目的探讨肺癌患者痰标本中FH IT、P16、MGMT、RASSF1A和APC等抑癌基因启动子异常甲基化及其联合检测在肺癌筛查及早期诊断中的价值。方法采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法,检测47例肺癌组织及对应的痰标本FHIT、P16,MGMT、RASSF1A和APC基因启动子区甲基化状态。24例肺良性疾病患者痰标本作为对照。结果 47例肺癌组织标本中FHIT、P16、MGMT、RASSF1A、APC基因启动子区甲基化检出率分别为40.4%(19/47)、53.2%(25/47)、36.2%(17/47)、21.3%(10/47)和38.3%(18/47);对照的痰标本中五者甲基化检出率分别为38.3%(18/47)、48.9%(23/47)、36.2%(17/47)、17.0%(8/47)和29.8%(14/47),两组甲基化检出率存在着一致性[P>0.05;κ(0.8～1.0)]。24例肺良性病变痰标本中未检测到任何异常甲基化,与肺癌组比较差异有统计学意义(P<0.05)。五项指标联合检测可明显提高肺癌检测的灵敏度(80.9%)和特异度(100.0%)。FHIT和P16基因痰标本甲基化检出率与患者吸烟指数有相关性(P<0.05)。结论痰标本中多个肺癌相关基因甲基化联合检测有望成为肺癌筛查、早期诊断简便有效的指标。
目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源的外泌体(exosome)对小鼠乳腺癌细胞4T1增殖、侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法将小鼠乳腺癌细胞4T1随机分为3组,4T1+vehicle组仅加入400μL无血清培养基,4T1+exosome组加入400μL由无血清培养基配置的exosome,4T1+exosome+磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt信号通路阻断剂(Y294002)组加入400μL终浓度为5μmol/m L Y294002及400μg/m L exosome的培养基。分别采用MTT法、细胞划痕实验、Western blotting法检测各组细胞增殖、迁移和侵袭能力以及PI3K/Akt信号通路相关蛋白。结果 4T1+exosome组、4T1+vehicle组、4T1+exosome+Y294002组细胞增殖抑制率分别为0.713%±0.050%、0.401%±0.030%、0.459%±0.800%,4T1+exosome组分别与4T1+vehicle组、4T1+exosome+Y294002组比较,P均<0.05。4T1+exosome组、4T1+vehicle组、4T1+exosome+Y294002组细胞迁移距离分别为(388.0±36.1)、(295.0±34.2)、(275.0±63.5)μm,4T1+exosome组分别与4T1+vehicle组、4T1+exosome+Y294002组比较,P均<0.05。4T1+exosome组p-AKT、β-catenin OD值分别为0.30±0.11、0.30±0.08,4T1+vehicle组分别为1.10±0.41、0.70±0.08,4T1+exosome+Y294002组分别为0.40±0.13、0.30±0.07,4T1+exosome组分别与4T1+vehicle组、4T1+exosome+Y294002组比较,P均<0.05。结论 BMSCs来源的exosome能够增加小鼠乳腺癌细胞4T1的增殖、迁移及侵袭能力,其机制可能与上调PI3K/Akt信号通路有关。
