郭亦非
- 作品数：18 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 乙型脑炎病毒基因组cDNA克隆在宿主菌中不稳定因子的初步研究
- 为了探求乙型脑炎病毒基因组cDNA克隆在宿主茵中不稳定遗传的影响因子,本研究以猪源JEV HEN0701株基因组片段1 bp～2913 bp为研究对象,分析基因组原核启动子和相关毒力基因在不稳定遗传中的作用.在5'端,分...
- 郑旭晨郑浩郭亦非刘飞梁超童武单同领于海童光志
- 关键词：基因克隆
- 文献传递
- 乙型脑炎病毒基因组cDNA克隆在宿主菌中不稳定因子的初步研究被引量：1
- 2014年
- 为了探求乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）基因组cDNA克隆在宿主菌中不稳定遗传的影响因子，本研究以猪源JEV HEN0701株基因组片段1-2913 bp为研究对象，分析基因组原核启动子和相关毒力基因在不稳定遗传中的作用。在5＇端，分析片段中潜在的原核启动子序列，通过PCR扩增得到不同长度的cDNA片段；在3＇端，通过内切酶酶切截断基因组prM蛋白或E蛋白编码区，获得3＇末端不同的cDNA片段。将各片段克隆入pCR-BluntII-TOPO载体，转化大肠杆菌，于37℃条件下培养。结果显示，片段73-2913 bp、97-2913 bp、355-2913 bp及1-933 bp、1-1275 bp能够在转化菌中稳定遗传；含有其他片段39-2913 bp、54-2913 bp及1-1800 bp、1-1971 bp的重组细菌不能在37℃条件下生长；片段1-1600 bp虽然能够在转化菌中传代，但是出现不规律突变。以上结果表明：软件所预测各原核启动子片段中，基因组73-118 bp区域与cDNA克隆稳定性有关，且上游的54 bp至73 bp的序列对该区域启动子存在影响；在JEV基因组1275 bp至1600 bp之间可能存在毒性蛋白编码序列。
- 郑旭晨郑浩郭亦非刘飞梁超童武单同领于海童光志
- 关键词：乙型脑炎病毒
- 乙型脑炎病毒弱毒株重组感染性克隆质粒及其应用
- 本发明公开一种乙型脑炎病毒弱毒株重组感染性克隆质粒，包含乙型脑炎病毒弱毒株10S3的全长基因组cDNA序列，或乙型脑炎病毒弱毒株10S3的全长基因组cDNA序列内部引入标记性酶切位点的全长cDNA序列。本发明还公开了一种...
- 郑浩童光志郑旭晨童武马志永郭亦非
- 文献传递
- 乙型脑炎病毒反向遗传系统的构建
- <正>乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)属黄病毒科黄病毒属,是一种重要的蚊传人兽共患病病原。近年来,我国出现基因I型(genotype I,GI)JEV,并逐渐成为主要流行基因...
- 郑浩郑旭晨郭亦非童武童光志
- 文献传递
- 乙型脑炎病毒弱毒株重组感染性克隆质粒及其应用
- 本发明公开一种乙型脑炎病毒弱毒株重组感染性克隆质粒，包含乙型脑炎病毒弱毒株10S3的全长基因组cDNA序列，或乙型脑炎病毒弱毒株10S3的全长基因组cDNA序列内部引入标记性酶切位点的全长cDNA序列。本发明还公开了一种...
- 郑浩童光志郑旭晨童武马志永郭亦非
- 文献传递
- 乙型脑炎病毒基因组cDNA克隆在宿主菌中不稳定因子的研究
- 黄病毒基因组cDNA克隆在大肠杆菌中易于出现碱基替换、核苷酸缺失和外源序列插入等不能稳定遗传现象.为探求病毒基因组中原核启动子和相关序列对该现象的影响，以猪源乙型脑炎病毒HEN0701株基因组nt l.2913克隆pTH...
- 郑旭晨郑浩郭亦非刘飞梁超童武童光志
- 关键词：乙型脑炎病毒
- 乙型脑炎病毒HEN0701致弱株的筛选及其生长特性
- 本文将乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)基因Ⅰ型HEN0701株在BHK-21细胞上传代,并通过空斑纯化和接种小鼠来筛选弱毒株.通过空斑试验和一步生长曲线,比较弱毒株和其亲本强...
- 郑浩郑旭晨郭亦非童武刘飞张青占单同领童光志
- 猴源天然免疫限制性因子SAMHD1单克隆抗体的制备与鉴定被引量：3
- 2014年
- 为制备具有广谱反应性的SAMHD1单克隆抗体,通过提取Marc-145细胞的总RNA,采用RTPCR将SAMHD1全长编码基因定向克隆至pCold-TF原核表达载体中,成功构建了重组质粒pColdmSAMHD1。重组质粒转化大肠杆菌Rosseta感受态细胞,经IPTG诱导表达并通过纯化获得了可溶性的重组SAMHD1蛋白。以纯化的重组SAMHD1蛋白为抗原,免疫8周龄BALB/c小鼠,通过间接ELISA和5次杂交瘤细胞亚克隆,筛选出1株针对SAMHD1蛋白的单克隆抗体,遂被命名为M2D9。Western-blot分析显示,M2D9能够与SAMHD1真核表达蛋白以及细胞内源性SAMHD1蛋白发生特异性反应,且具有很好的免疫沉淀效价。交叉反应性鉴定结果显示,M2D9抗体能够与人、鼠源细胞内SAMHD1蛋白发生特异反应。本研究成功获得了具有特异性和广谱反应性的猴源SAMHD1单克隆抗体,可用于ELISA检测、Western-blot分析和免疫沉淀试验,为SAMHD1蛋白功能的深入研究奠定了基础。
- 杨莘周艳君姜一峰童武郭亦非刘飞童光志
- 关键词：单克隆抗体
- 乙型脑炎病毒HEN0701致弱株的筛选及其生长特性
- 为研制针对目前猪场中流行的JEV GI株更有效的疫苗，本文对从流产猪胎儿中分离的JEV GI株HEN0701进行了致弱研究。也可能是进入细胞的10S3比HEN0701少，导致12h时感染上清中HEN0701比10S3滴度...
- 郑浩郑旭晨郭亦非童武刘飞张青占单同领童光志
- 关键词：乙型脑炎病毒基因疫苗免疫能力
- 文献传递
- 乙型脑炎病毒NS1’蛋白对病毒毒力的影响
- 乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)及其同血清群病毒在复制过程中存在核糖体-1移码表达NS1’蛋白的现象,但NS1’蛋白的功能目前仍不明确,核糖体移码在病毒复制过程中发挥的作用也...
- 郭亦非
- 关键词：乙型脑炎病毒突变毒力
- 文献传递
