王青山
- 作品数：3 被引量：16H指数：3
- 供职机构：南开大学医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划天津市应用基础与前沿技术研究计划全球变化研究国家重大科学研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IL-6对M1型巨噬细胞向肿瘤相关M2型巨噬细胞转化过程的诱导作用被引量：8
- 2009年
- 目的共培养小鼠M1型巨噬细胞RAW264·7与乳腺癌细胞4T1,观察白介素6(IL-6)在M1型巨噬细胞向肿瘤相关M2型巨噬细胞转化过程中的作用。方法实验共分为以下3组:A组(4T1细胞),B组(RAW264·7细胞),C组(RAW264·7与4T1以1∶4比例混合培养)。流式细胞技术检测M2型巨噬细胞比例,随后加入IL-6特异性抑制剂激活素A(ACTA,25μg/ml)或重组IL-6(rIL-6,10μg/ml)后再行检测。RT-PCR检测M1、M2型巨噬细胞功能相关细胞因子及IL-6、IL-6Rα的mRNA表达量。ELISA法检测3组细胞上清中IL-6的含量,随后改变两种细胞的混合比例后再行检测。结果RAW264·7和4T1细胞共培养后,M2型巨噬细胞比例显著增加,添加ACTA后该比例显著下降,而添加rIL-6后该比例增加。与B组比较,C组的M2型巨噬细胞相关细胞因子(CCL22、CCL2、YM1、PDGF-c、HIMP、MMP-9、IL-10)mRNA表达水平明显增高,M1型巨噬细胞相关因子(IL-12、IL-15、IL-18)mRNA表达水平明显降低。IL-6mRNA在A组呈微量表达,在B组无表达,在C组表达明显增高,而IL-6RαmRNA在3组中均呈高表达。与A、B组比较,C组细胞上清液中IL-6含量明显增加(P均<0·05);以不同比例将两种细胞混合后发现RAW264·7细胞数量的改变显著影响了共培养细胞上清中IL-6的水平。结论将4T1和RAW264·7细胞共培养后,前者能促进后者分泌IL-6,并诱导其向肿瘤相关M2型巨噬细胞转化。IL-6在转化过程中发挥重要作用,阻断其作用可以遏制转化。
- 王青山倪虹魏晓丽李玉皓向荣王悦
- 关键词：巨噬细胞白细胞介素6细胞转化肿瘤
- EL4细胞STAT4沉默前后培养上清对小鼠肿瘤生长的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨沉默小鼠T淋巴瘤细胞(EL4细胞)信号转导和转录激活因子4(STAT4)前后,其改变的培养上清液成分对H22肝癌荷瘤小鼠腹水生长及个体生存状况的影响。方法:应用ELISA方法检测肿瘤细胞STAT4沉默后培养上清液中白介素(IL)-10水平;将H22肝癌荷瘤小鼠随机分为STAT4(+)组、STAT4(-)组、IL-10组、培养基组,分别腹腔注射STAT4沉默前、后培养细胞上清液,IL-10,1640培养基,检测荷瘤小鼠体质量、腹围、腹水、生存率及腹水瘤细胞存活等指标;RT-PCR半定量检测荷瘤小鼠脾细胞的Foxp3mRNA表达。结果:STAT4沉默后培养细胞上清液IL-10水平明显增高;用不同的培养上清液成分注射后STAT4(-)组体质量增长率较STAT4(+)组显著降低,与培养基组各指标比较差异无统计学意义;15d内生存率比较,STAT4(-)组显著高于STAT4(+)组、IL-10组;STAT4(-)组脾细胞Foxp3表达水平高于其他3组。结论:STAT4沉默后培养细胞上清液局部注射荷瘤小鼠,能抑制癌性腹水增长,显著提高存活率,但脾细胞Foxp3mRNA水平明显增高,可抑制荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫,这与近期观察到的结果相悖。
- 魏敏南英杨松陈名珍魏晓丽王青山李玉皓向荣王悦
- 关键词：DNA结合蛋白质类
- 探讨沉默信号转导与转录激活因子-4及细胞因子信号负调控因子-3对辅助性T细胞分化的影响被引量：5
- 2009年
- 目的探讨沉默信号转导与转录激活因子_4（STAT4）及细胞因子信号负调控因子-3（SOCS3）后对白细胞介素（IL）-12及IL4诱导的辅助性T（Th）淋巴细胞分化中的影响以及对于Th1及Th2细胞亚群分泌细胞因子的影响。方法以IL-12和IL-4分别诱导初始Th细胞（Th0细胞）分化为Th1或Th2细胞；通过RNA干扰技术分别沉默Th0，Th1和Th2细胞中的STAT4和SOCS3的表达，然后继续给予相应的IL-12或IL4刺激培养细胞。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和酶联免疫吸附分析（ELISA）分别检测Th1／Th2特异性细胞因子的mRNA及蛋白质的变化，通过比较沉默前后Th1／Th2细胞特异性细胞因子量的变化以评价沉默STAT4或SOCS3对于Th0细胞分化方向的影响以及对Th1／Th2细胞分泌细胞因子的影响。结果沉默STAT4使Th0和Th1细胞的Th1型细胞因子明显减少，而Th0和Th2细胞的Th2型细胞因子增多；沉默SOCS3后，Th0，Th1和Th2细胞的Th1及Th2型细胞因子均无明显改变。结论STAT4介导IL-12诱导的Th1分化、维持Th1细胞分泌细胞因子，并推测其可能具有直接抑制Th2分化的作用；而SOCS3在IL-12及IL4诱导的Th0细胞分化中不具有关键性作用。
- 孙蕾魏晓丽王青山郑慧琳向荣王悦
- 关键词：辅助性T细胞细胞分化转录激活因子
