薛朝阳
- 作品数：23 被引量：139H指数：9
- 供职机构：浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：教育部跨世纪优秀人才培养计划浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 侵染番茄的番茄花叶病毒的研究被引量：22
- 1996年
- 从种传番茄苗中获得一病毒分离物Ｔｏ－Ｓｌ，人工摩擦接种７科２４种植物，Ｔｏ～Ｓｌ能侵染４科１５种植物，在番茄上产生花叶，在白肋烟上为局部枯斑。Ｔｏ－Ｓｌ的钝化温度为８５～９０℃，稀释限点为１０￣（－６）～１０￣（－７）．体外保毒期在一个月以上。病毒粒体杆状，长度主要分布于２８１～３００ｎｍ之间，平均长度２８８ｎｍ。病毒衣壳蛋白亚基只有一条多肽链，分子量为２１ｋＤａ。ｄｓＲＮＡ分析测得其基因组长度为６．４ｋｂ。琼胎糖双扩散和胶内交叉吸附试验证明，Ｔｏ－Ｓｌ与ＴＭＶ有血清关系，但有一定的差异，病毒粒体电泳分析也表明Ｔｏ－Ｓｌ与ＴＭＶ粒体有差异。在交叉保护试验中，ＴＭＶ和Ｔｏ－Ｓｌ之间均无保护作用。根据以上试验结果Ｔｏ－Ｓｌ被鉴定为番茄花叶病毒。这是我国首次系统报道番茄上番茄花叶病毒的侵染。
- 周雪平钱秀红刘勇薛朝阳李德葆
- 关键词：番茄番茄花叶病毒病毒病植物病毒
- 芜菁花叶病毒杭州分离株外壳蛋白基因序列分析被引量：5
- 1994年
- 从杭州郊区分离出一个ＴｕＭＶ强毒株系，利用分子克隆和Ｓａｎｇｅｒ双脱氢测序方法分析了其外壳蛋白基因的ＤＮＡ序列．该序列与已报道的其他４种ＴｕＭＶ分离物都具有较高的同源性，最高达９７．６％，最低达８９．５％，其氨基酸序列的同源性更高，最高达９７．９％，最低达９４．５％。本文分析了该序列中ＡＴ和ＧＣ含量，计算了４种核苷酸在有意义链中和在密码子不同位置上的出现频率，同时还分析了该病毒外壳蛋白氨基酸遗传密码的使用频率。
- 徐平许建平薛朝阳李德葆
- 关键词：芜菁花叶病毒外壳蛋白
- 十字花科蔬菜上黄瓜花叶病毒分离物的比较研究被引量：14
- 1997年
- 对从杭州市郊青菜、萝卜、花椰菜上分离的6个CMV分离物进行了生物学、血清学及双链RNA比较研究。生物学测定结果表明,不同分离物在所测定的6种十字花科蔬菜上的致病力有差异。6种分离物颗粒形态、衣壳蛋白分子量和血清学方面无差异,且都属血清型Ⅰ。dsRNA分析结果表明,6个分离物的dsRNAl,2,3和4在PAGE中迁移率相似,但在1.5kb～0.4kb之间有多条量相对较少的条带,这些条带在不同分离物之间差异较大。6个分离物均含有卫星RNA。
- 周雪平刘勇薛朝阳金巧玲李德葆
- 关键词：黄瓜花叶病毒十字花科蔬菜分离物
- 烟草花叶病毒蚕豆株系外壳蛋白基因及3'端非编码区的克隆与序列分析被引量：5
- 1997年
- 根据烟草花叶病毒（Ｔｏｂａｃｏｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ，ＴＭＶ）Ｕ１株系（ＴＭＶ－Ｕ１）序列，人工合成引物，用ＲＴ法合成ｃＤＮＡ后，通过ＰＣＲ技术扩增并克隆了烟草花叶病毒蚕豆株系（ＴＭＶ－Ｂ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因和３＇端非编码区。ＤＮＡ序列测定结果表明，外壳蛋白基因全长４８０个碱基，编码１５８个氨基酸，３＇端非编码区全长２０４个碱基，与ＴＭＶ－Ｕ１株系的同源率为１００％。将ＣＰ基因及３＇端非编码区插入ｐＧＥＭＥＸ－１的Ｔ７基因１０中，转入Ｅ．ｃｏｌｉ后诱导表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳分析呈现一特异的蛋白带，Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫检测证明，该特异带与ＴＭＶ抗血清呈阳性反应。
- 周雪平刘勇薛朝阳李德葆
- 关键词：烟草花叶病毒外壳蛋白基因克隆
- 芜菁花叶病毒外壳蛋白基因的序列分析及其在大肠杆菌中的表达被引量：9
- 1994年
- 从杭州郊区感病的甘蓝型油菜上分离到一种致病力较强的芜菁花叶病毒（Ｔｕｒｎｉｐｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ，ＴｕＭＶ）分离物。大量提取病毒并纯化后，电镜观察病毒粒子约７４０ｎｍ×１２ｎｍ。以寡聚（ｄＴ）１５为引物合成ｃＤＮＡ，并根据外壳蛋白（ＣＰ）基因两端序列设计两个诱变引物进行ＰＣＲ扩增，得到一个特异性ＤＮＡ片段。将该片段克隆到ｐＵＣ１８中，经Ｓａｎｇｅｒ双脱氧法测序，结果表明该ＣＰ基因全长为８６７ｂｐ。与前人报道的两种芜青花叶病毒ＣＰ基因的核苷酸序列的同源性分别为８９．５％和９６．７％。，氨基酸序列的同源性分别为９４．５％和９７．９％。将ＣＰ基因亚克隆到原核表达载体ｐＫＫ２３３－２中，用ＩＰＴＧ诱导含插入片段表达载体的大肠杆菌，Ｗｅｓｔｅｍ印迹检测证明，大肠杆菌能表达病毒的ＣＰ。
- 徐平许建平薛朝阳陈集双张耀洲李德葆
- 关键词：芜菁花叶病毒外壳蛋白基因
- 番茄花叶病毒中国分离物的生物学特性及其基因结构分析(英文)
- 1998年
- Ｔｏｍａｔｏｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ（ＴｏＭＶ）ｉｓａｓｐｅｃｉｅｓｏｆＴｏｂａｍｏｖｉｒｕｓ．Ｉｔｗａｓｆｉｒｓｔｒｅｐｏｒｔｅｄｉｎ１９０９ｉｎＡｍｅｒｉｃａ．ＴｏＭＶｐａｒｔｉｃｌｅｓａｒｅｓｔｒａｉｇｈｔｔｕｂｕｌｅｓ，ａｂｏｕｔ１８ｎｍｉｎｄ...
- 薛朝阳周雪平青玲李德葆
- 关键词：番茄花叶病毒中国分离物生物学特性基因结构
- 番茄花叶病毒移动蛋白基因转化烟草及在转基因烟草中的表达被引量：16
- 2001年
- 从提纯病毒抽提基因组RNA ,并通过RT PCR扩增番茄花叶病毒 (ToMV)移动蛋白 (MP)基因。经克隆测序后插入植物表达载体PBI12 1的 35S启动子下游 ,通过PCR及酶切筛选分别获取正、反向插入的克隆 ,通过三亲交配导入农杆菌 ,叶盘转化法转化普通烟草。卡那霉素筛选获得一系列抗性小苗 ,对其进行PCR检测 ,Southern、Northern点杂交 ,Western blot检测 ,获得能正义、反义表达ToMVMP基因的转基因植株。
- 黄晓璪陈青薛朝阳周雪平
- 关键词：番茄花叶病毒转基因烟草寄主植物互作机制
- 蚕豆萎蔫病毒中国分离物RNA2全序列及多聚蛋白切割位点被引量：3
- 2000年
- 对蚕豆萎蔫病毒2(BBWV2)分离物B935 RNA2全序列进行了测定,全长由3601个核苷酸组成(不包括3′端Poly(A))。RNA2包含一个长的开读框,该开读框起始于231位,终止于3428位,编码一个分子量为119 ku的多聚蛋白。对外壳蛋白亚基N端氨基酸序列测定表明外壳蛋白大亚基(LCP)和小亚基(SCP)是由119 ku多聚蛋白中谷酰胺与甘氨酸及谷酰胺与丙氨酸之间的切割产生的,LCP含有402个氨基酸,SCP含有197个氨基酸。与蚕豆病毒属(Fabavirus)病毒基因组核苷酸及编码的蛋白质氨基酸序列比较表明,B935与BBWV2分离物及广藿香轻花叶病毒具有很高的同源性,而与BBWV1分离物的同源性较低。B935与豇豆花叶病毒属(Comovirus)和线虫传多面体病毒属(Nepovirus)的基因组结构相似,但序列同源性很低。B935与豇豆病毒属病毒的LCP和SCP氨基酸具有共同的保守序列。用4株单克隆抗体进行TAS-ELISA测定表明B935与BBWV1分离物(NRS和PH3)抗原上有差异。
- 戚益军周雪平薛朝阳李德葆
- 关键词：RNA2
- 黄瓜花叶病毒弱株系CMVP_1卫星RNA的cDNA合成、克隆及序列分析
- 1995年
- 黄瓜花叶病毒弱株系ＣＭＶＰ_１卫星ＲＮＡ的ｃＤＮＡ合成、克隆及序列分析周雪平，刘勇，薛朝阳，李德葆（浙江农业大学生物技术研究所，杭州３１００２９）ＣｌｎｉｎｇａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｓａｔｅｌｌｉｔｅＲＮＡｇｅｎｅｏｆｃｕｃｕｍｂｅ?..
- 周雪平刘勇薛朝阳李德葆
- 关键词：黄瓜花叶病毒卫星RNACDNA合成生物技术研究田间小区试验
- 受番茄花叶病毒侵染后寄主的超微病变研究被引量：20
- 1999年
- 电镜观察了番茄花叶病毒 (ToMV)侵染不同寄主的细胞超微结构变化。在 2 5℃下ToMV侵染番茄(LycopersiconesculentumMill.)后 ,病毒粒子在叶片的表皮、薄壁细胞、维管束组织的细胞质中形成大块结晶体和类结晶体 ,液泡膜处产生小泡结构 ,有多泡体和髓鞘样结构伸入液泡中。在 2 5℃下ToMV侵染珊西烟(NicotianatabacumL .cv .Xanthinn)后 ,除存在病毒结晶体和类结晶体外 ,还形成角层状聚集体 ,叶绿体产生周边囊泡结构。在 35℃下ToMV侵染珊西烟后 ,在细胞质中还形成高电子密度的无定型体。两种寄主中均未观察到X体 ,细胞核和叶绿体中无病毒粒子。结果表明ToMV的细胞病变特征与烟草花叶病毒 (TMV)存在差异 ,可作为病毒诊断的依据之一。
- 洪健薛朝阳徐颖周雪平李德葆
- 关键词：番茄花叶病毒细胞病理学寄主
