毕富勇
- 作品数：61 被引量：221H指数：7
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- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- CD40基因多态性与Graves病的相关性研究被引量：3
- 2007年
- 目的:观察CD40基因启动子区多态性在中国汉族人群中的分布频率及其与Graves病易感性的关系。方法:应用聚合酶链反应-直接测序法对367例Graves病患者和373例正常对照者CD40基因启动子区多态性进行检测,分析该基因多态性与Graves病的相关性。结果:中国汉族人群CD40基因启动子区存在两处变异:-295C/T和-1C/T,两位点紧密连锁,D′=0.98。两位点基因型、等位基因型和单倍型分布频率在病例-对照比较中均无统计学差异。但在女性人群中,-295T和-1C与Graves病有明显关联,P值分别为0.025和0.011;单倍型CT在女性病例组和对照组的频率分别为36%和44%,P=0.007。结论:CD40基因启动子区多态性可能与女性Graves病发病有关,但与男性Graves病发病无关。
- 孙玲玲褚迅黄薇毕富勇
- 关键词：格雷夫斯病单核苷酸多态性
- 白血病Reh、HL-60、K562细胞系RUNX3基因P2启动子甲基化状态与RUNX3基因表达被引量：1
- 2011年
- 目的:研究人白血病Reh、HL-60与K562细胞系RUNX3基因P2启动子甲基化状态及RUNX3基因的表达,分析P2启动子甲基化与基因表达之间的关系。方法:运用甲基化特异性PCR(MSP)和RT-PCR检测Reh、HL-60与K562细胞系RUNX3基因P2启动子的甲基化状态及RUNX3基因的表达。结果:Reh及K562细胞系RUNX3基因P2启动子甲基化特异性扩增呈阳性,非甲基化特异性扩增呈阴性,RT-PCR扩增呈阴性;而HL-60细胞系相反,甲基化特异性扩增呈阴性,而非甲基化特异性扩增呈阳性,RT-PCR扩增阳性。结论:Reh及K562细胞中存在RUNX3基因P2启动子的甲基化,且在不同类型白血病细胞系中的甲基化状态不同。
- 李大彩吴明彩张根葆毕富勇
- 关键词：白血病甲基化特异性PCR
- 表没食子儿茶素没食子酸酯对Reh细胞增殖及RUNX3基因甲基化状态的影响
- 2012年
- 目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对白血病细胞系Reh细胞增殖抑制作用及对RUNX3基因启动子区甲基化状态及表达的影响,探讨Reh细胞RUNX3基因的失活机制及EGCG对RUNX3基因表达的调控。方法:体外培养Reh细胞,用5、10、15和20μg/mL EGCG与Reh细胞孵育,采用MTT法检测EGCG对Reh细胞增殖活性的影响;采用流式细胞术检测EGCG对Reh细胞凋亡的影响;采用甲基化特异性PCR(MSP)检测RUNX3基因启动子区域的甲基化情况;采用RT-PCR、Western blot法分别检测RUNX3 mRNA、蛋白的表达。结果:EGCG对Reh细胞生长有明显的抑制作用,并有时间及剂量依赖性;EGCG可促进Reh细胞发生凋亡,随着EGCG浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加;MSP法结果显示EGCG处理后RUNX3基因启动子高甲基化的区域发生去甲基化,EGCG能够诱导Reh细胞RUNX3基因mRNA和蛋白的重新表达,具剂量依赖性。结论:EGCG可明显抑制Reh细胞的增殖,并诱导Reh细胞中异常甲基化的RUNX3基因去甲基化,使RUNX3基因恢复表达,这可能是其抗肿瘤的重要机制。
- 吴明彩韦中玲蒋明方基勇毕富勇
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯RUNX3甲基化
- 脂质体转染survivin反义寡核苷酸对K562细胞增殖及凋亡的作用
- 2006年
- 目的:观察脂质体转染survivin反义寡核苷酸(ASODN)对白血病细胞K562的增殖及凋亡的影响。方法:人工合成survivin硫代ASODN,通过脂质体转染K562细胞,倒置显微镜下观察细胞形态学变化;用MTT法观察转染前后对细胞增生的影响;用细胞凋亡检测法(POD)观察细胞凋亡;RT-PCR检测survivin mRNA的表达。结果:(1)survivin ASODN抑制K562细胞增殖呈时间和剂量依赖性;(2)survivin ASODN可诱导K562细胞的凋亡,凋亡指数呈浓度依赖性;(3)survivinASODN处理组K562细胞survivin mRNA的表达水平显著下降。结论:脂质体转染survivin ASODN能够明显抑制K562细胞增殖,且能诱导细胞凋亡。survivin可能成为肿瘤基因治疗的一个新靶点。
- 杨敏戚之琳齐世美陈艳萍毕富勇
- 关键词：脂质体SURVIVIN白血病K562细胞
- 银耳多糖对肝癌细胞株HepG-2增殖的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:研究银耳多糖对肝癌HepG-2细胞增殖的影响。方法:采用高温浸提的方法提取银耳多糖,并进行提取定量;将银耳多糖作用于肝癌HepG-2细胞,采用台盼蓝排斥试验测定细胞活力和生长曲线。结果:在分别培养1 d、2d和3 d后,银耳多糖干预各组的活细胞率都低于对照组(P<0.001)。生长曲线法显示,银耳多糖干预各组的细胞倍增时间延长,银耳多糖对增殖细胞的杀伤率最高达89.29%(>80%),且存在剂量依赖关系。结论:银耳多糖对肝癌HepG-2细胞具有直接抑制作用。
- 李璐吕俊毕富勇方基勇吴明彩
- 关键词：银耳多糖肝癌HEPG-2细胞细胞增殖
- 碘化砷-硫脲对白血病HL-60细胞增殖及survivin基因表达的影响
- 2007年
- 目的:探讨新型砷剂配合物砷化砷-硫脲(AsI3-Tu)对白血病HL-60细胞增殖及survivin基因表达的影响。方法:以不同浓度的砷化砷-硫脲作用于HL-60细胞,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性,原位末端标记(TUNEL)法观察细胞凋亡,RT-PCR半定量检测细胞中sur-vivin mRNA表达。结果:①各实验组AsI3-Tu均能抑制HL-60细胞增殖,并与时间和剂量相关。②TUNEL法观察细胞凋亡,可见AsI3-Tu各浓度组凋亡细胞数明显增多。③AsI3-Tu各浓度组细胞中survivin mRNA表达水平降低,且表达水平与AsI3-Tu剂量呈负相关。结论:AsI3-Tu能有效抑制白血病细胞系HL-60细胞的增殖,诱导其凋亡,机制可能与抑制HL-60细胞中survivin基因表达有关。
- 汪茗谢向荣戚之琳毕富勇
- 关键词：砷剂SURVIVINHL-60细胞白血病
- 低分子核糖核酸对白血病细胞系HL-60细胞增殖的抑制作用被引量：2
- 2000年
- 目的 :研究低分子核糖核酸 (RNA)对白血病细胞系HL - 6 0细胞增殖的影响。方法 :采用人胚胎肝细胞提取的低分子RNA掺入HL - 6 0细胞培养。结果 :低分子RNA掺入使HL - 6 0细胞集落生长降低 ,并与掺入浓度呈负相关 (r=- 0 .9435 ,P <0 .0 1) ,细胞蛋白质含量降低 (P <0 .0 1) ,细胞形体缩小 ,FITC -ConA实验 ,帽状细胞数下降 (P <0 .0 1)。结论 :低分子RNA对HL - 6
- 倪晓华毕富勇
- 关键词：HL-60细胞RNA
- 稳定表达EGFRvⅢex的NIH3T3细胞株的建立及其免疫原性分析被引量：2
- 2007年
- 目的:建立表皮生长因子突变体Ⅲ胞外区(EGFRvⅡ-Iex)的NIH3T3稳定细胞系并分析其免疫原性。方法:将编码EGFRvⅢex基因的表达质粒pLNCX2-EGFRvⅢex转染NIH3T3细胞后,用G418筛选阳性克隆,得到多个细胞克隆。采用免疫组化和Western blot法鉴定这些细胞克隆。选取高表达EG-FRvⅢex的细胞株(命名为3T3-vⅢex)免疫BALB/c小鼠,制备抗血清。用ELISA、Western blot和免疫荧光分别检测抗血清的效价和特异性。结果:成功地构建了真核表达载体pLNCX2-EGFRvⅢex并获得了稳定高表达EGFRvⅢex的NIH3T3细胞系3T3-vⅢex。用3T3-vⅢex免疫小鼠所获得的抗血清效价为10-5。Western blot和免疫荧光鉴定证明抗血清可以与EGFR-vⅢex特异结合。结论:人EGFRvⅢex可在NIH3T3细胞内获得稳定表达,以其免疫小鼠可以获得高效价、高特异性的抗血清。
- 江秀玲毕富勇王华茂石必枝张捷汪茗李宗海
- 关键词：NIH3T3稳定细胞系免疫原性
- JNK信号通路对蜂胶抑制白血病K562细胞增殖的调控作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨JNK信号通路对蜂胶抑制K562细胞增殖过程的调控作用。方法体外培养K562细胞，用不同浓度蜂胶、c—Jun氨基末端激酶（c—JanN—terminalkinase，JNK）特异性抑制剂SP600125对白血病K562细胞进行处理，用MTT法检测细胞增殖抑制率，流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率，Western印迹检测JNK下游分子c—Jun以及磷酸化c—Jan（p-c-Jun）的变化。结果蜂胶作用K562细胞后，增殖抑制率、凋亡率显著升高，具有时间和剂量依赖性，并伴随p-c-Jun蛋白水平上调；加入SP600125能下调p-c-Jun的水平，显著提高蜂胶对K562细胞的增殖抑制率和凋亡率。结论JNK信号通路参与了蜂胶抑制K562细胞增殖过程的调控。抑制JNK活性可增强蜂胶对K562细胞的增殖抑制、凋亡诱导作用。
- 汪茗章尧谢向荣戚之琳毕富勇
- 关键词：蜂胶白血病K562细胞JNK丝裂原活化蛋白激酶类
- 生存素与血液肿瘤的研究进展被引量：1
- 2006年
- Survivin(生存素)基因是近年来发现的一种新的抗凋亡因子,属凋亡蛋白抑制因子(inhibitorapoptosisprotein,IAP)家族,具有抑制细胞凋亡作用并在细胞的有丝分裂过程中起重要的作用。Survivin广泛表达于人类恶性肿瘤组织,其表达与肿瘤预后不良及肿瘤化疗耐药密切相关。其在多种血液肿瘤中均有表达。本文就survivin的分子结构、组织分布、作用机理、在血液肿瘤中的表达及其在肿瘤中的治疗进行综述。
- 杨敏毕富勇
- 关键词：凋亡蛋白抑制因子生存素血液肿瘤反义寡核苷酸细胞周期
