)p7病毒蛋白在HCV致病过程中的作用,应用基因芯片技术对于转染和未转染p7蛋白基因的肝母细胞瘤细胞系HepG2进行分析,筛选HCV p7病毒蛋白反式调节的新的靶基因p7TP3,克隆p7TP... 陶明亮 成军 王春花 郭江 袁菊 靳亚平 毛羽 靳亚平文献传递 丙型肝炎病毒F蛋白结合蛋白1基因的克隆化与序列分析 被引量:1 2007年 目的对命名为F蛋白结合蛋白1(FBP1)的未知基因,克隆其全长基因并进行生物信息学分析。方法应用酵母双杂交技术得到FBP1,应用分子生物学技术克隆FBP1的基因编码序列。结果经酶切和测序鉴定,结果完全正确,成功克隆了FBP1的基因编码序。结论FBP1通过与F蛋白结合,在病毒蛋白与宿主细胞蛋白相互作用过程中发挥重要作用。 吴媛 洪源 成军 陶明亮 楚雍烈关键词:肝炎病毒 克隆化 应用抑制性消减杂交技术克隆乙型肝炎病毒DNAPTP1的反式调节基因 被引量:3 2005年 目的:应用抑制性消减杂交技术及生物信息学技术筛选并克隆乙型肝炎病毒DNAPTP1反式激活的新型靶基因.方法:以HBV DNAPTP1表达质粒pcDNA3.1(-)- DNAPTP1 转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经Rsa Ⅰ酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR),将产物与pGEM-Teasy载体连接,构建 cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析.结果:成功构建DNAPTP1反式激活基因差异表达的cDNA 消减文库.文库扩增后得到60个白色克隆,经菌落PCR分析,得到32个200-1 000 bp插入片段.对所得片段测序,并进行同源性分析,获得3个差异表达的已知蛋白基因和4个未知功能的染色体序列.结论:筛选到的cDNA全长序列,包括一些与细胞生长调节、物质代谢、免疫及细胞凋亡密切相关的蛋白编码基因,推测了DNAPTP1可能存在的调控机制的线索. 高学松 成军 甄真 郭江 张黎颖 陶明亮关键词:乙型肝炎病毒 DNA聚合酶 反式调节 抑制性消减杂交 复方甘草甜素下调细胞周期素依赖性激酶1启动子表达 被引量:5 2005年 目的:了解复方甘草甜素调节细胞周期素依赖性激酶 1(CDK1)基因启动子的活性,为甘草甜素的作用机制提供理论依据. pCAT3-basic空载体的12.4倍,是甘草甜素刺激转染pCAT3- CDK1-P的HepG2细胞的9.3倍.结论:复方甘草甜素可以下调CDK1基因启动子的活性,进而下调CDK1基因的表达,为深入了解甘草甜素在肝纤维化和肝癌中的作用机制提供新的分子生物学依据. 王志凌 成军 张连峰 邵凤娟 刘蔚 刘妍 陶明亮关键词:甘草甜素 启动子 HBxAg蛋白反式激活基因5的生物信息学分析及真核表达载体的构建 2007年 目的对HBxAg蛋白反式激活基因5(XTP5)进行生物信息学分析,并构建其真核表达载体。方法利用生物信息学软件对XTP5基因进行CpG岛、启动子活性、转录终止信号和氨基酸的一、二级结构以及信号肽、跨膜特性和功能基序进行预测。构建XTP5基因的真核表达载体pcDNA3.1-XTP5和pGBKT7-XTP5。结果生物信息学分析发现XTP5基因有200bp左右的CpG岛,有高启动子活性序列、转录终止信号位点,二级结构以Helix为主,存在信号肽的概率为0.0000A,无跨膜区域信号,存在数个功能基序。成功构建了XTP5基因的真核表达载体pcDNA3.1-XTP5和pGBKT7-XTP5。结论为深入研究XTP5结构和功能、进一步探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)发病机制创造了条件。 蓝贤勇 安纪红 成军 武会娟 张丽娟 陶明亮 袁菊 张黎颖 洪源 毛羽 陈宏关键词:乙型肝炎病毒X蛋白 生物信息学 丙型肝炎病毒F蛋白结合蛋白1基因的克隆化与序列分析 目的:克隆F蛋白结合蛋白1(FBP1)其全长基因并对其进行生物信息学分析。方法:应用酵母双杂交技术,得到一个未知基因并命名为FBP1,应用分子生物学技术,克隆了FBP1的基因编码序列。结果:经酶切和测序鉴定,结果完全正确... 吴媛 洪源 成军 陶明亮 楚雍烈文献传递 一种猪Oct4基因插入/缺失的检测方法及其应用 本发明公开了一种猪Oct4基因插入/缺失的检测方法及其应用。以待测公猪全基因组DNA为模板,以参照猪全基因组设计的引物对P1为引物,通过PCR技术扩增Oct4基因,再进行琼脂糖凝胶电泳。根据电泳结果鉴定Oct4基因在NC... 潘传英 任发 于帅 陈瑞 曾文先 吕晓燕 陶明亮文献传递