罗娜
- 作品数：12 被引量：25H指数：3
- 供职机构：第四军医大学基础医学部神经科学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 游离血红蛋白对体外培养成年大鼠嗅鞘细胞存活的影响被引量：3
- 2007年
- 目的观察不同浓度游离血红蛋白（FHb）对体外培养大鼠嗅鞘细胞（OECs）存活的影响。方法采用成年大鼠（2．5月）嗅球培养OECs，培养第8天用S-100免疫组化鉴定纯度后，将培养的OECs根据加入的FHb浓度分为1，10，50，100μmol／L组及正常对照组，观察不同浓度FHb下OECs形态学变化；培养24h后采用MTT实验检测不同浓度FHb组细胞活力；并用碘化丙啶（PI）和Hocchst33342荧光双染色观察检测细胞死亡。结果大鼠OECs纯度为（72±6）％；MTT试验显示各组细胞活力随血红蛋白浓度的升高而降低；PI／Hoechst33342双荧光染色显示在对照组未见PI染色阳性细胞，各FHb组细胞PI／Hoechst33342比例随血红蛋白浓度增加而升高。结论FHb对OECs有毒性作用且随浓度的增加而增加。
- 薛海龙罗娜杨浩沈学锋鞠躬
- 关键词：嗅鞘细胞细胞存活游离血红蛋白
- 神经干细胞的研究进展被引量：2
- 2002年
- 神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)是指神经系统中处于较早发育阶段的细胞群体,它们可以通过自身的对称性或不对称性两种分裂方式进行自我复制,产生神经组织中不同发育阶段和不同分化方向的细胞,最终生成具有一定细胞数目和多种细胞类型的神经组织[1.2].本文就NSCs的发生和分化、定位、特点、影响其分化的因素以及当前对NSCs的应用做如下介绍.
- 孟晋宏罗娜鞠躬
- 关键词：细胞分化神经干细胞
- 不同因子对人源性成神经元细胞系SH-SY5Y的作用
- 将传代培养的人源性成神经元细胞系SH-SY5Y以5×10细胞/孔的浓度接种到Poly-L-Lysin包被的96孔板或24孔板,分别以EGF(20ng/ml)、bFGF(20ng/ml)、RA(10M)作用后行MTT和免疫...
- 孟晋宏罗娜王亚周鞠躬
- 文献传递
- 嗅鞘细胞培养液对海仁藻酸损伤脊髓神经元一氧化氮产生的影响被引量：3
- 2005年
- 目的研究嗅鞘细胞培养液(OECCM)对海仁藻酸(KA)损伤后原代培养脊髓神经元的作用,进一步探讨其保护的作用机理。方法采用原代细胞培养法,分别培养了胚胎小鼠脊髓神经元和成年大鼠的嗅神经鞘细胞(OECs),收集OECCM。通过给予KA建立体外的损伤模型,KA分别作用6,8,12h后,加入OECCM继续培养24￣36h。然后进行抗神经元型一氧化氮合酶(ncNOS)免疫细胞化学染色,观察细胞ncNOS表达情况,并对各组ncNOS阳性神经元数目进行统计,同时运用四唑盐(MTT)比色法检测神经细胞活性;最后对不同组的一氧化氮合酶(NOS)阳性细胞染色情况、阳性细胞数目和细胞活性进行比较。结果KA作用后,一氧化氮(NO)都出现异常表达,但与实验组(OECCM干预组)相比,OECCM处理组NO表达水平明显低于单纯KA损伤组。OECCM处理组NOS阳性细胞数目(6h组,34.3±5.25;8h组,40.6±3.68),明显低于对照组(6h组,42.3±3.48;8h组,54.5±6.30)(P<0.01),在KA损伤12h时,两组NOS阳性细胞数(52.3±5.23vs61.32±6.45)(P<0.05);而细胞活性(6h,0.372±0.034;8h,0.312±0.026)明显高于对照组(6h,0.283±0.041;8h,0.219±0.033)(P<0.01),12h时两组细胞活性没有明显差异(0.199±0.012vs0.202±0.032)(P>0.05)。结论OECCM中可能含有一些保护脊髓神经元免遭KA损伤的因子,这些因子可能在参与抑制NOS异常表达起了重要作用。
- 杨浩李静雯罗娜游思维鞠躬
- 关键词：嗅鞘细胞细胞培养脊髓一氧化氮
- EGCG对羟自由基损伤小鼠胚胎海马神经元的保护作用被引量：2
- 2005年
- 为了探讨表没食子儿茶素没食子酸酚(tea polyphenol(-)-epigallocatechin gal-late,EGCG)对羟自由基损伤小鼠海马神经元的保护作用,采用原代细胞培养技术,分离培养18 d小鼠胚胎海马神经元,培养4 d后,加入FeSO4和H2O2进行处理,随后加入不同浓度的EGCG培养24 h,通过观察细胞的形态学变化,四甲基偶氮唑盐(methylthiazolydi-phenyl-tetrazolium bromide,MTT)比色法分析细胞活性,检测神经元中丙二醛(malondi-aldehyde,MDA)以及培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量的变化,以探讨EGCG对羟自由基损伤神经元的保护作用。结果显示,EGCG能够抑制神经元MDA的产生,降低神经元细胞外液中LDH的含量,增加细胞的活性,从而进一步证明EGCG能够清除羟自由基产生,减轻羟自由基对神经元损伤,对神经元的存活有一定的保护作用,为其用于治疗中枢神经系统病理性损伤的打下实验基础。
- 杨浩李静雯罗娜程希平鞠躬
- 关键词：细胞培养海马羟自由基
- 移植含嗅鞘细胞和体外溃变的周围神经对成年大鼠视网膜神经节细胞轴突再生作用的比较被引量：1
- 2007年
- 目的比较含嗅鞘细胞（OEC）或（和）体外溃变的周围神经移植对成年大鼠视网膜神经节细胞（RGC）轴突再生的影响。方法将24只成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为4组，每组各6只大鼠：A组（周围神经对照组）：将取出的一段自体坐骨神经与眶内切断的左侧视神经近侧断端吻合；B组（OEC注入周围神经组）：自取出的坐骨神经两端注入10μlOEC悬液后移植于视神经断端。C组（周围神经体外溃变组）：将取出的坐骨神经在体外单独培养5d后植于视神经断端；D组（OEC-周围神经共培养组）：将取出的坐骨神经与OEC共培养5d后植于视神经断端。移植术后4周处死动物，计数各组以5%荧光金逆行标记的再生RGC数量。结果B、C、D三组RGC均数1481±268、1235±266和1464±285显著高于A组799±109（P值分别为0.0002、0.0010和0.0003）；B、C、D三组间差异无统计学意义（P值分别为0.3644、0.9167和0.4344）。结论OEC具有促进RGC轴突在新鲜周围神经移植物中再生的作用，但这种作用与体外溃变的周围神经相比无明显差异，二者亦无协同作用。
- 武明媚罗娜杨浩焦西英游思维
- 两种不同纯度的嗅鞘细胞在体外存活与生长的比较被引量：2
- 2009年
- 比较80%和50%两种纯度的嗅鞘细胞在体外培养条件下的存活与生长,为嗅鞘细胞体内移植选用最佳纯度提供依据。分离、培养并纯化成年SD大鼠嗅鞘细胞,将纯化的嗅鞘细胞和收集到的贴壁成纤维细胞进行约80%和50%的比例混合后接种,继续培养1d或3d。所有细胞于不同时间点行P75免疫细胞化学荧光染色,以鉴定嗅鞘细胞的初始及其后培养过程中数量和纯度的变化。观察细胞状态,计数细胞总数和P75免疫阳性细胞数目,求得各组嗅鞘细胞数量和纯度并行统计学分析。结果显示:两种不同纯度嗅鞘细胞在培养1d时形态正常,3d时纯度为50%的嗅鞘细胞胞体依然饱满,突起更加纤长,数量和纯度亦无明显下降。而纯度为80%的嗅鞘细胞在培养3d时已出现胞体萎缩和突起变短,数量从1d时每一观察区域内的35±13显著下降为23±5(P=0.02),但纯度未发生明显变化。结果表明50%纯度嗅鞘细胞的存活及生长状态优于80%者,提示细胞体内移植时应考虑选取50%纯度的嗅鞘细胞。
- 王涛杨浩罗娜武明媚焦西英游思维
- 关键词：嗅鞘细胞成纤维细胞细胞培养细胞存活细胞生长
- pH对体外培养成年大鼠嗅鞘细胞存活的影响被引量：1
- 2006年
- 为了研究不同pH培养环境对体外培养大鼠嗅鞘细胞(OECs)存活的影响,本研究采用成年大鼠嗅球培养OECs,培养第8d用S-100免疫组化鉴定纯度后,改用不同pH值(6.8,7.0,7.4,7.8)的DF12培养液继续,在相差显微镜下观察OECs的形态学变化。在不同pH条件下继续培养第3d时采用MTT方法检测不同pH环境中的细胞活力,并用碘化丙啶(PI)和Ho-echst33342荧光双重染色观察细胞死亡率。结果显示:大鼠OECs纯度为(70±4)%;pH7.4组OECs生长旺盛,pH6.8组及pH7.0组OECs生长增殖受到不同程度的抑制,出现死亡细胞;pH7.8组OECs广泛死亡;MTT试验表明,pH7.4组的OD值显著高于其他各pH组。PI/Hoechst33342双重荧光染色显示,在pH6.8、pH7.0和pH7.8组死亡OECs的百分比分别为(27.6±7.8)%、(31.7±7.2)%和(62.3±5.6)%。在pH7.4组未见到死亡的OECs。研究结果表明OECs对酸、碱性环境改变均较敏感,尤其是碱性环境。
- 薛海龙罗娜杨浩沈学锋鞠躬
- 关键词：细胞存活PH值嗅鞘细胞
- 嗅鞘细胞在含Schwann细胞冻融周围神经移植物内的存活及对成年大鼠视神经再生的影响被引量：2
- 2006年
- 为了研究嗅鞘细胞(OECs)在含Schwann细胞(SCs)及预先溃变的冻融周围神经内的存活及对成年大鼠视神经再生的影响,我们将30只动物左视神经眶内断端分别移植冻融周围神经、预溃冻融周围神经、含OECs预溃冻融周围神经、含SCs冻融周围神经或含OECs和SCs冻融周围神经,4周后观察OECs在神经移植物中的存活和分布,计数各组以5%荧光金逆行标记的再生RGCs数量。结果显示,OECs仅存活于含SCs冻融周围神经移植物内,含OECs-SCs冻融周围神经组及含SCs冻融周围神经组视网膜内可见荧光金标记的RGCs,前组再生RGCs均数(346±42)较后组(205±59)显著增高(P<0.05)。这些结果提示预溃冻融周围神经不适宜OECs生存。OECs在含有SCs的冻融周围神经移植物中能够存活,并发挥较单用SCs更强的促进视神经再生的作用。
- 焦文文焦西英罗娜杨浩游思维
- 关键词：轴突再生嗅鞘细胞SCHWANN细胞视网膜神经节细胞
- 移植研究中X-gal染色的影响因素及优化条件被引量：2
- 2002年
- 目的 研究在细胞移植过程中 ,利用X gal染色定位lacZ转基因细胞时 ,消除宿主内源性 β 半乳糖苷酶 (β galactosidase ,β Gal)非特异背景的条件。 方法 分别取成年及新生大小鼠 ,侧脑室注入LacZ转基因神经干细胞C17 2后 ,于两种不同灌注条件下取脑 ,在 5个pH点 ,6个孵育时间点行x Gal染色 ,计数不同条件下海马区非特异性着色细胞数 ,得出X gal染色的最佳条件。 结果 X gal染色中非特异染色随pH增高及孵育时间缩短而减少 ,在pH为 9 5 ,孵育时间为 1h时较为理想。并与宿主的种属 ,年龄有密切关系。 结论 X gal染色必须从动物灌注、pH和孵育时间等诸方面加以优化并设立同种属同年龄的对照才可获得客观可信的结果。
- 张琪孟晋宏罗娜李静雯鞠躬
- 关键词：Β-半乳糖苷酶LACZ基因小鼠
