李坤
- 作品数：35 被引量：83H指数：5
- 供职机构：河北北方学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：河北省教育厅青年基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 术前应用甲壳素衍生物对瘢痕疙瘩组织中TSG6-P38/JNK信号通路的影响
- 2024年
- 目的探究术前应用甲壳素衍生物对瘢痕疙瘩中肿瘤坏死因子α刺激基因6(TSG-6)-p38/c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路的影响。方法选择自2019年10月至2021年8月,河北北方学院附属第一医院皮肤科收治的79例瘢痕疙瘩患者作为研究对象,接受手术切除治疗并根据术前是否使用甲壳素衍生物分为甲壳素组(42例)和对照组(37例),甲壳素组术前给予甲壳素凝胶涂抹,2次/d,连续14 d;对照组术前不接受任何治疗。手术中收集瘢痕疙瘩组织,采用HE染色检测病理改变,Western blot检测PCNA、Ki-67、TSG6、p-p38、p-JNK、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解型caspase-3(Cleaved caspase-3)的表达水平,采用TUNEL法检测细胞凋亡率。结果与对照组比较,甲壳素组瘢痕疙瘩中炎症细胞浸润减少,PNCA、Ki-67、Bcl-2的表达水平降低,细胞凋亡率及TSG-6、Bax、Cleaved caspase-3的表达水平增加(P<0.05)。结论甲壳素衍生物调控瘢痕疙瘩中的细胞增殖及凋亡,这一作用与调控TSG6-p38/JNK通路有关。
- 陈雷刚周向昭王世宁李亚维刘媛媛李坤
- 关键词：瘢痕疙瘩
- NGF、NCAM、CXCL12/CXCR4在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中作用的研究
- 2015年
- 目的：探讨涎腺腺样囊性癌（salivary adenoid cystic carcinoma,SACC）中神经生长因子（nerve growth factor,NGF）、神经细胞黏附分子（neural cell adhesion molecule,NCAM）、趋化因子基质细胞衍生因子-1（stromal cell derived factor 1,SDF-1;系统命名趋化因子12,CXC chemokine ligand 12,CXCL12）及其特异性受体4（CXC chemokine receptor type 4,CXCR4）表达与嗜神经侵袭的关系。方法：选取临床病理资料齐全的SACC 60例,分为嗜神经侵袭组（36例）和非嗜神经侵袭组（24例）,制作组织芯片。采用免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）技术检测两组神经生长因子（nerve growth factor,NGF）、神经细胞黏附分子（neural cell adhesion molecule,NCAM）、CXCL12/CXCR4蛋白的表达,分析指标表达与临床病理参数的相关性。结果：NGF、CXCL12、CXCR4蛋白在SACC嗜神经侵袭组阳性表达率均高于非嗜神经侵袭组,差异具有统计学意义（P〈0.05）;NGF、CXCL12、CXCR4表达与患者性别、组织学类型、肿瘤发生部位及大小均无关（P〉0.05）。SACC中NGF与CXCL12的阳性表达相关（r=0.279,P〈0.05）,也与CXCR4阳性表达相关（r=0.451,P〈0.05）,但CXCL12与CXCR4无明显相关（r=0.254,P=0.05）。NCAM在两组SACC中均呈阴性表达。结论：NGF、CXCL12/CXCR4过表达共同参与了SACC的嗜神经侵袭过程。
- 杜贵霞张凡刘博李瑞平刘军超韩向春张九鸿李坤赵秀芳
- 关键词：涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭神经细胞黏附分子
- 甲壳素衍生物调控瘢痕疙瘩中TSG-6/PI3K/AKT通路表达的临床研究被引量：1
- 2023年
- 目的:甲壳素衍生物调控瘢痕疙瘩中肿瘤坏死因子α刺激基因6(TSG-6)/磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶-B(AKT)通路表达的作用。方法:选择2020年1月-2021年10月笔者医院接受手术切除的76例瘢痕疙瘩患者为研究对象,根据术前是否使用甲壳素衍生物分为甲壳素组(n=41)和对照组(n=35)。手术后,收集瘢痕疙瘩组织,采用免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的阳性表达率;采用TUNEL法检测细胞凋亡率;采用western blot检测TSG-6、p-PI3K、p-AKT、鼠双微基因2(MDM2)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、裂解型caspase-3(Cleaved caspase-3)的表达水平;采用酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-6的含量。结果:甲壳素组瘢痕疙瘩组织中PCNA阳性表达率、p-PI3K、p-AKT、MDM2、Bcl-2的表达水平、TNF-α、IL-1β、IL-6的含量低于对照组(P<0.05),细胞凋亡率、TSG-6及Cleaved caspase-3的表达水平高于对照组(P<0.05)。结论:甲壳素衍生物可调控瘢痕疙瘩中的细胞增殖及凋亡,这一作用与调控TSG-6/PI3K/AKT通路有关。
- 陈雷刚周向昭王世宁李亚维刘媛媛李坤
- 关键词：瘢痕疙瘩甲壳素凋亡炎症反应
- 长链非编码RNA HOX转录反义RNA靶向miR-206对结直肠癌细胞迁移、侵袭的影响
- 2023年
- 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)HOX转录反义RNA(HOTAIR)靶向miR-206对结直肠癌细胞侵袭和迁移的影响。方法常规培养人结直肠癌HT-29细胞,将合成的HOTAIR si RNA和siRNA control转染于HT-29细胞,设置为si-HOTAIR组、si-con组,未进行转染的HT-29细胞设置为空白组。实时荧光定量聚合酶链反应测定转染效果,Transwell和划痕愈合实验检测HT-29细胞侵袭和迁移情况。生物信息学软件分析HOTAIR与miR-206区域结合位点,构建突变型(HOTAIR 3’UTR mut)和野生型(HOTAIR 3’UTR wt)萤光素酶报告载体,将HOTAIR 3’UTR wt、HOTAIR 3’UTR mut与miR-206 mimic或miR-NC载体共转染至HT-29细胞中,设为HOTAIR 3’UTRwt/miR-NC组、HOTAIR3’UTRwt/miR-206组、HOTAIR3’UTRmut/miR-NC组,HOTAIR3’UTRmut/miR-206组,培养48 h后检测萤光素酶活性。将HOTAIR si RNA和miR-206 inhibitor共转染于HT-29细胞,设置si-HOTAIR+anti-NC组和si-HOTAIR+anti-miR-206组,用Transwell和划痕愈合实验分析细胞侵袭、迁移水平。结果空白组与si-con组HT-29细胞中HOTAIR m RNA的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);与si-con组比较,si-HOTAIR组HT-29细胞中HOTAIR m RNA的表达水平降低(P<0.01)。空白组与si-con组HT-29细胞侵袭数目、细胞划痕愈合率比较,差异无统计学意义(P>0.05);与si-con组比较,si-HOTAIR组HT-29细胞侵袭数目减少,细胞划痕愈合率降低(P<0.01)。与HOTAIR 3’UTR wt/miR-NC组比较,HOTAIR 3’UTR wt/miR-206组中HOTAIR wt的萤光素酶活性下降(P<0.01);而HOTAIR 3’UTR mut/miR-NC组与HOTAIR 3’UTR mut/miR-206组萤光素酶活性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与si-HOTAIR+anti-NC组比较,si-HOTAIR+anti-miR-206组中miR-206的表达水平降低(P<0.01)。与si-HOTAIR+anti-NC组比较,si-HOTAIR+anti-miR-206组中HT-29细胞的侵袭和迁移率增加(P<0.01)。结论HOTAIR通过负调控miR-206促进HT-29细胞的侵袭和迁移能力。
- 薛强武雪亮孙光源杨东东李坤
- 关键词：结直肠癌长链非编码RNA细胞迁移
- 子宫内膜样癌MELF浸润模式的临床病理特征分析被引量：1
- 2022年
- 目的 研究子宫内膜样腺癌微囊性、伸长及碎片状(MELF)浸润模式患者的临床病理特征及相关机制。方法 收集河北北方学院附属第一医院225例子宫内膜样腺癌患者的临床资料、病理标本及癌旁标本。根据MELF浸润模式将其分为MELF组、非MELF组。研究子宫内膜样腺癌MELF浸润模式的临床病理特征;根据病理检测结果将标本分为MELF组、非MELF组、空白对照组。Western blot法检测病理标本EMT关键蛋白E-cadherin及凋亡关键蛋白Bcl-2、Bax相对表达水平;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测E-cadherin m RNA、Bcl-2mRNA、Bax m RNA的相对表达水平。结果MELF组、非MELF组病例数分别为41例(18.22%)、184例(81.78%),其中年龄是否>50岁对患者无明显影响(P> 0.05)。MELF组患者绝经、FIGO分期、肌层浸润深度、淋巴结转移、脉管侵犯、CA199、CA125水平等的占比均明显高于非MELF组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,MELF组、非MELF组上皮间质转化(EMT)关键蛋白E-cadherin蛋白、促凋亡蛋白Bax表达量较空白对照组明显降低,抑制凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达量较空白对照组明显增高;MELF组Ecadherin、Bax蛋白表达量较非MELF组明显降低,Bcl-2蛋白表达量较非MELF组明显增高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。RT-qPCR结果显示,MELF组、非MELF组Bcl-2mRNA相对表达量较空白对照组明显增高,E-cadherin、BaxmRNA相对表达量较空白对照组明显降低;MELF组Bcl-2mRNA相对表达量较非MELF组明显增高,E-cadherin、BaxmRNA相对表达量较非MELF组明显降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 MELF浸润模式与患者绝经、FIGO分期、肌层侵犯深度、淋巴结转移、脉管侵犯、CA199、CA125水平等因素有关,其产生机制可能与促进EMT及凋亡有关。
- 李坤王静金春亭白睿刘军超张玉虹
- 关键词：子宫内膜样腺癌上皮间质转化凋亡
- SLC12A5在结直肠癌中的表达及其临床意义被引量：1
- 2018年
- 目的研究溶质载体家族12A5基因(SLC12A5)在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征间的关系。方法选取我院结直肠癌(癌组)和癌旁正常黏膜组织(正常组)各40例,应用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测两组中SLC12A5 mRNA和蛋白质的表达情况,并应用免疫组化法(IHC)检测SLC12A5在两组中的表达,分析SLC12A5在结直肠肿瘤发生、发展中的作用。结果 RT-PCR结果显示:结直肠癌组织中SLC12A5 mRNA的表达水平为0.98±0.04,明显高于癌旁正常组织(0.18±0.03,P=0.008)。Western blot结果显示:SLC12A5蛋白在结直肠癌组织中的表达水平为0.86±0.05,明显高于癌旁正常组织(0.15±0.02,P=0.017)。IHC结果显示SLC12A5在结直肠癌组织中阳性表达为87.50%(35/40),明显高于癌旁正常黏膜中的表达(32.50%,13/40),差异有统计学意义(χ~2=16.27,P=0.000)。SLC12A5表达与肿瘤浆膜浸润、TNM分期、淋巴结转移、肝转移及脉管浸润等密切相关(P<0.01),而与患者年龄、肿瘤大小及分化程度无关(P>0.05)。结论 SLC12A5的表达上调与结直肠腺癌的发生、发展具有较高的相关性,有望成为特异性较高的肿瘤标志物。
- 王晓元李曙光赵轶峰杨永江武雪亮李坤王金科彭涛
- 关键词：结直肠癌逆转录聚合酶链反应蛋白质印迹免疫组化
- miRNA-541-5p负调控细胞周期蛋白D1抑制结肠癌细胞增殖和迁移的相关研究被引量：3
- 2021年
- 目的探讨miRNA-541-5p(miR-541-5p)负调控细胞周期蛋白D1(CCND1)对结肠癌细胞增殖和迁移的影响及其相关机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-541-5p在结肠癌细胞株HT29、SW480、SW620、HCT116和正常人肠上皮细胞株HIEC以及2017年4月至2020年3月河北北方学院附属第一医院112例结肠癌手术患者肿瘤组织和癌旁正常组织中的表达水平。采用TargetScan生物信息学软件预测miR-541-5p的潜在靶基因,并通过双荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR和蛋白质印迹法进行验证。检测CCND1在结肠癌细胞株和结肠癌组织中的表达水平。将miR-541-5p表达水平最低的细胞分为miR-NC组(转染对照质粒)、miR-541-5p组(转染miR-541-5p模拟物)、miR-541-5p+CCND1组(共转染miR-541-5p模拟物和CCND1),使用CCK-8法、Transwell法检测miR-541-5p和CCND1对结肠癌细胞增殖、迁移能力的影响。通过构建结肠癌裸鼠移植瘤模型观察miR-541-5p对肿瘤生长的影响。结果结肠癌患者肿瘤组织中miR-541-5p相对表达量低于癌旁正常组织(0.45±0.06比1.00±0.12,t=43.385,P<0.01)。结肠癌细胞株HT29、SW480、SW620、HCT116和正常人肠上皮细胞株HIEC中的miR-541-5p相对表达量分别为0.46±0.03、0.67±0.04、0.57±0.06、0.17±0.02和1.00±0.15,差异有统计学意义(F=5.621,P<0.01),各结肠癌细胞株miR-541-5p相对表达量均低于正常人肠上皮细胞株HIEC。选择HCT116细胞进行后续实验。TargetScan软件预测CCND1的3'UTR可能存在与miR-541-5p互补位点。双荧光素酶报告基因实验结果显示,CCND1是miR-541-5p的潜在靶基因,miR-541-5p可负调控CCND1表达。CCK-8法检测结果显示,miR-NC组、miR-541-5p组、miR-541-5p+CCND1组HCT116细胞增殖率分别为(2.00±0.16)%、(0.89±0.08)%、(2.56±0.23)%,差异有统计学意义(F=6.715,P<0.01),在miR-541-5p过表达的HCT116细胞中转染CCND1能逆转miR-541-5p对细胞增殖的抑制作用。Transwell检测结果显示,过表达mi
- 王晓元赵轶峰杨永江黄迪苏卓彬李坤李晶晶李曙光
- 关键词：结肠肿瘤微RNAS细胞周期蛋白D1细胞增殖
- 姜黄素抗食管癌Eca-109细胞增殖及诱导凋亡机制的研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨姜黄素抗食管癌Eca-109细胞增殖及诱导凋亡机制。方法 CCK-8法检测姜黄素对Eca-109细胞的抑制作用;琼脂糖凝胶技术检测有无Ladder状条带形成、电镜技术观察细胞超微结构及全自动荧光酶标仪观察姜黄素对Eca-109细胞的杀伤作用。结果随浓度增加时间延长各组生长抑制率有明显增高,且呈剂量浓度依赖性,组间差异有显著性(P<0.01)。Caspase-3活性检测发现:姜黄素20μmol.L-1、40μmol.L-1作用24 h后OD值与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。电镜观察显示姜黄素可破坏细胞的超微结构。结论姜黄素可破坏细胞超微结构,抑制食管癌Eca-109细胞增殖并诱导其凋亡。
- 武欣李坤张林西
- 关键词：姜黄素人食管癌透射电镜
- Ⅲ期乳腺癌患者新辅助化疗前后Ki-67、MMP-9的表达及临床意义被引量：3
- 2015年
- 目的:探索乳腺癌患者新辅助化疗(neoadjuvant chemotherapy,NCT)前后MMP-9、Ki-67的表达变化及其与乳腺癌NCT疗效的关系。方法:选择浸润性乳腺癌(Ⅲ期)患者130例,患者术前应用表柔比星+环磷酰胺+多西他赛方案化疗6周期,评价其疗效。应用免疫组织化学检测穿刺标本及手术标本的Ki-67、MMP-9表达水平。结果:1临床完全缓解26例,部分缓解66例,病情稳定28例,病情进展4例;有效率为74.19%(92/124),获益率达96.77%(120/124);其中,19.35%(24/124)患者达到病理完全缓解。2 Ki-67阳性表达者的NCT有效率明显高于阴性表达者(χ2=6.368,P=0.012);MMP-9阳性表达者的NCT有效率明显高于MMP-9阴性表达者(χ2=4.062,P=0.044);3 NCT后乳腺癌组织中Ki-67指数、MMP-9的表达强度均较NCT前明显降低(t=3.136,P=0.003;χ2=8.911,P=0.030)。结论:乳腺癌患者经NCT后Ki-67和MMP-9表达明显降低,二者可作为评价乳腺癌NCT疗效的指标。
- 张一君崔大鹏武雪亮李坤王立坤信国峰卢钰李青
- 关键词：新辅助化疗KI-67基质金属蛋白酶-9
- MiR-760通过抑制钙离子信号关键分子干预结肠癌转移的研究被引量：3
- 2020年
- 背景:微小RNA(miRNA)是一种新的癌症治疗相关的生物学标志物,研究表明miR-760在结直肠癌的发生、发展中起有重要作用。目的:探讨miR-760对结肠癌细胞增殖、周期、迁移和侵袭的调控作用及其机制。方法:采用qRT-PCR法检测结肠癌组织以及结肠癌细胞株HCT116、HT29、SW480和SW620中miR-760表达。双萤光素酶报告基因实验验证miR-760与STIM1的靶向关系。以蛋白质印迹法、免疫组化染色分别检测结肠癌细胞和组织中STIM1蛋白表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭。构建结肠癌裸鼠移植瘤模型并观察miR-760对肿瘤生长的影响。结果:MiR-760在结肠癌组织和结肠癌细胞中的表达均明显降低,而STIM1在结肠癌组织和细胞中高表达。MiR-760通过与STIM1的3’-UTR互补结合抑制其表达。过表达miR-760能抑制结肠癌细胞增殖,阻滞S期,抑制细胞迁移和侵袭,但上调STIM1能逆转这种抑制效果。在结肠癌裸鼠移植瘤模型中,过表达miR-760能下调STIM1表达并抑制肿瘤生长。结论:MiR-760通过靶向STIM1参与对结肠癌细胞生物学行为的调控,在结肠癌中发挥抑癌的作用。
- 王晓元赵轶峰杨永江黄迪苏卓彬李坤李晶晶李曙光
- 关键词：结肠肿瘤细胞侵袭
