王森
- 作品数：25 被引量：36H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- IL-37基因启动子的克隆及其荧光素酶报告基因载体的构建被引量：3
- 2015年
- [目的]克隆白介素-37(IL-37)基因启动子,构建其荧光素酶报告基因载体,并分析活性。[方法]用PCR方法扩增IL-37基因5'端上游区3个不同长度的启动子片段,分别克隆入荧光素酶报告基因载体p GL3,构建IL-37基因启动子荧光素酶报告基因质粒。将所构建的质粒转染HEK-293细胞,通过双荧光素酶报告基因系统分析启动子的转录活性。[结果]754、1 017、2 043 bp等3个IL-37启动子片段正确亚克隆入荧光素酶报告基因载体,重组质粒转染HEK-293细胞后,双荧光素酶活性分析显示1 017 bp的启动子片段具有较强转录活性,约为对照组(空载体p GL3-basic)的10.9倍。[结论]成功克隆IL-37基因启动子,构建了大小为1 017 bp的IL-37基因启动子荧光素酶报告基因载体,为IL-37表达的调控机制的研究提供有效的工具。
- 朱建冬梁庄严王森侯为烨邓小红陈章权
- 关键词：启动子荧光素酶报告基因
- IL-37b基因克隆及其真核的表达载体构建被引量：2
- 2013年
- 目的克隆IL-37b编码区基因,并构建其真核表达载体。方法通过RT-PCR扩增IL-37b编码区基因,DNA测序鉴定后,将阳性克隆提取质粒,通过酶切连接将目的片段定向克隆至真核表达载体pcDNA 3.1,通过菌落PCR和DNA测序等进行鉴定。结果凝胶电泳显示RT-PCR扩增出1条大小约650 bp特异条带,DNA测序结果显示获取了大小为654 bp的IL-37b编码区基因。PCR和DNA测序对所构建的真核表达载体鉴定结果表明IL-37b编码区基因正确插入真核表达载体pcDNA3.1。结论成功克隆了IL-37b编码区基因,并成功构建其真核表达载体,为下一步IL-37b生物学作用的深入研究奠定了基础。
- 何玲鸽赵付前林妙芬祝惠钦王森陈章权
- 关键词：基因克隆真核表达载体
- 缺氧微环境下TRPC3促进U87MG胶质瘤细胞的增殖
- 2016年
- 目的:探讨缺氧微环境下瞬时感应性C通道3(transient receptor potential canonical channels 3,TRPC3)对U87MG胶质瘤细胞增殖的影响。方法:缺氧建立缺氧模型,以阻断剂抑制通道开放,以RNA干扰技术下调TRPC3的表达;CCK-8检测胶质瘤细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期。结果:缺氧条件下TRPC1通道阻断剂及表达下调均可显著抑制U87MG细胞增殖,并引起G1期周期的阻滞。结论:缺氧微环境下TRPC3促进U87MG胶质瘤细胞的增殖。
- 张贺王森欧阳平
- 关键词：缺氧增殖胶质瘤
- IL-37融合EGFP真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达被引量：3
- 2015年
- 目的:构建白介素-37(interleukin-37,IL-37)与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合基因真核表达载体,并检测其在293T细胞中的表达。方法 :通过PCR分别扩增出IL-37和EGFP基因,经酶切和测序鉴定正确后,克隆入真核表达载体pc DNA3.1,用Linker(G4S)3连接2个目的基因片段,构建IL-37-GFP融合基因真核表达质粒pc DNA3.1/IL-37-EGFP,将其转染到293T细胞中,观察荧光产生情况,用实时荧光定量RT-PCR和Western blot检测IL-37的表达情况。结果:经酶切和测序鉴定,由linker连接的IL-37-GFP融合基因正确克隆入表达载体pc DNA3.1,重组表达质粒pc DNA3.1/IL-37-EGFP转染293T细胞后,用荧光显微镜检测显示荧光蛋白在细胞中表达,RT-PCR与Western blot均检测到高水平IL-37 m RNA和IL-37蛋白的表达。结论:成功构建了IL-37-融合报告基因EGFP的真核表达载体,并在293T细胞中得到了有效表达,为进一步研究IL-37的功能和表达调控奠定了实验基础。
- 刘倩梁庄严何素辉王森陈章权
- 关键词：绿色荧光蛋白293T细胞
- RNA干扰信号转导与转录因子3基因对宫颈癌Hela细胞增殖的影响
- 2014年
- 目的:利用RNA干扰技术沉默信号转导与转录因子STAT3的基因表达,检测其对Hela细胞的增殖的影响。方法:本次实验将其分组为Normal Control组(NC组)及siSTAT3组两组。采用脂质体法转染siSTAT3,用Real time PCR检测STAT3的mRNA表达,用Westernblot检测蛋白表达,用CCK-8法检测Hela细胞的增殖。结果:将两组的各项数据进行对比。对转录结果进行对比发现,siSTAT3组中的STAT3 mRNA表达较NC组中的STAT3 mRNA表达下降显著,其下降水平约为70%;对蛋白表达结果进行对比发现,siSTAT3组中的STAT3蛋白表达较NC组中的STAT3蛋白表达下降显著,其下降水平约为53%,上述数据显示,利用RNA干扰技术可成功地干扰了STAT3的基因表达。而siSTAT3组在对Hela细胞增殖的影响方面与NC组相比,其在24h,48h,72h,Hela细胞增殖的抑制率约分别为15.5%,29.4%,30.4%。结论:利用RNA干扰技术沉默信号转导与转录因子STAT3的基因表达可抑制Hela细胞的增殖。
- 王森陈荏槐郑晓璇朱伟姚运红胡新荣
- 关键词：STAT3HELARNA干扰
- 顺铂处理联合STAT3 RNA干扰对宫颈癌细胞增殖的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨顺铂处理联合STAT3 RNA干扰对宫颈癌细胞增殖的影响。方法:实验分为对照组、顺铂组及联合组,联合组采用脂质体法转染STAT3的RNA干扰序列,Real time PCR检测RNA表达,CCK-8细胞增殖检测试剂盒检测细胞增殖。结果:与对照组相比,STAT3 mRNA在RNA干扰后下降约75%,表明成功干扰STAT3的基因表达。对Hela细胞的增殖影响,与对照组相比,细胞增殖抑制率在24 h,48 h,72 h分别为顺铂组:65.1%,72.5%,75.9%,联合组:75.4%,85.6%,89.1%。其中联合组与顺铂组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:顺铂处理联合STAT3 RNA干扰可显著抑制细胞增殖,其作用优于单独顺铂作用。
- 朱伟黎桂仙韩坤尹金宝王森
- 关键词：顺铂STAT3RNA干扰宫颈癌
- Snail促进鼻咽癌EMT、侵袭和转移的初步研究
- 目的 初步探讨EMT关键转录因子Snail对鼻咽癌EMT、侵袭和转移的影响。方法 用免疫组化技术检测Snail及EMT的标志蛋白E-cad在慢性鼻咽炎(34例)、未转移鼻咽癌(32例)和已转移鼻咽癌(33例)组织中的表达...
- 陈泓臻雍伟伟孙丽萍安位芳康海仙王森姚运红胡新荣
- 真核翻译起始因子4E对宫颈癌细胞增殖迁移的作用研究
- 2014年
- 目的:探讨eIF4E对宫颈癌细胞增殖迁移的调控作用。方法:eIF4E表达质粒转染C33a细胞。Real-time PCR检测eIF4E mRNA表达,CCK-8法、Transwell实验分别检测细胞增殖以及迁移。结果:eIF4E质粒转染C33a细胞后,eIF4E的mRNA表达水平升高约52%(P<0.01),细胞增殖中与NC组相比,eIF4E组细胞增殖在24h、48h、72h分别增加了20.2%、67.7%、54.3%(P<0.05)。而细胞侵袭数目在24h、48h、72h分别增加了23.7%、35.7%、42.7%(P<0.05)。结论:eIF4E能够促进宫颈癌C33a的增殖侵袭能力,是宫颈癌防治的潜在靶点。
- 王森高敏庞天云姚运红胡新荣
- 关键词：宫颈癌
- 五味子多糖在动物体内抗肿瘤作用的实验研究被引量：2
- 2014年
- 目的深入研究五味子多糖(SCP)在荷瘤小鼠内提高红细胞结构稳定性和免疫吸附功能以及调节免疫红细胞抗肿瘤机制的效果。方法选购来自黑龙江中医药大学实验室中心的荷瘤小鼠60只,S180瘤株均来自肿瘤医院。将这些小鼠随机分成六组,常规组、生理盐水组、环磷酰胺(CP)组、SCP高、中、低三种不同剂量组。使用药物7天后,从眼球取血,获得红细胞悬液。结果相较于生理盐水组来说,各种剂量的五味子多糖都能使荷瘤小鼠体内红细胞钙离子浓度下降,P<0.01,具有显著的统计学差异;并且高剂量的五味子多糖能增强红细胞膜的流动性,并可以提升S180荷瘤鼠免疫吸附肿瘤细胞能力,P<0.05,具有统计学差异。结论五味子多糖能改善荷瘤小鼠体内红细胞膜的状态,使红细胞膜的稳定性以及吸附肿瘤细胞的能力得到提升,进而达到抗肿瘤的目的。
- 姜恩平王卓王森朱伟康海仙
- 关键词：五味子多糖红细胞小鼠抗肿瘤药物
- 真核翻译起始因子5A2(eIF5A2)表达载体的构建与鉴定
- 2014年
- 目的:构建真核翻译起始因子5A2(eIF5A2)真核表达载体。方法:PCR扩增eIF5A2片段,通过酶切连接将目的片段定向克隆至真核表达载体pIRES2-eGFP的多克隆位点,菌落PCR、质粒PCR及DNA测序对质粒进行鉴定。结果:菌落PCR、质粒PCR及DNA测序鉴定结果均表明载体构建正确。结论:成功构建了真核表达载体,并且命名为pIRES2-5A2,为下一步eIF5A2基因在人类肿瘤中作用的研究奠定了基础。
- 陈泓臻陈荏槐王森姚运红胡新荣朱伟
- 关键词：结肠癌真核表达载体
