朴君
- 作品数：28 被引量：58H指数：4
- 供职机构：辽宁师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金大连市科技计划项目辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 充分调动学生积极性,提升生理学双语教学的水平
- ＜正＞近年来教育部提出了双语教学的要求, 在加强大学本科教学的12项措施中要求各高校在三年内开设5％-10％的双语课程,目的是想通过双语教学的新模式,将专业英语的教学贯穿于整个本科生物学教育的全过程,做到不断复习、反复强...
- 邹伟王秀武朴君
- 文献传递
- 肝癌基因治疗的研究进展被引量：2
- 2012年
- 基因治疗是向靶细胞或组织引入外源基因片段,通过纠正或补偿缺陷基因,关闭或抑制异常表达的基因,从而达到治疗目的的一种生物医学技术。肝癌是全球发病率较高的恶性肿瘤之一,通过基因治疗的方法来治疗肝癌,既达到治疗肝癌的目的,又不会造成正常细胞损伤,是具有较好应用前景的肝癌治疗方法。现就病毒载体和非病毒载体对肝癌细胞HepG2基因治疗的研究进展予以综述。
- 金文实王冰崔韶辉朴君张树彪
- 关键词：病毒载体非病毒载体HEPG2细胞基因治疗
- 二甲基砷酸对辽宁绒山羊皮肤成纤维细胞的毒性作用以及诱导细胞凋亡的机制被引量：1
- 2021年
- 旨在用类金属毒性物质——砷对辽宁绒山羊皮肤成纤维细胞的染毒试验,探索砷对绒山羊皮肤成纤维细胞毒性作用和其诱导细胞凋亡的机制,为后续研究砷对绒山羊皮肤细胞生长的影响提供理论依据。本研究随机选取1只7月龄各项机能正常,体重为25 kg左右的雄性辽宁新品系绒山羊,取其腹部皮肤,进行细胞培养。将二甲基砷酸药物配制成11个不同浓度组(0、0.1、0.2、0.4、0.8、1、5、10、25、50、100 mmol·L^(-1)),对细胞量为3×10^(4)个·mL^(-1)皮肤细胞进行药物染毒24、48、72、96 h后,经MTT法进行3次重复试验,得到绒山羊皮肤成纤维细胞的增殖与抑制情况以及后续试验所选用的时间点和4个浓度组(对照、促进、临界、半抑制浓度(IC50)),进一步借助免疫荧光检测观察细胞骨架形态变化;彗星试验检测细胞DNA损伤情况;流式细胞仪检测细胞凋亡;透射电镜观察细胞质与细胞器的变化;测定细胞内荧光染料Mito-Tracker Green的染色强度分析线粒体跨膜电位(ΔΨm)以及观察分析溶酶体的数量情况。结果,24 h时不同浓度的OD值均能明显地反映出二甲基砷酸对绒山羊皮肤成纤维细胞的增殖和抑制趋势,而48、72、96 h时增殖作用逐渐减弱甚至消失,24 h时细胞增殖与抑制效果最佳,因此选取24 h时的对照组(未做任何处理)、促进浓度组(0.8 mmol·L^(-1))、临界浓度组(1 mmol·L^(-1))、IC50浓度组(38.68 mmol·L^(-1))进行后续的试验。24 h时,剂量范围0.1~1 mmol·L^(-1)的二甲基砷酸促进绒山羊皮肤成纤维细胞增殖,此阶段细胞骨架形态完整,细胞DNA未出现拖尾现象,凋亡率较小,线粒体数目增多,膜结构清晰,嵴致密,形态完整,膜电位升高,溶酶体数量增多;浓度大于1 mmol·L^(-1)的二甲基砷酸抑制绒山羊皮肤成纤维细胞生长,引起明显的细胞毒性(P<0.01),此时细胞骨架形态发生改变,DNA未出现拖尾现象,凋亡率显著上升,线粒体�
- 赵凤琴周蕾王智阅孙东禹朴君朴敬爱金梅
- 关键词：辽宁绒山羊皮肤成纤维细胞细胞增殖细胞凋亡
- 当前高师本科生物教育专业实验教学存在的问题及对策被引量：7
- 2013年
- 为加强高师生物教育专业本科学生的实验教学,提出了目前高师生物教育专业实验教学存在的问题,以及产生的原因,指出了解决问题的对策。并对实验教学采用多项技能考试法,用一种材料做多个实验等解决方法进行了探索研究,取得了较理想的成果。
- 朴敬爱朴君姜长阳
- 关键词：生物教育实验教学
- 辽宁新品系绒山羊GMPR2基因的生物学功能研究
- 2013年
- 本研究在辽宁新品系绒山羊中发现了GMPR2基因,旨在研究其在皮肤中的功能作用与绒毛生长的关系。首先对此基因进行了生物信息学分析,再利用地高辛标记的原位杂交技术对其进行定位分析,然后利用荧光定量技术对其进行相对定量分析,RT-PCR技术检测GMPR2基因是否在其他器官中表达,最后验证不同浓度褪黑激素处理不同时间是否影响其表达。结果表明,得到的基因全长确为GMPR2基因,与牛GMPR2同源性最高;在初次级毛囊中都表达,表达部位为内根鞘;GMPR2基因在退行期初级毛囊中的表达量最高(P<0.01),在兴盛期与休止期表达量相差不明显;另外,GMPR2基因只在皮肤中表达,在心、肝等内脏器官不表达;褪黑激素处理后,GMPR2的表达量明显降低。所以,推断GMPR2可能间接调节初、次级毛囊的生长萎缩。
- 金梅张丽丽曲杨乐朴君李秀娜王宜萌朴敬爱
- 关键词：生物信息学分析原位杂交荧光定量褪黑激素
- 田间禾本科杂草对水稻条纹病毒流行风险评估调查被引量：1
- 2020年
- 采用室内灰飞虱接种鉴定的方法评价了江苏地区主要杂草对水稻条纹病毒(rice stripe virus,简称RSV)的感染率。结果显示,看麦娘、稗、旱稗、狗尾草、升马唐的感染率较高,为38.24%~62.00%,具有成为RSV“桥梁”寄主的可能性。对病害大流行年份(2005年)江苏主要杂草种类RSV感染率田间调查工作进行总结,发现野生禾本科杂草中存在RSV感染,但其感染率低于同期小麦植株的感染率,这说明小麦是RSV侵染循环中重要的“桥梁”寄主。于病害不流行年份(2018—2019年)在江苏多地采集田边稗草和狗尾草,经分子生物学检测,可检测出RSV。禾本科杂草对病害流行的贡献度低于小麦,其在病害侵染循环中的作用主要体现在维持RSV在农田生态系统中的存在。
- 王艺晓朴君程兆榜邓金花周益军李硕
- 关键词：禾本科杂草水稻条纹病毒病毒感染率田间调查风险评估
- HGT KAPs基因家族在辽宁绒山羊皮肤毛囊中的表达研究被引量：7
- 2017年
- 为进一步探索高甘氨酸/酪氨酸角蛋白关联蛋白基因家族(HGT KAPs)与辽宁绒山羊羊绒品质——绒毛纤维直径的关系,本研究运用半定量RT-PCR检测KAP6-1.2、KAP6.2、KAP7.1、KAP8.1和KAP8.2在皮肤及各组织中的表达,通过原位杂交对其进行定位分析,采用实时荧光定量PCR检测兴盛期、退行期基因的相对表达量。结果表明:5个基因特异地表达于皮肤,在初、次级毛囊的皮质层、内根鞘中有明显的表达信号。KAP6-1.2和KAP8.1在兴盛期初次级毛囊的表达量差异不显著,KAP6.2在兴盛期、退行期初级毛囊的表达量均高于次级毛囊,而KAP7.1、KAP8.2在兴盛期次级毛囊的表达量高于初级毛囊,而退行期与之相反。因此推测,HGT KAPs基因家族在调控辽宁绒山羊绒毛纤维直径方面具有重要的作用,是编码羊绒结构蛋白的基因。
- 金梅王瑞王婧朴君朴敬爱赵凤琴
- 关键词：辽宁绒山羊RT-PCR原位杂交实时荧光定量PCR
- 利用小RNA深度测序技术检测灰飞虱病毒种类被引量：1
- 2022年
- 灰飞虱是一种重要农业害虫,作为病毒介体,可以传播多种植物病毒引起水稻、小麦和玉米等粮食作物病毒病害。目前对于灰飞虱体内昆虫病毒种类尚缺乏系统认识,难以开展利用昆虫病毒防治灰飞虱相关研究工作。为挖掘灰飞虱体内昆虫病毒资源,本文通过小RNA深度测序技术对灰飞虱所携带的病毒种类进行分析鉴定。结果显示,测序数据比对得到13种病毒,涉及8个病毒科和2种未分类病毒。除占据优势的水稻条纹病毒外,其余均为专性寄生的昆虫病毒,包括5种正链RNA病毒、2种单链DNA病毒和5种双链DNA病毒。在这些病毒中,发现了一种与果蝇A病毒较相似的新病毒,克隆出其依赖RNA的RNA聚合酶(RdRP)基因1-1 932位核酸序列,经Blast比对和系统进化分析,在氨基酸序列中发现RdRP掌型亚结构域保守区呈现复制酶置换四体病毒科(Permutotetraviridae)病毒所具有的"C-A-B"排列样式,确定该病毒是一种新的类复制酶置换四体病毒,暂命名为Laodelphax striatellus permutotetra-like virus(LsPLV)。这是首次在半翅目昆虫中发现类复制酶置换四体病毒。本研究表明灰飞虱体内昆虫病毒种类较为丰富,为今后利用昆虫病毒生物防治灰飞虱奠定了基础。
- 朴君张璐婕朴敬爱周益军周益军
- 关键词：灰飞虱昆虫病毒
- 宏病毒组测序检测豆蚜田间种群病毒种类
- 2023年
- 为探究蚜虫体内携带的病毒种类,采集江苏地区豆蚜田间种群,鉴定种类后,提取豆蚜总RNA,以片段化的mRNA为模板构建测序文库,利用宏病毒组测序技术检测分析豆蚜体内的病毒种类,并对获得的2个新病毒进行检测鉴定。结果显示,测序数据经拼接、比对和分类注释,最终共得到病毒序列177条,与24种病毒序列一致或同源性较高,包括5种植物病毒(属于5个病毒科)和19种昆虫病毒(涉及9个科和6种暂未分类病毒);对植物病毒中测序丰度最高的种类进行基因检测,获得序列经Blast比对,与其同源性较高的病毒均来自细胞质弹状病毒属,并且它们具有相同的保守区,确定该病毒为一种新的细胞质弹状病毒,暂命名为Aphis craccivoraassociated rhabdovirus(AcARV);基于病毒L蛋白系统进化分析显示,AcARV与水稻条纹花叶病毒(RSMV)构成最小分支,说明这2种病毒在进化上最为近缘;鉴定的多数昆虫病毒种类在蚜虫中鲜有报道;通过RT-PCR和蛋白免疫印迹在豆蚜体内均检测出昆虫病毒(HiPV)衣壳蛋白VP1,证实了HiPV对豆蚜的感染,这是首次在蚜虫体内发现HiPV,HiPV豆蚜分离物VP1基因与日本、江苏灰飞虱分离物核苷酸同源性分别为95.5%,99.0%。研究结果表明,豆蚜体内携带多种植物病毒,并含有一种新的弹状病毒AcARV,同时,豆蚜体内昆虫病毒种类非常丰富,HiPV可感染蚜虫。
- 朴君靳道然朴敬爱季英华孙枫李硕
- 关键词：豆蚜病毒种类
- 灰飞虱内生病毒HiPV外壳蛋白VP1多克隆抗体的制备及在病毒检测中的应用被引量：1
- 2019年
- 【目的】前期发现水稻条纹病毒(rice stripe virus,RSV)可与介体灰飞虱Laodelphax striatellus体内的HiPV病毒(Himetobi P virus,HiPV)互作。本研究旨在制备HiPV外壳蛋白VP1的多克隆抗体,并评估其在HiPV病毒检测中的可用性,以为深入研究HiPV-RSV和HiPV-灰飞虱的互作机制提供技术支持。【方法】以RT-PCR方法从灰飞虱成虫体内扩增HiPV主要外壳蛋白基因VP 1,然后将VP 1基因亚克隆至原核表达载体pET-32a中,构建表达载体pET-VP 1。将重组质粒转化大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3),经IPTG诱导、Ni 2+-NTA亲和层析纯化,获得重组蛋白,免疫新西兰大白兔,制备抗体。【结果】从灰飞虱体内克隆到774 bp的HiPV外壳蛋白基因VP 1,经原核表达、纯化,获得分子量约47.5 kD的融合蛋白,免疫新西兰大白兔后获得VP1多克隆抗体。该抗体间接ELISA效价达1∶819 200,与HiPV外壳蛋白VP1有特异性反应,而与灰飞虱蛋白无交叉反应。利用该多克隆抗体建立了检测单头灰飞虱成虫体内HiPV的Western blot和免疫捕获RT-PCR方法,检测结果显示HiPV在携带和不携带RSV的灰飞虱高亲和性群体内均广泛存在。【结论】利用制备的HiPV的VP1多克隆抗体可特异性检测灰飞虱体内HiPV。本研究为HiPV病毒的快速检测以及HiPV-RSV互作、HiPV-灰飞虱互作研究提供了技术支持。
- 朴君许春玲朴敬爱周益军李硕
- 关键词：灰飞虱VP1基因多克隆抗体病毒检测
