陈建林
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
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- 重组创伤弧菌溶细胞素(rVvhA)对人单核白血病细胞(THP-1)损伤机制的研究
- 目的:
1、研究rVvhA对THP-1细胞的生长抑制作用。
2、研究rVvhA对THP-1细胞内Ca2+浓度的影响。
3、研究rVvhA致THP-1细胞的凋亡途径。
方法:
1、IPTG诱导...
- 陈建林
- 关键词：细胞凋亡钙离子浓度亲和层析法
- 重组创伤弧菌溶细胞素诱导THP-1细胞损伤的机制研究
- 2013年
- 目的：研究重组创伤弧菌溶细胞素（rVvhA）对人单核细胞白血病细胞（THP-1）的损伤机制及其钙离子通道的研究。方法采用倒置显微镜、CCK-8法、Fluo3/AM法、caspase 活性检测等方法测定rVvhA对THP-1细胞的影响，并研究胞外Ca2＋的内流途径。结果 rVvhA作用后细胞形态学变化明显，细胞皱缩、变形甚至裂解，且呈剂量依赖性。12μg/ml rVvhA 作用THP-1细胞1 h后胞外K＋浓度升高，作用6 h后胞外LDH浓度显著升高。 Verapamil、Mibefradil和SKF-96365均不能抑制rVvhA引起的Ca2＋内流。同时rVvhA可导致THP-1细胞的caspase-3和caspase-9活性升高，并呈时间依赖性。结论 rVvhA对THP-1细胞具有明显的损伤作用，且可能通过caspase-9/3途径诱导细胞凋亡，并能引起细胞内Ca2＋浓度升高，升高的Ca2＋可能通过细胞膜上形成的孔道被动入胞。
- 陆晓雅陈建林刘彪谢旦立楼永良
- 关键词：细胞损伤钙离子通道
- rVvhA作用于THP-1细胞NF-κB信号通路的研究被引量：1
- 2012年
- 研究重组创伤弧菌溶细胞素(rVvhA)对人单核细胞系(THP-1)NF-κB信号通路的影响。应用CCK-8法检测rVvhA对THP-1细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜和激光共聚焦显微镜观察rVvhA作用后细胞的形态学变化和细胞内NF-κB p65的核转移情况;应用流式细胞仪和Westernblot检测rVvhA作用后细胞浆内和细胞核内NF-κB p65的表达情况;ELISA检测rVvhA作用于细胞后TNF-α、IL-6表达含量的变化。试验结果显示:rVvhA能够呈时间–剂量依赖性地抑制THP-1细胞的生长,且镜下可见明显的细胞形态学变化。激光共聚焦显示0.4 HU/mL rVvhA作用6 h后,THP-1细胞内NF-κB p65的核转移现象最明显;流式细胞仪结果显示0.6 HU/mL rVvhA作用2 h后,细胞内总的NF-κB p65表达量达到高峰;Western blot检测显示0.6 HU/mL rVvhA作用4 h时细胞核内NF-κBp65蛋白含量最高;ELISA显示TNF-α的表达在rVvhA作用的适当范围内呈时间–剂量依赖性变化;IL-6在0.6 HU/mL rVvhA作用时表达量最高,随后随着浓度的增加反而下降;NF-κB抑制剂能使IL-6表达量下调。实验证明rVvhA作用于THP-1细胞后能激活NF-κB信号通路,上调TNF-α、IL-6的表达,而NF-κB抑制剂能够下调IL-6的表达。
- 屠艳烨刘艳飞陈建林楼永良
- 关键词：创伤弧菌THP-1细胞NF-ΚBP65TNF-ΑIL-6
- 新型第二信使c-di-GMP对媒介病原菌生命周期及致病作用的分子机制研究
- 郑美琴李兴彪姚蔚郭雅君张刘丽陈建林许玲
- Rrp1是一种二鸟苷酸环化酶，负责第二信使c-di-GMP的合成。课题组发现B. burgdorferi中的双组分调控系统(two-component regulatory system，TCS)HK-Rrp1产生的c-...
- 关键词：
- 关键词：病原菌
- rVvhA功能模序膜成孔的预测及细胞毒作用机制分析被引量：1
- 2012年
- 利用生物信息学预测rVvhA的141-335位氨基酸片段有膜成孔模序。基因克隆表达得到95%以上纯度的rMpf,电子透射电镜观察其能够抑制Hela细胞生长且呈剂量依赖性,即0.8,1.6,2.4μg/mL rMpf作用8 h后,细胞和线粒体形态均发生凋亡和坏死改变,细胞内活性氧产生明显,线粒体膜电位下降,mPTP荧光检测膜通道孔活性增强。以上结果表明,rMpf具有诱导Hela细胞损伤的生物学活性,可通过改变膜通透性引起细胞凋亡。
- 刘艳飞陈建林许玲楼永良
- 关键词：生物信息学凋亡线粒体活性氧
