程蓓
- 作品数：16 被引量：36H指数：3
- 供职机构：武汉大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中澳科技合作特别基金更多>>
- 相关领域：医药卫生机械工程更多>>
- 雌二醇对大鼠血管平滑肌细胞细胞周期和周期相关蛋白的影响被引量：1
- 2005年
- 目的研究17β雌二醇(E2)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)生长的影响。方法应用流式细胞仪检测不同浓度E2在有或无血清刺激下对传代VSMC细胞周期及其相关蛋白Cy-clinD1和CDK4表达的影响。结果在有血清的条件下,E2(1、10、100nmol/L)促进VSMC从G1期向S过渡,其S期细胞比率分别为(31.89±9.14)%、(35.90±4.59)%、(30.77±1.20)%,显著高于对照细胞(21.63±1.80)%(P<0.05),并伴随CyclinD1和CDK4蛋白表达量的显著增高;而在无血清的环境中,高浓度(10、100nmol/L)E2则抑制VSMC增殖,其S期细胞比率分别为(9.93±1.43)%、(8.76±1.80)%,显著低于对照细胞(16.58±3.04)%(P<0.05),且伴随Cy-clinD1和CDK4蛋白表达量降低。结论E2在有或无血清条件下分别对VSMC增殖起促进或阻滞作用,其机制可能是通过影响CyclinD1和CDK4蛋白的表达而作用于VSMCG1期。
- 阳朝晖宋健程蓓程邦昌陈锡昌
- 关键词：细胞周期CDK4蛋白S期细胞比率VSMC增殖G1期
- 免疫组化和蛋白质印迹中抗原-抗体反应方法的改进被引量：3
- 2007年
- 王乔程蓓潘伯群宋健
- 关键词：抗原-抗体反应蛋白质印迹免疫组化BLOTTING特异性免疫反应蛋白表达
- 共聚焦激光扫描显微镜扫描步距与三维重建质量的关系被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨用共聚焦激光扫描显微镜对厚样本进行光学断层时 ,扫描步距对三维重建的质量影响。方法 用醛处理法诱导大鼠主动脉弹性纤维产生强自发荧光 ,在共聚焦激光扫描显微镜下对主动脉壁进行全层光学断层。分析扫描步距等参数变化对内弹性膜构筑三维重建质量的影响。结果 ①探测针孔直径等于 1个爱俐斑单位且满足离开焦点 1/ 2Z 轴分辨率距离时 ,焦平面最强荧光信号减弱 5 0 % ,此条件下获得的二维光学切片分辨率和信息的完整性达最佳平衡。②在上述条件下 ,扫描步距等于Z 轴分辨率时 ,重建结构信息完整 ;扫描步距小于Z 轴分辨率时 ,原位重建结构的信号被人为加强 ,旋转重建结构出现重影 ;扫描步距大于Z 轴分辨率时 ,重建结构出现出现信息损失。结论 以Z轴分辨率为扫描步距进行光学断层和重建 ,可获得分辨率、信息完整性和信息不重叠性达最佳三维重建效果。
- 陈燕张向阳程蓓
- 关键词：共聚焦激光扫描显微镜三维重建主动脉
- 17β雌二醇对大鼠血管平滑肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响被引量：1
- 2005年
- 目的研究17β雌二醇(E2)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的影响及其可能机制。方法应用流式细胞术检测不同浓度E2(0-100nmol/L)在有或无血清状态下对传代VSMC凋亡及其相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响;并采用免疫荧光染色和共聚焦激光扫描荧光显微镜术对Bax的分布进行定位。结果在有或无血清条件下,当浓度达到10nmol/L以上时,E2引起VSMCBax蛋白表达上升及Bax/Bcl-2比值的改变,并促进VSMC凋亡。这一效应有随E2剂量和作用时间增高的趋势。结论E2可通过上调Bax蛋白表达而诱导VSMC凋亡。
- 阳朝晖宋健万瑜程蓓程邦昌陈锡昌
- 关键词：雌二醇平滑肌细胞细胞凋亡BAX
- 共聚焦激光扫描显微镜对厚样本光学断层及其三维重建被引量：3
- 2005年
- 目的:探讨共聚焦系统各参数对厚样本光学断层、三维重建的影响。方法:用共聚焦系统对醛诱导后的大鼠主动脉作光学断层。分析激光强度、探测针孔直径、扫描步距等参数对内弹性膜三维重建的影响。结果和结论:(1)针孔为1Airy单位,调整激光强度以满足离开焦点1/2Z-轴分辨率距离时,焦平面最强荧光信号减弱50%,此条件下获得的光学切片分辨率和信息完整性达最佳平衡,切片厚度可经验地定视为等于系统Z轴分辨率。(2)在上述条件下,扫描步距为Z轴分辨率时,重建结构完整。(3)当扫描步距不变,针孔小于1Airy单位时,重建结构部分缺损;针孔大1Airy单位时,重建结构模糊。(4)样本经透明处理后,断层深度可增大4倍。
- 陈燕宋健汪浩程蓓潘伯群
- 关键词：共聚焦激光扫描显微镜三维重建分辨率针孔主动脉光信号
- G蛋白偶联雌激素受体介导17β-雌二醇抗血管平滑肌细胞氧化应激性衰老被引量：5
- 2017年
- 目的探讨G蛋白偶联雌激素受体(GPER)能否介导雌激素抗大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)氧化应激性衰老效应。方法取体外培养第3~4代VSMCs,以150μmol/L H_2O_2处理2h建立细胞衰老模型。用10^(-8)mol/L17β-雌二醇(E_2)、10^(-6)mol/LGPER激动剂G1和抑制剂G15分别处理VSMCs。衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色法检测各组细胞SA-β-Gal染色阳性率;流式细胞术检测各组细胞周期变化;RT-qPCR和Western blot检测GPERmRNA和蛋白表达变化。结果 H_2O_2使VSMCs SA-β-Gal染色阳性率明显增加,细胞周期停滞于G0/G1期,GPER mRNA和蛋白水平降低,E2和G1对H_2O_2的这些效应具有抑制作用,而G15可阻断E2和G1对H_2O_2上述效应的抑制作用。结论雌激素依赖GPER发挥抗血管平滑肌细胞氧化应激性衰老效应。
- 崔银芳程蓓
- 关键词：雌激素血管平滑肌细胞衰老
- 雌二醇通过雌激素受体α介导调控Cyclin D1在小鼠前列腺平滑肌细胞中的表达
- 2011年
- 目的观察雌激素受体OL（ERα）在17β-雌二醇（E2）促进小鼠前列腺平滑肌细胞（PSMC）增殖中的作用，探讨E2对PSMC的作用机制。方法构建pGSadeno—ERα腺病毒载体，体外转染原代培养的小鼠前列腺平滑肌细胞（PSMC），将实验细胞分组：实验组；ERα基因下调组，细胞转染ERα干扰序列腺病毒；阴性对照组，细胞转染无义序列腺病毒；正常对照组，正常的小鼠PSMC。各组分别加入1×10^-8mol／L E2，72h后流式细胞仪检测细胞增殖，Western blot检测细胞内Cyclin D1基因表达。结果E2作用细胞72h后，实验组细胞G0／G1期的比率（71．76±1．78）％显著高于阴性对照组（51．73±1．86）％和正常对照组（47．90±0．79）％，差异有统计学意义（P〈0．05）；相对应的PI值：实验组（28．24±1．78）显著低于阴性对照组（47．27±1．86）和正常对照组（52．10±0．79）比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；实验组细胞内CyclinD1基因表达水平显著低于对照组。结论雌激素在对前列腺平滑肌细胞的生物学效应中，通过雌激素受体α 的介导调控了细胞周期素CyclinD1的表达，从而促进细胞的增殖。
- 周大为李世文王行环程蓓丁协刚
- 关键词：雌激素RNA干扰雌激素受体Α
- 培养血管平滑肌细胞收缩蛋白表达与表现型转变及细胞增殖的关系被引量：2
- 2004年
- 目的 探讨体外血管平滑肌细胞 (SMC)的失分化与其表现型转变及增殖的关系。 方法 采用电镜形态定量及蛋白印迹 (Westerblot)方法检测家兔主动脉SMC在原代培养过程中肌丝体密度及收缩蛋白表达的动态变化 ,并分析这些变化与细胞增殖状态的关系。 结果 根据对细胞生长曲线的分析 ,原代培养SMC的增殖可分为 3个阶段 ,即潜伏期 (第 1～ 6d)、对数增殖期 (第 6～ 12d之间 )和增殖后静止期 (第 12d以后 )。电镜定量显示 ,胞质中肌丝的体积密度均值由培养前的 (32 14± 1 4 4 ) %下降至潜伏期末的 (18 36± 2 0 1) % (P <0 0 5 ) ;然后逐渐增高 ,到细胞进入增殖后静止期第 3d恢复至培养前水平 [(32 5 0± 1 2 1) % ;与培养前相比 ,P >0 0 5 ]。Westernblot分析显示 ,培养过程中平滑肌特异型收缩蛋白 ,如α SM肌动蛋白、SM肌球蛋白重链随培养时间逐渐降低 ,其中作为血管SMC成熟标志的SM肌球蛋白重链亚型 2在培养第 9d后消失 ;而非肌细胞型收缩蛋白 ,β NM肌动蛋白则随培养时间逐渐增高。上述蛋白含量的变化不随细胞增殖状态及肌丝的消涨而波动。 结论 体外培养血管SMC的表现型转变和失分化是两个相对独立的过程。前者与SMC的增殖状态密切相关 ,可能是肌丝系统为适应细胞分裂而发生的可逆性重组 ;而?
- 宋健程蓓万瑜陈燕刘维新胡成俊陈锡昌
- 关键词：平滑肌细胞收缩蛋白细胞增殖
- 雌/雄激素比例变化对大鼠前列腺基质细胞增殖和凋亡的影响被引量：10
- 2012年
- 目的:探讨雌/雄激素比例变化对前列腺基质细胞增殖和凋亡及雌激素受体表达的影响。方法:体外培养大鼠前列腺基质细胞,加入不同比例雌激素和雄激素,采用MTT法检测细胞增殖,以流式细胞术检测细胞凋亡,以细胞免疫荧光法检测雌激素受体亚型(ERα,ERβ)的表达。结果:雌激素(雌二醇,E2)和雄激素(双氢睾酮,DHT)联合应用时,可以促进基质细胞增殖,高比例的雌/雄激素可使基质细胞增殖增加(P<0.05)及凋亡减弱(P<0.05),且可以上调ERα的表达(P<0.05)。结论:雌/雄激素比例升高使雌激素的促增殖作用增强而促凋亡作用减弱,这种作用是通过上调ERα的表达实现的。
- 陈金海胡万里程蓓
- 关键词：良性前列腺增生症前列腺基质细胞雌激素受体增殖凋亡
- 腺苷预处理对培养大鼠心肌细胞“缺血-再灌注”性膜损伤的影响
- 2002年
- 目的 探讨腺苷预处理对缺血 再灌注心肌细胞膜损伤的保护作用。方法 将培养 5天的SD乳鼠心肌细胞随机分成 4组 :正常组 :常规条件下 (DMEM培养基及 95 %空气 +5 %CO2 气体环境 )培养 5 0min ;拟缺血 /再灌注组 :先在缺糖缺氧条件下 (无糖Eagle培养基及 95 %N2 +5 %CO2 气体环境 )培养 30min ,再恢复常规条件培养 2 0min ;拟缺血预处理组 :先缺糖缺氧培养 5min ,再复氧复糖培养 5min ,反复 3次后按模拟缺血 /再灌注组操作 ;腺苷预处理组 :用含腺苷 (0 .15 g/L)培养液在常规条件下培养 10min ,再作拟缺血 /再灌注组处理。扫描电镜下观察各组细胞的变化 ,并用胶体苯胺染色及Ridit分析法对PLA活性进行半定量。结果 与正常组比较 ,模拟缺血 /再灌注组细胞的质膜和线粒体的结构损伤严重 ,PLA活性显著性增强。而模拟缺血预处理和腺苷预处理组细胞质膜和线粒体损伤较轻 ,PLA活性显著低于拟缺血 /再灌注组。结论 腺苷预处理对“缺血 再灌注”损伤心肌的细胞膜有保护作用 ,其机制可能与腺苷直接或间接地抑制PLA活性 ,增强质膜的稳定性有关。
- 程蓓张友云陈锡昌袁玉林冯晓祥雷岳山
- 关键词：腺苷缺血-再灌注心肌细胞磷脂酶A
