杨旭东 作品数:42 被引量:112 H指数:6 供职机构: 西安交通大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 陕西省科学技术研究发展计划项目 陕西省中医药管理局科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 理学 更多>>
蛋白精氨酸甲基转移酶在E3大鼠哮喘模型中表达变化的研究 被引量:2 2010年 目的观察1~6型蛋白精氨酸甲基转移酶(PRMTs)在E3大鼠急性哮喘模型肺脏和脾脏中的表达变化。方法构建卵清蛋白诱导的E3大鼠急性哮喘模型,分为对照组和哮喘组,每组各10只大鼠,病理及生化检测评估模型构建情况,半定量PCR检测1~6型PRMTs的表达差异。结果和对照组相比,哮喘组大鼠肺脏组织中PRMT1(P<0.01)、PRMT2(P<0.01)、PRMT3(P<0.05)、PRMT5(P<0.05)的表达有显著性升高,而PRMT4(P<0.05)的表达显著性降低;哮喘组大鼠脾脏组织中PRMT2(P<0.05)、PRMT5(P<0.05)的表达也出现显著性升高。结论蛋白精氨酸甲基转移酶在E3大鼠急性哮喘模型肺脏和脾脏中有差异性表达,这可能在哮喘发病的基因转录后调节过程中发挥着重要的作用。 孙青竹 焦芳芳 杨旭东 钟波 蒋梅花 李国良 吕彬 韩燕 宁启兰 张富军 孙健 吕社民关键词:哮喘 诺如病毒与轮状病毒所致的110例婴幼儿急性腹泻病例临床特征分析 被引量:7 2016年 目的 对诺如病毒与轮状病毒所致婴幼儿急性腹泻的临床特点进行分析探讨.方法 收集2010年1月-2015年3月间病毒性婴幼儿急性腹泻患者110例临床资料进行回顾性分析,按照病原学检测情况分为诺如病毒组51例及轮状病毒组59例.另取45例细菌感染所致急性腹泻患儿作为对照组.对诺如病毒与轮状病毒所致婴幼儿急性腹泻的实验室检查、临床症状以及流行病学特征进行分析比较.结果 诺如病毒组患者与轮状病毒组患者在各项实验室检查及临床症状方面均无统计学差异(P>0.05),但与对照组相比均有统计学差异(P<0.05).两组病毒均易感小于2岁的患儿,其中诺如病毒组患儿年龄在13-24个月中所占全部患儿比例为17.65%、轮状病毒组为35.59%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05).诺如病毒及轮状病毒组患儿集中检出月份均为11月、12月及1月.结论 诺如病毒与轮状病毒感染所致的婴幼儿急性腹泻在实验室检查、临床特点以及流行情况差异均不显著,为明确诊断,需进行病原学实验室检查. 刘海燕 杨旭东关键词:诺如病毒 轮状病毒 婴幼儿 急性腹泻 体外循环心内直视手术患者心肌细胞凋亡基因表达的变化 被引量:3 2015年 目的 探讨体外循环心内直视手术患者心肌细胞凋亡基因表达的变化.方法 体外循环下行心脏瓣膜置换术的患者30例,性别不限,年龄21~59岁,心功能Ⅱ或Ⅲ级,ASA分级Ⅱ或Ⅲ级.于体外循环前3 min和主动脉开放1h时随机取15例患者,取右心耳组织,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数(AI),采用人类全基因组表达谱芯片分析凋亡基因的差异表达情况.采用实时定量PCR法测定凋亡诱导因子(AIF)、凋亡蛋白活化因子1(APAF1)、细胞色素c(Cyt c)、Bax、Bc1-2、caspase-3、caspase-9、caspase-6、caspase-7的mRNA表达水平,从而对差异基因的注释系统(GO)及信号通路分析进行mRNA水平验证,采用Western blot法测定心肌组织Cyt c、Bax、Bcl-2和caspase-9的蛋白表达水平,从而对信号通路分析进行蛋白水平验证.结果 与体外循环前比较,主动脉开放1h时差异基因有1 615个,其中表达上调基因数为903个,表达下调基因数为712个.差异基因GO分析显示,17个基因与线粒体凋亡通路相关,其中14个基因上调,3个基因下调.差异基因信号通路分析显示,可信值高的前10位中,缺血再灌注诱导的线粒体凋亡信号通路位于首位.与体外循环前比较,主动脉开放1 h时患者心肌细胞AI升高,心肌组织AIF、APAF1、Cyt c、caspase-9、caspase-3、caspase-6、caspase-7和Bax的mRNA表达明显上调,Bcl-2 mRNA表达明显下调,心肌Cyt c、caspase-9和Bax蛋白表达明显上调,Bcl-2蛋白表达明显下调(P<0.01).该结果与基因表达谱芯片GO分析和信号通路分析结果一致.结论 线粒体凋亡通路是体外循环心内直视手术患者心肌细胞凋亡过程中的优势表达途径. 王焰斌 杨旭东 李刚 刘志红 王湘 郭建洲 于洪涛 张锐 杨建安 黄志勇关键词:心肌再灌注损伤 心肺转流术 微阵列分析 一种无线传感器网络中继节点部署方法 本发明公开了一种无线传感器网络中继节点部署方法,包括以下步骤:1)获取基站、传感器节点的部署位置以及中继节点的部署候选位置,构造异构通信图;2)根据异构通信图,选取能够k跳覆盖所有传感器节点的最少中继节点的第一集合X<S... 王换招 杨旭东 秦云宁文献传递 FGF23对支气管上皮细胞生长、免疫平衡和上皮间充质转化的影响 2024年 目的探究成纤维细胞生长因子23(FGF23)对支气管上皮细胞16HBE生长、免疫平衡和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法使用Lipofectamine 3000转染试剂对16HBE细胞分别转染NC-shRNA或FGF23-shRNA。转染后,使用10 ng/mL TGF-β1处理细胞48 h。16HBE细胞分为对照组、NC-shRNA组、FGF23-shRNA组、TGF-β1组、NC-shRNA+TGF-β1组和FGF23-shRNA+TGF-β1组。通过CCK-8法检测细胞增殖。使用ELISA试剂盒检测16HBE细胞上清液中IFN-γ、IL-4、IL-17和IL-10的水平。通过qRT-PCR、Western blot或免疫荧光染色检测16HBE细胞中FGF23、Klotho、FGFR4、E-cadherin、α-SMA和N-cadherin的mRNA或蛋白表达水平。结果与TGF-β1组相比,FGF23-shRNA+TGF-β1组的OD 450nm值降低(P<0.05)。与TGF-β1组相比,FGF23-shRNA+TGF-β1组的IFN-γ和IL-10的水平升高,而IL-4和IL-17降低(P<0.05)。与TGF-β1组相比,FGF23-shRNA+TGF-β1组的E-cadherin蛋白表达水平升高,而α-SMA降低(P<0.05)。与TGF-β1组相比,FGF23-shRNA+TGF-β1组的E-cadherin相对荧光强度升高,而N-cadherin降低(P<0.05)。与TGF-β1组相比,FGF23-shRNA+TGF-β1组的FGF23和FGFR4的mRNA和蛋白表达水平均降低,而Klotho均升高(P<0.05)。结论下调FGF23抑制了TGF-β1诱导的16HBE细胞的生长和EMT过程,并纠正了Th1/Th2和Treg/Th17的失衡,FGF23-Klotho-FGFR4信号可能是哮喘治疗的一种分子靶标。 张舒晨 杨旭东 李丹丹 侯新芳 何喜宁关键词:成纤维细胞生长因子23 支气管上皮细胞 上皮间充质转化 免疫平衡 转录因子STAT1两个亚型STAT1α和STAT1β高表达载体的构建及鉴定 2016年 目的利用高表达载体pLJM1-EGFP构建并鉴定转录因子STAT1基因的2个亚型STAT1α和STAT1β的过表达重组质粒(简称为pLJM1-STAT1α和pLJM1-STAT1β)。方法以大鼠肝脏cDNA为模板,PCR获取目的片段(即STAT1α和STAT1β);用AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切pLJM1-EGFP表达载体和PCR扩增的STAT1α和STAT1β基因片段后,用T4DNA连接酶连接酶切纯化后的载体及目的基因片段;将连接产物转化DH5α大肠杆菌感受态细胞、挑选阳性克隆,并通过PCR、双酶切和DNA测序鉴定构建的重组质粒。结果 PCR和双酶切证实pLJM1-STAT1α和pLJM1-STAT1β重组载体中分别成功插入了STAT1α和STAT1β基因片段。DNA测序结果表明插入的STAT1α和STAT1β基因片段的序列完全正确。结论成功构建了pLJM1-STAT1α和pLJM1-STAT1β高表达重组载体。 李靖 伊静 蓝茜 李玥 刘莉 梁栋 杜小娟 武丽涛 闫小飞 杨旭东 张富军 吕社民 李冬民支气管哮喘大鼠肺内c-fos蛋白表达和神经肽含量相关性研究 被引量:5 2014年 目的探讨支气管哮喘大鼠肺内c-fos蛋白表达和神经肽P物质(substance P,SP)和血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)含量及分析之间的相关性。方法 32只SD大鼠随机分成正常对照组、哮喘非急性发作期组、哮喘急性发作组和地塞米松干预组。采用免疫组织化学进行组织学观察,采用酶联免疫吸附试验法测定肺泡灌洗液中SP和VIP的浓度。结果哮喘大鼠肺泡灌洗液中SP浓度较正常对照组显著增高(P<0.000 1),VIP浓度显著降低(P<0.000 1),哮喘恢复组、哮喘急性期发作组及地塞米松干预组肺组织中c-fos蛋白光密度值与肺泡灌洗液SP浓度呈正相关(r分别为0.908、0.967、0.865,P<0.05或<0.001),与肺泡灌洗液VIP浓度呈负相关(r分别为-0.974、-0.949、-0.962,P均≤0.001)。结论哮喘大鼠肺内c-fos蛋白表达、神经肽含量与哮喘发作有关。 刘海燕 侯伟 杨旭东 宗长红关键词:C-FOS蛋白 神经肽 哮喘的遗传学研究进展 被引量:2 2016年 哮喘是一种常见的多基因复杂性疾病,具有较高的遗传度。近年来,寻找哮喘的易感基因已成为哮喘遗传学研究的主要内容。本文对定位克隆、候选基因研究和全基因组关联研究等寻找哮喘易感基因的策略,及近年来研究较多的一些哮喘易感基因的研究进行简要概述。 杨旭东关键词:哮喘 研究方法 易感基因 多态性 人过氧化氢酶基因重组腺病毒的构建及其酶活性的测定 2011年 目的:构建含人过氧化氢酶(catalase,CAT)基因的重组腺病毒载体,为基因治疗提供一种新的方法。方法:从人血中分离白细胞,提取总RNA,利用RT-PCR法获得人CAT的全长cDNA,克隆到pcDNA3.1+中,构建pcDNA3.1+-CAT载体,酶切和基因测序鉴定阳性克隆;利用酶切法把CAT基因克隆至入门载体pENTR1A中,构建pENTR1A-CAT载体;利用LR反应,体外重组pENTR1A-CAT和pAd/CMV/V5-DEST,得重组腺病毒表达载体pAd/CMV/V5-DEST-CAT。经测序鉴定,并用Pac I线性化pAd/CMV/V5-DEST-CAT后,与脂质体2 000共转染293A细胞,重组病毒颗粒的包装、扩增和滴度测定。利用免疫印迹和240 nm紫外光吸收法测定重组病毒中CAT蛋白的表达量和CAT的活性。结果:Ad-CAT、(A组)Ad-LacZ(B组)及PBS(C组)感染293A细胞24h,其细胞蛋白提取液在1至4 m in反应中CAT活性的变化经单因素方差分析,三组间差异有统计学意义(F=5.96,P<0.05)。其中,A组4 m in内的酶活性分别比B组和C组高出(63.8±1.54)%和(76.7±1.67)%(P<0.05),而B组与C组比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究成功构建了含人CAT基因的Ad/CMV/V5-DEST-CAT载体,并在293A细胞中包装出高表达及高活性重组腺病毒,为进一步研究人CAT基因在基因治疗中的作用奠定了基础。 欧阳晓玲 李爱玲 宁启兰 杨旭东 许楠 王慧莲关键词:基因 基因疗法 运动训练大鼠的自体荧光研究 首次通过激光诱导荧光光谱技术研究运动训练大鼠不同部位组织和器官的自体荧光光谱特性,并在腓肠肌的三维荧光光谱中发现了和运动相关的特有荧光峰,并判别出此荧光峰对应的荧光物质是NDAH(还原态烟酰胺腺嘌呤二核苷酸),且研究了运... 任文君 徐正红 张镇西 杨旭东 李政关键词:自体荧光 荧光光谱 NADH 腓肠肌 文献传递