王晓光
- 作品数：3 被引量：19H指数：2
- 供职机构：中国农业大学食品科学与营养工程学院食品生物技术实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- ABA处理不同成熟时期番茄果实中ACS和ACO家族基因的表达
- 2009年
- 番茄果实的成熟是由多基因精细调控的一个过程。其中作为重要的植物激素,乙烯和ABA又与成熟过程密切相关。在乙烯合成途径中,ACS和ACO两个基因家族起着非常重要的作用。而ABA与乙烯在植物成熟衰老过程中的相互作用也开始成为研究热点。采用真空渗透技术对不同时期的番茄果实(未熟、绿熟、破色)进行ABA渗透处理。然后根据处理4h(4hpi)和24h(24hpi)后的果实乙烯生成情况,确定处理后4h为基因表达测定时间。最后利用实时定量PCR技术,对3个不同成熟时期番茄果实中的ACS(LeACS1A,LeACS2,LeACS4和LeACS6)和ACO(LeACO1,LeACO3,LeACO4和LeACO6)进行基因表达测定。
- 王晓光李玲王晓辉马远征朱本忠
- 关键词：ACSACO乙烯
- 破色期番茄果实均一化cDNA沉默文库的构建和功能基因筛选模型的初步建立被引量：7
- 2009年
- 番茄果实的成熟是由多基因精细调控的一个过程.利用破色期番茄果实,根据复性动力学原理在mRNA水平进行均一化操作使高丰度和低丰度的mRNA丰度接近.然后把均一化之后mRNA反转录得到cDNA,再与基因沉默载体pTRV重组,最后把构建好的载体通过电转化的方法转入到GV3101农杆菌中,从而建立起破色期番茄果实均一化cDNA沉默文库.通过番茄果实中病毒诱导基因沉默技术,对cDNA沉默文库进行初步筛选,从而确定功能基因筛选模型.在模型建立阶段,以番茄红素合成途径相关的PDS基因作为内标基因,在100个混合农杆菌样中,成功筛选到了PDS基因.
- 王晓光马远征王晓辉李玲罗云波朱本忠
- 关键词：CDNA文库功能基因VIGS
- 利用绿色荧光蛋白GFP作为报告基因检测转基因植物被引量：12
- 2008年
- GFP作为报告分子被广泛地运用在转基因植株检测中。利用PCR技术扩增得到番茄Bax inhibitor-1基因(LeBI-1),亚克隆到含GFP基因的pEGFP载体上,进一步将中间载体构建到植物表达载体pBI121上。重组pBI121-LeBI-1-EGFP经农杆菌介导的叶盘转化法转化烟草,分化筛选后获得抗性烟草植株。利用GFP作为报告基因,采用PCRs、outhern blot及荧光方法验证外源基因LeBI-1成功转化到烟草中。分析讨论报告蛋白GFP不同检测方法的优缺点。
- 杨明瑜刘翔褚华硕王晓光朱文华曲桂芹
- 关键词：GFP转基因烟草
