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APOE基因多态性分子生物学检测技术进展及评价被引量：4: 2007年; 载脂蛋白E（Apolipoprotein E,apoE代表载脂蛋白,APOE代表编码载脂蛋白的相应基因）是一种胆固醇转运蛋白,由肝、脾、肾等合成后进入血液循环广泛分布于全身。APOE具有三个等位基因APOEε2、APOEε3及APOEε4,它们主要的区别是其DNA序列上存在两个位点的碱基替代,造成它们所编码的apoE在第112位和第158位的氨基酸残基发生了相应的变化。APOEε2在两个位点上均为半胱氨酸（Cys）,APOEε3在第112位为半胱氨酸,而第158位为精氨酸（Arg）,APOEε4在两个位点上均为精氨酸。这种多态性导致在人群中产生了六种不同的表型,三种为纯合子（ε2/ε2,ε3/ε3,ε4/ε4）,另三种为杂合子（ε2/ε3,ε2/ε4,ε3/ε4）。ε3是最常见的等位基因,ε3/ε3是最常见的基因型。; 郐莉喻应贵; 关键词：APOE基因多态性分子生物学检测载脂蛋白等位基因

载脂蛋白E短肽COG1410对蛛网膜下腔出血后早期脑水肿的影响被引量：2: 2016年; 目的探讨载脂蛋白E短肽COG1410对蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后早期脑损伤(early brain injury,EBI)中脑水肿、小鼠运动功能和水通道蛋白4(aquaproins-4,AQP-4)的影响。方法 108只C57BL/6J小鼠分成假手术对照组(sham)、生理盐水组(SAH+生理盐水)、治疗组(SAH+COG1410),采用血管内穿刺法建立SAH模型。观察小鼠运动功能变化,用干湿质量法测定脑含水量的变化,免疫组化法测定表达AQP-4阳性细胞数,酶联免疫吸附法(ELISA)测定AQP-4蛋白含量及实时定量PCR测定AQP-4 m RNA的变化。结果 SAH后生理盐水组和治疗组神经功能评分均明显高于假手术对照组(P<0.05),且生理盐水组和治疗组之间差异有统计学意义(P<0.05)。SAH后各时间点生理盐水组脑含水量、AQP4蛋白含量和AQP4 m RNA表达的变化与假手术对照组对比显著升高(P<0.05)。生理盐水组和治疗组脑含水量、AQP4蛋白含量和AQP4 m RNA表达均在SAH后1 d明显增加,2 d达到高峰,之后逐渐下降,2组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论载脂蛋白E短肽COG1410可能通过抑制AQP-4的过表达缓解EBI中的脑水肿。; 贺杰庞金伟吴越彭建华曹芳秦兴虎郐莉陈礼刚孙晓川江涌; 关键词：蛛网膜下腔出血水通道蛋白4 脑水肿早期脑损伤

人载脂蛋白Eε3等位基因的克隆及表达被引量：3: 2008年; 目的:克隆人载脂蛋白E(Apolipoprotein E,APOE)ε3等位基因,测定序列,并构建带有人源性APOEε3等位基因的真核表达载体。方法:通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从人胎儿脑组织中克隆得到APOEε3等位基因,与PMD19-T载体连接,再酶切PMD19-T-APOEε3,获得APOEε3基因,然后将其与表达载体pEGFP-N1连接,构建pEGFP-N1-APOEε3真核表达载体。重组质粒转染293T细胞后,在荧光显微镜下观察EGFP的表达,并用Western-Blot的方法检测目的蛋白在293T细胞中的表达。结果:经酶切和DNA测序证明APOEε3基因序列正确,真核表达载体构建成功。将重组质粒转染293T细胞,在转染后的细胞中检测到目的蛋白的表达。结论:成功构建了pEGFP-N1-APOEε3真核表达载体,该表达载体能在真核细胞中正确表达。; 郐莉江涌孙晓川郑履平; 关键词：载脂蛋白E 等位基因基因克隆真核表达

APOE基因亚型及其短肽COG1410对神经细胞损伤后早期凋亡的影响被引量：3: 2014年; 目的探讨载脂蛋白E(APOE代表基因,apoE代表蛋白)亚型特异性及其短肽与早期凋亡的相关性,以期明确APOE亚型影响脑创伤病情转归及预后的病理机制。方法采用稳定表达人APOE各等位基因的APOE敲除鼠的神经干细胞,优化诱导分化条件,构建神经元/胶质细胞共培养体系及细胞划痕损伤模型。通过Annexin V/PI联合流式细胞技术检测损伤后各组细胞早期凋亡率,分析人APOE各等位基因及其短肽影响继发性神经细胞损伤的差异。结果成功构建携带人源性APOE各亚型的细胞划痕损伤模型;伤后24 h时间点各组细胞早期凋亡率较6、12 h明显增高(P<0.05),且人APOEε4组较其余亚型组早期凋亡率明显增高(P<0.05)。在伤后24 hapoE短肽COG1410可显著降低各亚型组早期凋亡率(P<0.01)。结论 APOEε4携带者可能通过早期凋亡导致脑创伤急性期病情加重。而apoE短肽COG1410可通过降低早期凋亡发挥神经保护作用。; 江涌孙晓川陈礼刚郐莉; 关键词：短肽体外模型早期凋亡

人APOEε2及ε4等位基因修饰的神经干细胞的建立被引量：1: 2010年; 目的构建APOEε2和APOEε4的真核表达载体,转染APOE敲除鼠神经干细胞,分别建立转染APOEε2和ε4的神经干细胞系。方法以前期克隆得到的APOEε3cDNA为基础,通过定点突变技术得到APOEε2和APOEε4cDNA,亚克隆入表达载体pEGFP-N1,构建pEGFP-N1-APOEε2及pEGFP-N1-APOEε4的真核表达载体,经双酶切和测序确定序列及阅读框正确。以脂质体转染法转染APOE敲除鼠神经干细胞,通过G418筛选,建立转染APOEε2和ε4的神经干细胞系。采用RT-PCR、Westernblot及免疫荧光法检测APOE的表达。结果APOE敲除鼠NSCs转染6h后发出绿色荧光,48h达到高峰,荧光显微镜下观察转染率约(40.0±2.3)%,转染pEGFP-N1-APOE的NSCs在筛选至第10天可见细胞克隆形成。经鉴定保持了自我更新、多向分化保持性,其中分化为神经元的比例为(32.15±2.61)%,各组之间无明显差异。结论成功构建了稳定表达源性APOEε2及ε4的神经干细胞克隆,相应等位基因修饰的神经干细胞能高效表达目的基因蛋白并保留其干细胞特性。; 江涌吴海涛孙晓川陈礼刚郐莉郭宗铎顾应江刘洛同; 关键词：载脂蛋白E类等位基因真核表达载体神经干细胞

载脂蛋白E拟肽对创伤性脑损伤后脑组织TNF-α表达和脑水肿的影响及意义被引量：11: 2016年; 目的探讨载脂蛋白Z（apoE）拟肽COGl410对创伤性脑损伤（TBI）急性期脑组织肿瘤坏死因子-α（TNF—α）和脑水肿的影响。方法雄性C57BL／6J基因野生鼠45只按随机数字表法分为假手术组、等渗盐水组、apoE拟肽干预组，每组15只。后2组小鼠采用控制性气压冲击法构建TBI模型，模型制作完成30min后分别予以尾静脉注射200μL等渗盐水和apoE拟肽COG1410（0．2mg／mL）。造模后24h,RT—PCR、酶联免疫吸附实验（ELISA）法分别检测小鼠伤侧半脑TNF—α mRNA的表达和TNF-α的含量；MRI T2WI像扫描检测小鼠脑水肿体积及双侧侧脑室体积比。结果RT-PCR、ELISA检测显示：与假手术组比较，等渗盐水组、apoE拟肽干预组小鼠脑组织TNF-α mRNA和含量明显升高,且apoE拟肽干预组小鼠脑组织TNF-α mRNA和含量较等渗盐水组明显降低,差异均有统计学意义（P〈0．05）。MRI T2WI脑扫描显示apoE拟肽干预组小鼠脑水肿体积较等渗盐水组明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）；与假手术组比较，等渗盐水组、apoE拟肽干预组小鼠伤侧／对侧侧脑室体积比降低，且apoE拟肽干预组小鼠伤侧／对侧侧脑室体积比较等渗盐水组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。相关性分析显示等渗盐水组与apoE拟肽干预组小鼠TBI急性期脑组织TNF-α含量和脑水肿体积呈正相关性（r=0．969，P=0．001）。结论apoE拟肽可通过抑制TBI急性期脑组织TNF-α的过度表达从而抑制血管源性脑水肿。; 秦兴虎游红郐莉曹芳吴越董劲虎陈礼刚孙晓川江涌; 关键词：载脂蛋白E 脑水肿

教学相长式业务学习在眼科硕士研究生培养中的作用被引量：2: 2015年; 目的：了解师生共同参与主讲的教学相长式业务学习对眼科学硕士研究生综合能力培养的作用,为眼科学研究生教育探讨新的模式。方法：对泸州医学院2010-2014级的31名眼科学各专业硕士研究生及47名泸州医学院附属医院眼科全体医护人员进行回顾性问卷调查,明确新的业务学习模式是否可提高眼科研究生的综合能力。结果：开展教学相长式业务学习可提高眼科学硕士研究生的综合能力。结论：教与学相互促进、共同提高有助于眼科学硕士研究生综合能力的培养。; 王杰康刚劲徐曼华郐莉王芳董敏刘鹃蒋燕; 关键词：教学相长教育眼科

载脂蛋白E拟肽对创伤性脑损伤后脑组织血管再生的影响被引量：4: 2015年; 目的探讨载脂蛋白E（apoE）拟肽对创伤性脑损伤（TBI）后脑组织血管内皮生长因子（VEGF）、微血管密度（MVD）、血脑屏障（BBB）通透性和脑水肿的影响.方法将256只C57BL/6J雄性基因野生型小鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、等渗盐水组、apoE拟肽干预组,每组又分为创伤后1d和3d两个亚组,每亚组32只.采用控制性气压冲击法构建小鼠TBI模型.apoE拟肽干预组为创伤后每24 h予以尾静脉注射apoE拟肽COG1410,其他组为创伤后每24 h予以尾静脉注射等渗盐水;创伤后1,3d,采用ELISA法、免疫组化、伊文思蓝和干湿重法分别检测脑组织VEGF表达情况、MVD、BBB通透性和脑组织含水量.结果创伤后第1天,假手术组与正常对照组脑组织VEGF表达量、MVD计数、BBB通透性和脑组织含水量比较差异无统计学意义（P＞0.05）;apoE拟肽干预组与等渗盐水组脑组织VEGF表达量[（18.12±1.51） pg/ml∶（23.66±1.78） pg/ml]、MVD计数[（14.78±1.98）个/HP∶（19.25±2.23）个/HP]、BBB通透性[（0.45 ±0.02）∶（0.53 ±0.05）]和脑组织含水量[（79.05±0.17）％∶（79.77±0.22）％]比较均明显降低（P＜0.05）.创伤后第3天,假手术组与正常对照组脑组织VEGF表达量、MVD计数、BBB通透性和脑组织含水量比较差异无统计学意义（P＞0.05）;apoE拟肽干预组与等渗盐水组脑组织VEGF表达量[（28.77±2.01） pg/ml∶（34.52±1.93） pg/ml]、MVD计数[（20.67 ±2.58）个/HP∶（31.66±3.67）个/HP]、BBB通透性[（0.60 ±0.07）∶（0.79±0.10）]和脑组织含水量[（78.97±0.29）％∶（80.06±0.28）％]比较均明显降低（P＜0.05）.结论 apoE拟肽能有效降低TBI后脑组织血管的过度再生以及由血管过度再生引起的血管源性脑水肿.; 江涌秦兴虎游红郐莉曹芳刘杰什贺杰庞金伟彭建华万伟峰杨晓波陈礼刚孙晓川; 关键词：载脂蛋白E类脑损伤血脑屏障

改良静脉留置针治疗外伤性泪小管断裂的临床观察: 2009年; 目的:探讨使用改良静脉留置针治疗外伤性泪小管断裂的临床疗效,并分析其并发症。方法:利用改良静脉留置针作为支撑物治疗外伤性泪小管断裂42例,术后常规处理,3月拔除静脉留置针,随访观察6～24个月。结果:术后仅有少数患者有轻微的下眼睑外翻,无其它并发症。42例泪小管断裂患者中治愈39例(92.86%),好转2例(4.76%),无效1例(2.38%),总有效率达97.62%。结论:改良静脉留置针治疗外伤性泪小管断裂效果好,安全可靠,改良静脉留置针是一种治疗泪小管断裂的理想材料。; 盘如刚李友谊郐莉; 关键词：泪小管断裂静脉留置针并发症

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