李雪霞
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- Flt-1胞外Ⅲ区蛋白的可溶性表达、纯化及活性测定被引量：1
- 2009年
- 本研究旨在克隆和表达人血管内皮生长因子受体-1胞外Ⅲ区蛋白,并测定其生物学活性。应用RT-PCR法从人脐静脉内皮细胞中克隆Flt-1胞外Ⅲ区基因片段,经测序鉴定后再克隆到原核表达载体pAYZ中,构建出的表达载体pAYZflt-1Ⅲ转化大肠杆菌16C9后,用低磷培养基诱导表达目的蛋白;采用E-tag亲和层析柱纯化目的蛋白;用SDS-PAGE、Western blotting和BCA法对其进行定性、定量检测鉴定;用ELISA、损伤愈合试验和Transwell法检测靶蛋白生物学活性。克隆的Flt-1胞外Ⅲ区基因经测序鉴定正确。所构建的pAflt-1Ⅲ表达载体经低磷培养基诱导后高表达出可溶性Flt-1胞外Ⅲ区蛋白,产量约为1.1mg/L;ELISA结果显示该蛋白可以结合VEGF165,并表现为剂量依赖性,其与配体结合的解离常数Kd为1.180pmol/L。损伤愈合试验和Transwell结果显示该蛋白可以抑制VEGF165(50ng/ml)和bFGF(100ng/mL)诱导的脐静脉内皮细胞的迁移,并呈剂量依赖性。这将为今后开展人flt-1基因Ⅲ区的功能研究及其单抗研制奠定了实验基础。
- 谢印良谷岳黄蕊李雪霞杜雪王金宏熊冬生杨纯正许元富
- 关键词：血管内皮生长因子受体-1血管新生血管内皮生长因子165
- 血管内皮生长因子受体-1在血液系统中的表达及作用
- 2004年
- 血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptors,VEGFRs)包括Flt-1(VEGFR1),KDR/Flk-1(VEGFR2)和Flt-4(VEGFR3),三者在血管新生中均起着重要的作用.然而,最近的研究还表明,Flt-1不仅与血管新生密切相关,在血液系统中亦有重要作用:在多种血液细胞表达,能够调控造血重建,为血液系统疾病提供很好的治疗靶点.因此,阐明Flt-1在血液系统中的表达及作用,对于治疗血液系统疾病,是非常有益的.
- 李雪霞熊冬生杨纯正
- 关键词：血管内皮生长因子受体-1血液系统血管新生血液系统疾病
