洪鲲
- 作品数:45 被引量:142H指数:7
- 供职机构:贵州师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:长江学者和创新团队发展计划贵州省农业攻关项目贵州省科技创新人才团队建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 贵州辣椒烟草花叶病毒的分子鉴定被引量:1
- 2015年
- 为有效控制贵州辣椒的病毒,采用生物学单斑分离法对酶联免疫吸附(ELISA)检测烟草花叶病毒为阳性的贵州辣椒病毒分离物(TMV-GZ)进行纯化。RT-PCR技术克隆其外壳蛋白(CP)基因并测序,使用DNAMAN7.0和MEGA5.0软件对TMV-GZ的CP基因进行序列同源性分析。结果表明:成功克隆该病毒分离物的CP基因,其序列长度为480bp,编码159个氨基酸残基;该分离物的CP基因与11种已报道的TMV各地分离物同源性均在98%以上,而与其他3种同属不同种的病毒同源性均低于65%。贵州辣椒感染的病毒为TMV。
- 万晴姣张晓霞李欲轲乙引张冬林洪鲲
- 关键词:烟草花叶病毒外壳蛋白分子鉴定辣椒
- 褐飞虱唾液分泌物中细菌多样性的初步分析被引量:2
- 2014年
- 褐飞虱是我国水稻生产中的重要害虫,其唾液在取食过程中起着重要的作用。在笔者的前期研究中发现,褐飞虱在取食时会分泌凝胶状唾液和水溶性唾液。笔者收集了褐飞虱的水溶性唾液分泌物,通过建立16S ribosomal DNA(rDNA)文库检测了唾液分泌物中的微生物组成,共发现6种细菌,它们都属于变形菌门,其中属于γ变形菌亚门、β变形菌亚门的分别有4种、2种。此外研究还对褐飞虱取食后残留在水稻叶鞘中的口针鞘内部进行了透射电镜观察,发现在口针鞘内部和周围都有微生物的存在。研究结果可为进一步认识褐飞虱的取食行为以及褐飞虱体内的细菌型共生菌的生物学特性提供参考和依据。
- 唐明徐小蓉洪鲲乙引
- 关键词:褐飞虱细菌多样性
- 白术种子萌发率快速测定方法及萌发适宜条件的研究被引量:4
- 2014年
- 采用TTC法测定白术(Atractylodes macrocephda Koidz)种子的生活力,纸床法测定其发芽率,浸种法测定其吸水率,通过研究不同温度、浸种时间和光照时间对白术种子萌发的影响,探讨其萌发适宜条件.结果表明,白术种子的生活力与发芽率具有显著相关性,其相关系数r为0.970,回归方程为y=0.856X-10.607.浸种12h时,白术种子吸水达到饱和.白术种子萌发的适宜条件为浸种12h、温度20~25℃、全黑暗培养.
- 田静龚宁乙引洪鲲王菊
- 关键词:生活力吸水率萌发条件
- 紫杉醇和Cephalomannine的简易分离法被引量:2
- 2001年
- 提出了在常温常压下用硅胶吸附柱层析分离紫杉醇和Cephalomannine的方法。径高比为 5∶10 0 ,样品量 /吸附剂为 1∶80 ,洗脱系统由石油醚和乙酸乙酯组成 ,分离度可达 80 %。
- 洪鲲洪化鹏
- 关键词:分离度硅胶
- 乙醇提取及重结晶法制备辣椒总碱被引量:2
- 2014年
- 为了建立从辣椒中提取并通过重结晶获得高纯度辣椒总碱的方法,以花溪朝天椒干粉为原料,采用单因素试验考察了有机溶剂提取法中乙醇浓度和固液比等对提取率的影响,摸索了后续纯化过程中碱溶解-乙酯萃取辣椒碱的最适pH和辣椒碱的结晶条件。结果表明:用95%乙醇、1:10(m/V)的固液比、80℃回流2 h,可达到3.7 mg/g(辣椒总碱/辣椒粉)的提取率;在pH 9.0时用乙酸乙酯萃取辣椒碱的NaOH皂化液可获得较高的辣椒碱纯度和回收率;在实验条件下,该萃取物在甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿及石油醚等溶剂中均未结晶,而在乙醚中于-20℃重结晶3次得到纯度为96.4%(HPLC法测定)的辣椒总碱,达到美国药典24版(USP24)中的相关要求。
- 龚记熠王希杨立昌乙引洪鲲
- 关键词:重结晶HPLC
- 褐飞虱体内细菌型共生菌的分布被引量:2
- 2014年
- 为弄清褐飞虱体内细菌型共生菌的分布状况,采用荧光原位杂交(FISH)技术,用Cy5标记真细菌16Sribosomal DNA(rDNA)的通用探针eub338和non338对细菌型共生菌在褐飞虱体内的分布进行了检测。结果表明:在褐飞虱虫体腹部、产卵管附近以及中场组织附近均检测到Cy5荧光信号和微弱的自发荧光信号,而反义探针non338在这些部位均未检测到Cy5的荧光信号,只检测到自发荧光信号。
- 唐明徐小蓉洪鲲乙引
- 关键词:褐飞虱共生菌荧光原位杂交SITUHYBRIDIZATION
- 贵州辣椒轻斑驳病毒分离物的分子鉴定被引量:16
- 2013年
- 为了对贵州辣椒轻斑驳病毒分离物进行分子鉴定,采用生物学方法对ELISA检测为阳性的辣椒轻斑驳病毒贵州分离物(PMMoV-GZ)进行纯化,以RT-PCR技术克隆其外壳蛋白(CP)基因并测序,使用DNAstar和MEGA5.0软件对PMMoV-GZ的CP基因进行同源性分析。结果表明:成功克隆了该病毒分离物的CP基因(474bp),该基因编码157个氨基酸残基;同源性分析显示,该分离物的CP基因及相应的氨基酸序列与11种已报道的PMMoV各地分离物的同源性均在95%以上,而其基因序列与6种同属的其它病毒同源性低于60%。证明该病毒分离物为辣椒轻斑驳病毒(PMMoV)。
- 郑兴华洪鲲杨立昌乙引万晴姣
- 关键词:辣椒分离物外壳蛋白分子鉴定
- 建兰花叶病毒RdRp基因的原核表达及多克隆抗体制备被引量:2
- 2017年
- 采用RT-PCR技术扩增出建兰花叶病毒贵州分离物(CyMV-GZ)的依赖RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)基因保守序列。测序结果表明:该RdRp基因序列长735 bp,编码245个氨基酸残基。构建原核表达载体pET32a(+)-RdRp,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在37℃以0.3 mmol·L^(-1) IPTG诱导表达分子量约49 kDa重组蛋白。以该重组蛋白为抗原免疫小鼠,制备的抗体效价达1∶204 800。间接ELISA检测显示该多抗与CyMV病叶汁发生特异性免疫反应,而与其他6种同属或不同属病毒叶汁无血清学交叉反应。本实验为进一步研究RdRp的功能以及从分子水平上探讨该病毒的致病机制奠定了基础。
- 万晴姣吴正强李欲轲乙引龚记熠刘倩洪鲲
- 关键词:建兰花叶病毒RDRP原核表达多克隆抗体
- 一种制备含量95%以上石斛碱的方法
- 本发明公开了一种制备含量95%以上石斛碱的方法,步骤为:取一定量金钗石斛茎段,加入乙醇溶液回流提取,再次加入乙醇溶液回流提取,合并提取液并浓缩得膏状提取物;对所述膏状提取物加入HCl溶液搅拌提取石斛碱,并沥出得到HCl提...
- 洪鲲乙引张宇斌张习敏
- 文献传递
- 一种生产白术脱毒苗的方法
- 一种生产白术脱毒苗的方法,包括1.白术种子的预处理及其胚的无菌萌发:将白术胚接种于初代培养基中:1/2MS+蔗糖20g/L+琼脂粉6g/L;2.增殖培养:增殖培养基为:MS+1.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+...
- 薛兴华龚宁田静乙引赵霰霖洪鲲
- 文献传递