钱克俭
- 作品数：173 被引量：828H指数：14
- 供职机构：南昌大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
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- 高容量血液滤过对内毒素诱导休克犬循环功能的影响
- 2006年
- 目的研究高容量血液滤过(HVHF)对内毒素诱导休克犬循环功能的影响。方法选择健康杂种雄性犬16条,经中心静脉30 min注入内毒素(LPS)650μg/kg,诱导犬内毒素休克模型。随机分为对照组和治疗组,对照组(n=8)行假治疗,治疗组(n=8)行HVHF治疗。监测HVHF治疗0、1、2、3、4 h时HR、mAP、PAP、CVP、PAWP、CO值并计算PVR、SVR值。结果①静脉注入LPS后mAP、CO、HR逐步下降,而PAP、PAWP、CVP、PVR、SVR逐步上升,当mAP比基础值下降20%以上时认为模型成立。成模时各指标与基础值比较均有显著差异(P<0.01),两组同时点比较差异统计学无意义(P>0.05)。②HVHF治疗3 h后,治疗组mAP、CO高于对照组(P<0.01);治疗2 h后治疗组PAP低于对照组(P<0.01)。治疗组HR、PAWP保持稳定(P>0.05);对照组4h HR下降(P<0.05),PAWP上升(P<0.05)。两组比较,治疗组3 h后HR高于对照(P<0.01);PAWP两组差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗组PVR下降(P<0.01),对照组上升(P<0.05)。两组比较,治疗2 h后治疗组PVR低于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论HVHF能有效地改善内毒素诱导休克犬的循环功能,HVHF是感染性休克有效的治疗手段之一。
- 钱克俭江榕朱峰曾振国吕农华
- 关键词：高容量血液滤过内毒素休克动物
- 转染miR-146a对肺泡巨噬细胞中核因子-κB表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的观察肺泡巨噬细胞转染miR-146a后细胞浆与细胞核内核因子-κB(NF-κB)表达的变化,探讨miR-146a调控肺泡巨噬细胞炎症反应的可能机制。方法将NR8383大鼠肺泡巨噬细胞分成两组:一组为转染组,转染50 nmol/L Pre-miRTMmiR-146a Precursors;另一组为对照组,转染50 nmol CyTM3-labeled PremiRTMNegative Control。两组细胞转染24 h后加入含脂多糖培养基(终浓度1μg/mL),培养6 h后收集细胞,分别提取细胞浆蛋白与细胞核蛋白,采用Western blot方法检测NF-κB p65蛋白的表达。结果转染组miR-146a表达较对照组上调(P<0.01)。转染组细胞浆内NF-κB p65蛋白表达较对照组上调(P<0.05),而细胞核内NF-κB p65蛋白表达较对照组下调(P<0.05)。结论肺泡巨噬细胞转染miR-146a可抑制NF-κB核转位,推测miR-146a通过此机制减轻肺泡巨噬细胞炎症反应。
- 聂成刘芬曾振国詹以安邓文刚卿城邵强丁成志揭克敏钱克俭
- 关键词：肺泡巨噬细胞MIR-146A核因子-ΚB核转位
- iPSC-MSC来源的外泌体对LPS刺激肺泡巨噬细胞产生炎性因子的影响被引量：11
- 2016年
- 目的探讨i PSC-MSC来源的外泌体（exosome,Exo）对LPS刺激的肺泡巨噬细胞释放炎性因子的作用。方法采用旋转超滤法提纯i PSC-MSC外泌体,以无外泌体培养基培养肺泡巨噬细胞NR8383,分别给予Exo（50μg/ml）、LPS（50ng/ml）、LPS（50ng/ml）＋Exo（50μg/ml）培养24h,以不含Exo和LPS培养为对照组,利用酶联免疫标记法（ELISA）检测各组上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白浓度。结果提取物经透射电镜观察为圆形或半圆形囊泡,直径40-100nm,表达Exo标志物CD9和CD63;LPS组上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度（435.38±36.31pg/ml、319.76±39.14pg/ml和408.33±43.44pg/ml）与空白对照组（37.48±8.75pg/ml、33.51±7.88pg/ml和37.73±8.46pg/ml）和Exo组（38.71±9.14pg/ml、32.05±6.81pg/ml和42.84±6.54pg/ml）比较显著上调（P〈0.01）;LPS＋Exo组TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度（369.30±32.74pg/ml、249.23±36.77pg/ml和328.91±46.45pg/ml）与LPS组相比,明显减少（P〈0.05）;空白对照组与Exo组的TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度无显著性差异。结论成功富集Exo;i PSC-MSC来源的Exo可抑制LPS诱导的肺泡巨噬细胞表达炎性因子。
- 刘芬李勇彭菲菲胡国文熊加悦娄远蕾曾振国邵强钱克俭
- 关键词：外泌体脓毒症肺损伤
- 人诱导多能间充质干细胞来源外泌体对肺泡巨噬细胞焦亡的抑制作用被引量：7
- 2021年
- 目的探讨人诱导多能间充质干细胞来源外泌体(iMSC-Exos)对肺泡巨噬细胞(AM)焦亡的作用及机制。方法通过旋转超滤法提取人诱导多能间充质干细胞(iMSC)培养上清液中的外泌体,并利用透射电镜、蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)、高分辨率可调电阻脉冲对提取的外泌体进行鉴定。体外培养大鼠AM细胞株NR8383,取对数生长期细胞分为3组:对照组在AM上清液中加入等量磷酸盐缓冲液(PBS);脂多糖/三磷酸腺苷(LPS/ATP)组AM经500μg/L的LPS刺激23 h后再加入5 mmol/L的ATP刺激1 h诱导细胞焦亡;iMSC-Exos组将100 mg/L iMSC-Exos与NR8383细胞共孵育3 h后再给予LPS和ATP刺激。采用细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK-8)和乳酸脱氢酶(LDH)分析检测细胞毒活性;采用免疫荧光法观察细胞凋亡和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)表达;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测AM释放炎性因子白细胞介素(IL-1β、IL-18)水平;采用Western blotting法检测NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体途径及焦亡相关蛋白消皮素D(GSDMD)表达。结果提取的外泌体经透射电镜观察为圆形囊泡,Western blotting显示外泌体标志物CD63、CD9呈阳性表达,高分辨率可调电阻脉冲检测显示粒子平均直径130 nm,提示外泌体提取成功,能被AM吞噬。与对照组相比,LPS和ATP刺激后,细胞活性下降〔(0.56±0.05)%比(1.06±0.07)%,P<0.01〕,坏死物质LDH释放增加(U/L:1218.86±22.73比188.30±1.61,P<0.01),炎性因子分泌增加〔IL-1β(ng/L):958.91±32.78比194.63±5.14,IL-18(ng/L):870.89±21.86比288.85±24.48,均P<0.01〕,细胞凋亡率〔(55.35±6.19)%比(12.01±1.32)%,P<0.01〕及caspase-1表达均升高(荧光强度:41.06±3.65比2.80±0.54,P<0.01),提示LPS联合ATP可成功诱导细胞焦亡。与LPS/ATP组相比,给予iMSC-Exos预处理后,AM活性增加〔(0.81±0.05)%比(0.56±0.05)%,P<0.01〕,LDH释放减少(U/L:535.05±42.55比1218.86±22.73,P<0.01),炎性因子分泌减少〔IL-1β(ng/
- 彭巍江榕李勇陈家泉邵强钱克俭刘芬
- 关键词：外泌体肺泡巨噬细胞炎症反应
- 枸橼酸局部抗凝在血液滤过治疗中的应用研究
- 目的通过比较枸橼酸局部抗凝(RCA)与无肝素抗凝(NH)在血液滤过治疗中抗凝作用,来证实枸橼酸局部抗凝有效性及安全性。方法选择20例有高危出血风险行血液滤过治疗(CVVH)病例,治疗46例次,随机分为2组,一组采用枸橼酸...
- 聂成江榕王联群曾振国刘芬朱峰夏亮詹以安钱克俭
- 关键词：枸橼酸局部抗凝血液滤过
- 文献传递
- 蒸气吸入伤犬支气管肺泡灌洗后呼吸周期、通气量和血气的变化被引量：7
- 1999年
- 目的探讨蒸气吸入性损伤犬支气管肺泡灌洗(BAL)后呼吸周期、通气量和血气的变化,以期为临床治疗提供实验依据。方法将纤维支气管镜楔入伤犬三～四级肺叶支气管管口,进行小剂量复方药物 BAL。结果 BAL 后30,60,90min 的吸气时间(Ti)和呼吸周期(Tc)均显著低于对照值(P<0.05),呼吸率(RR)均显著高于对照值(P<0.05或 P<0.01);BAL 后30～60min 内,吸气时每分钟通气量(Vi)和呼气时每分钟通气量(Ve)均显著高于对照值(P<0.01或 P<0.05),BAL 后90min Vi 和 Ve 也高于对照值.但差异无显著意义;BAL 后30min PaO_2较对照值显著下降(P<0.05),表现为轻度缺氧。BAL 后60～90min PaO_2逐渐回升。与对照值比较,BAL 后各时相点的呼气时间(Te)、吸气和呼气时比(Ti/Te)、吸气时潮气量(Vti)、呼气时潮气量(Vte)、PaCO_2和 pH值均无明显变化。结论小剂量复方药物 BAL 能够减少呼吸周期,加快呼吸频率,提高每分钟通气量,而使潮气量保持恒定,可能存在呼吸“兴奋”作用,因而具有潜在的临床实用价值。
- 郭光华熊龙李国辉曹勇赵为禄钱克俭王联群吴燮卿
- 关键词：吸入性损伤支气管肺泡灌洗通气功能
- 颈内静脉的影象学分析被引量：3
- 2002年
- 目的 :确定颈内静脉穿刺的最佳部位方法随机抽取 31例成年人的颈部核磁共振图象和 2 0例青年志愿者颈部超声图像 ,取甲状软骨上缘、环状软骨、第 7颈椎 3个横截面的图象 ,分别观察和测定动静脉前后关系、动静脉内外关系、静脉到皮肌的距离。 2 0例青年志愿者中 ,10例探头置于环状软骨平面的气管两侧 ,在枕肩仰卧、去枕仰卧位、头低足高 3种体位下 ,测定静脉的直径与呼吸的关系。结果 :颈总动脉与颈内静脉紧密相连 ;颈内静脉有从上到下依次在动脉的后面过渡到平行、前面的趋势 (P <0 .0 1) ;三个平面自上而下颈内静脉前壁与颈前皮肤的距离依次变短 (P <0 .0 1) ;颈内静脉的直径在相同的呼吸状态 ,肩枕仰卧位 <去枕头正仰卧位 <头低足高位 (P <0 .0 1) ,在所观察的体位颈内静脉的直径都是深吸气 <平静呼吸 <深呼气 (P <0 .0 1)。结论环状软骨平面颈总动脉外侧0 .
- 钱克俭周爱云马龙先陈世彪王宗朝赵为禄
- 关键词：颈内静脉穿刺核磁共振
- 脂多糖对肺泡巨噬细胞自噬水平的影响被引量：5
- 2012年
- 目的观察脂多糖(LPS)诱导肺泡巨噬细胞(NR8383)后,对细胞自噬水平的影响。方法 将体外培养的NR8383细胞分成LPS处理组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,培养8h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白水平,自噬体检测:采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测细胞LC3 mRNA的转录水平、采用Western blot检测细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平。结果 LPS处理组细胞培养上清液中TNF-α含量(pg/ml)较PBS对照组明显升高(639.20±43.49 vs 6.47±1.23,P<0.01),细胞LC3 mRNA转录水平较PBS对照组上调(3.4±0.36倍,P<0.01),细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ较PBS对照组升高(1.03±0.15 vs 0.53±0.12,P<0.01)。结论 LPS刺激NR8383细胞后,细胞自噬体形成增多,其可能参与了NR8383肺泡巨噬细胞的炎症反应调控。
- 邵强李勇刘芬曾振国聂成丁成志卿城钱克俭
- 关键词：自噬肺泡巨噬细胞脂多糖
- 高容量血液滤过对内毒素诱导犬急性肺损伤的治疗作用及机制研究
- 目的： 研究高容量血液滤过(HVHF)对内毒素诱导犬急性肺损伤（ALI)的治疗作用，并探讨其作用机制。 方法： 1、建立内毒素(LPS)诱导急性肺损伤犬的模型 将健康杂种雄性犬16条，随机分为对照组和治疗组，对照...
- 钱克俭
- 关键词：急性肺损伤内毒素高容量血液滤过临床疗效
- MicroRNA-132增强乙酰胆碱对肺泡巨噬细胞炎症反应的抑制作用被引量：4
- 2015年
- 目的 观察调控microRNA-132 （miR-132）联合乙酰胆碱（ACh）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应的作用.方法 分别采用FAM荧光标记的mimic/inhibitor阴性对照（NC）、miR-132 mimic/inhibitor、mimic/inhibitor NC转染大鼠肺泡巨噬细胞NR8383,通过荧光显微镜观察转染效率,实时荧光定量PCR检测miR-132的表达.转染后细胞给予LPS（1μg/mL）刺激或LPS＋ ACh（10 μmoL/L）处理,采用酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β （IL-1β）及白细胞介素-6（IL-6）浓度.两组间均数比较采用独立样本t检验,以P ＜0.05为差异具有统计学意义.结果 通过在NR8383细胞中转染mimic FAM NC确定50 nmol/L为转染mimic的最佳浓度.与mimic NC组相比,miR-132 mimic组细胞中miR-132的表达上调了（21.54±2.14）倍（P=0.001）.LPS组中结果发现miR-132 mimic上清液中TNF-α（P=0.683）、IL-1β（P=0.770）、IL-6（P=0.872）水平较mimic NC差异均无统计学意义;LPS＋ ACh＋ mimic NC组TNF-α（P=0.008）、IL-1β（P =0.004）、IL-6 （P =0.003）水平与LPS＋mimic NC组相比均下降;LPS＋ ACh＋ miR-132 mimic组TNF-α（P=0.001）、IL-1β （P =0.001）、IL-6 （P =0.001）水平与LPS＋ ACh＋ mimic NC组相比均下降.通过转染inhibitor FAM NC确定100nmol/L为转染inhibitor的最佳浓度.LPS组miR-132 inhibitor上清液中TNF-α（P=0.800）、IL-1β（P =0.449）、IL-6 （P =0.418）水平较inhibitor NC差异均无统计学意义.LPS＋ ACh组结果显示miR-132 inhibitor可逆转ACh介导的TNF-α （P =0.018）、IL-1β （P =0.022）、IL-6 （P=0.032）水平的下降.结论 在体外培养环境,单独给予LPS时过表达miR-132或抑制miR-132活性不影响肺泡巨噬细胞炎症反应,但miR-132可增强ACh对LPS诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应的抑制作用.
- 刘芬李勇赵宁李东海江榕曾振国邵强彭菲菲王燕钱克俭
- 关键词：乙酰胆碱肺泡巨噬细胞炎症反应白细胞介素-1Β白细胞介素-6
