徐瑞凤
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
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- LMP-1增强型绿色荧光蛋白真核表达载体的构建
- 2010年
- 目的构建EB病毒潜伏膜蛋白-1(LMP-1)增强型绿色荧光蛋白真核表达载体。方法用PCR的方法从EB病毒阳性的鼻咽癌组织中调取EB病毒潜伏膜蛋白-1的基因,然后定向克隆到真核表达质粒pEGFP-C3上,以此构建成重组质粒pEGFP-C3-LMP1。结果经酶切及测序鉴定,确定已获得重组质粒pEGFP-C3-LMP1。结论在增强型绿色荧光蛋白真核表达质粒中已成功克隆了EB病毒LMP-1基因。
- 徐瑞凤石敏尤长宣吕成伟罗荣城廖旺军
- 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白-1增强型绿色荧光蛋白
- 超声微泡造影剂介导LMP-1基因转染树突状细胞的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨超声微泡造影剂介导LMP-1基因转染外周血来源的树突状细胞的有效性及最佳的超声辐照参数。方法体外培养树突状细胞,在不同的超声波强度、机械指数、照射时间及不同的超声微泡造影剂浓度作用下,观察LMP-1基因与绿色荧光蛋白共表达的融合重组质粒pEGFP-C3-LMP1在树突状细胞的定向转染。在荧光显微镜下观察荧光蛋白质粒在树突状细胞中的表达,流式细胞仪评价重组质粒的转染效率,台盼蓝染色检测细胞活性。结果超声辐照机械指数1.0、照射时间60s、微泡造影剂浓度为20%,达到最佳的基因转染效率(14.37±2.12)%,且细胞生存率>90%。结论微泡造影剂在超声辐射下可以有效地介导基因转染树突状细胞。
- 徐瑞凤石敏尤长宣吕成伟罗荣城廖旺军
- 关键词：微泡造影剂超声树突状细胞潜伏膜蛋白1基因转染
- 超声引导下浅表淋巴结穿刺活检308例临床分析被引量：7
- 2011年
- 目的分析308例超声引导下浅表淋巴结穿刺活检病例资料,探讨超声引导下浅表淋巴结穿刺活检在诊断肿大淋巴结性质中的临床应用价值。方法收集2003年1月-2010年6月在南方医院肿瘤中心接受超声引导下淋巴结穿刺活检术的308例患者资料。统计其年龄、性别、淋巴结大小、部位、病理类型,分析其淋巴结大小、部位、病理类型对病理诊断结果的影响。结果 308例患者平均年龄53.4(12～87)岁,男192例,女116例。308例中,307例取材满意,组织学诊断成功率99.7%。穿刺病理结果示:恶性病变232例(75.3%),良性病变41例(13.3%),假阴性25例(8.1%),性质不确定9例(2.9%),取材不佳1例(0.3%)。恶性淋巴瘤首次穿刺确诊率为82.8%(24/29)。结论超声引导下浅表淋巴结穿刺活检术安全、有效,是临床上诊断淋巴结性质不可取代的方法。采用16G粗针切割取材对以往认为需进行切除活检才可准确诊断的恶性淋巴瘤也有很好的诊断价值。
- 徐瑞凤王妮娜陈锦章李爱民廖旺军
- 关键词：淋巴结
- 负载LMP-1基因的树突状细胞诱导CTL对鼻咽癌细胞的杀伤效应被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨超声联合微泡造影剂能否增强绿色荧光蛋白(GFP)质粒pEGFP-C3-LMP-1转染树突状细胞(Dendritic cells,DC),进而探讨转染LMP-1基因的DC诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对鼻咽癌(NPC)细胞株的体外杀伤作用。方法:体外培养的人DC分为四组:①单纯质粒组(A组):加入质粒;②超声照射组(B组):质粒+超声辐照;③微泡造影剂组(C组):质粒+微泡造影剂;④超声+微泡造影剂组(D组):质粒+微泡造影剂+超声辐照。荧光显微镜观察GFP质粒在DC内的表达,流式细胞仪评价GFP质粒的转染效率。另将体外培养的DC分为两组用于检测DC表面表型的表达及体外杀伤实验:①空白对照组,单纯培养的DC;②基因转染组,具体实验方法同上述D组。流式细胞仪检测DC表面分子表型的表达。DC和T细胞混合共培养获得的CTL为效应细胞,LMP-1表达阳性的NPC细胞株C666-1为靶细胞,按效靶比10:1的比例混合培养24h后,MTT法检测CTL对靶细胞的杀伤作用。结果:D组DC内有较多的绿色荧光表达,且转染效率最高(14.86±2.36)%,和其余各组均有显著性差异。LMP-1基因转染组DC表面标志CD80、CD83、CD86、CD40、HLA-DR的表达明显高于对照组,所诱导产生CTL对靶细胞有明显的杀伤作用,其杀伤效率为(41.72±3.53)%,明显高于空白对照组(7.62±2.36)%。结论:超声联合微泡造影剂可有效地介导GFP质粒转染DC。LMP-1基因转染组DC诱导产生特异性的CTL对靶细胞有明显的杀伤作用。
- 徐瑞凤石敏尤长宣吕成伟罗荣城廖旺军
- 关键词：超声微泡造影剂树突状细胞鼻咽癌
- 树突状细胞在鼻咽癌免疫治疗中的研究进展
- 2010年
- 徐瑞凤廖旺军
- 关键词：鼻咽癌树突状细胞免疫
