张茂 作品数:29 被引量:114 H指数:7 供职机构: 龙岩学院生命科学学院 更多>> 发文基金: 福建省自然科学基金 国家科技重大专项 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 医药卫生 更多>>
黑曲霉木聚糖酶基因的猪密码子优化及表达 本研究改变了黑曲霉木聚糖酶基因密码子的使用频率,优化了一些在猪体内稀有密码子,从而提高了密码子在猪的适应性。重组质粒pcDNA-xynB3转染PK15细胞时,用了包含xynB的重组质粒pcDNA-xynB进行比较,保证了... 张健 张茂 许惠 李紫聪 刘德武 蔡更元 吴珍芳关键词:密码子优化 分泌表达 动物科学专业《家畜育种学》教学改革与实践 被引量:10 2018年 为适应地方高等院校培养应用型人才的需要,对动物科学专业《家畜育种学》课程进行教学改革,寻求适合动物科学专业发展特色的教学方法及模式,提高学生学习能力及学习兴趣,增强学生的实践能力,为学生将来从事本行业工作打好坚实的专业基础。 张茂 李虹仪 李焰 杨小燕关键词:动物科学 教学改革 日粮维生素E水平对肉鸡生长性能和免疫器官发育的影响 被引量:7 2016年 为了探讨日粮维生素E水平对肉鸡生长性能和免疫器官发育的影响,试验选取1日龄体重相近的健康AA肉鸡母鸡160羽,随机分为5组,每组4个重复,每个重复8羽。分别在玉米-豆粕型基础日粮中添加0、25、50、75和100 mg/kg维生素E,试验期为42 d。结果表明,日粮添加维生素E具有提高肉鸡生长性能的趋势,其中日粮添加50 mg/kg维生素E使22~42 d和0~42 d肉鸡平均日增重分别提高了4.23%和2.90%(P〉0.05);添加75 mg/kg维生素E使22~42 d和0~42 d肉鸡平均日采食量分别降低了6.75%和6.92%(P〉0.05),使0~21 d和0~42 d肉鸡料肉比分别降低了7.78%和7.04%(P〉0.05);日粮添加维生素E对3周龄肉鸡免疫器官重和免疫器官指数无显著影响;添加25和100 mg/kg维生素E提高了6周龄肉鸡胸腺重(P〈0.05)和胸腺指数(P〉0.05)。肉鸡日粮中添加维生素E具有提高肉鸡生长性能趋势,可改善肉鸡胸腺发育水平。 张敏 黄藏宇 孙艳发 张茂 李虹仪 许卫华 李焰 黄其春关键词:肉鸡 维生素E 免疫器官指数 转manA基因小鼠F_1代表达效果的检测分析 2014年 将携带β-甘露聚糖酶基因manA的转基因FVB原代小鼠与野生型FVB小鼠进行繁殖得到F1代,通过PCR和Southern blot鉴定出F1代转基因小鼠。提取转基因小鼠腮腺、舌下腺、下颌下腺、心脏、肝脏等组织的总RNA,通过RT-PCR检测出manA在转基因小鼠的腮腺和舌下腺组织特异性表达。进行定量PCR验证出manA基因在302号家系小鼠的舌下腺中表达量最高,证明β-甘露聚糖酶基因manA在转基因小鼠的腮腺和舌下腺特异性表达成功。对转基因小鼠唾液进行收集测定β-甘露聚糖酶活性,在302号家系中检测到酶活性较高。通过代谢试验测定饲料中粗蛋白、粗纤维和粗脂肪的消化率,结果显示,与非转基因小鼠相比,302号家系转基因小鼠对饲料中粗蛋白、粗纤维的表观消化率无明显差异,而粗脂肪的消化率得到显著提高;304号家系转基因小鼠对饲料中粗蛋白、粗脂肪、粗纤维消化率方面均无明显差异。 张茂 李紫聪 许惠 张冠冠 刘德武 吴珍芳关键词:转基因 木聚糖酶-甘露聚糖酶融合酶基因Linker优化及其在猪肾pK15细胞中共表达 被引量:5 2013年 [目的]构建木聚糖酶(XynB)与甘露聚糖酶(ManA)的融合酶基因,使其能在哺乳动物表达系统中表达并分泌兼有木聚糖酶和甘露聚糖酶活性的双功能融合酶。[方法]利用基因融合技术(SOE—PCR),把11条Linker融合到木聚糖酶(XynB)和甘露聚糖酶(ManA)基因间,构建真核表达载体,经转染猪肾细胞(pKl5)收集细胞培养液,用DNS法测定其酶活并进行酶学分析。[结果]经表达分析12条不同Linker构建的融合酶与亲本酶酶活,发现用Linkera3、pS3和具有“自我剪切”能力T2A构建的融合酶在木聚糖酶和甘露聚糖酶活性都显著高于两亲本酶。融合酶XynB-a3-ManA的木聚糖酶和甘露聚糖酶酶活比亲本酶XynB和ManA分别提高了54.06%和104.40%;该融合酶在酸性环境3.0—7.0起作用,对pH3.08.0具有一定的耐受力。[结论]首次获得可在哺乳动物系统表达分泌的增强型双功能XynB—ManA融合酶。 张献伟 张冠冠 吴珍芳 孟繁明 刘德武 张茂 许卫华 郑恩琴 贺晓燕 李真 李紫聪关键词:木聚糖酶 甘露聚糖酶 LINKER 酶活测定 胎次和配种季节对长白、大白母猪繁殖性能的影响 被引量:13 2017年 为了分析不同胎次、配种季节对母猪繁殖性能的影响,笔者对江西省赣州市某猪场2015年长白母猪、大白母猪的繁殖记录进行统计分析,并按胎次及配种季节进行分组,分析其在不同胎次、配种季节条件下的繁殖性能差异。结果表明:长白母猪和大白母猪3~5胎繁殖性能较好,第1胎的初生均重、断奶均重最低;长白母猪第3胎窝产活仔数最高,显著高于1,2,6,7,8胎(P<0.05);大白母猪第4胎窝产活仔数最高,显著高于第1,2胎(P<0.05);长白母猪夏季配种窝产仔数、窝产活仔数最高,初生均重、断奶均重春季配种最高;大白母猪不同季节配种窝产仔数差异不显著(P>0.05),夏季、秋季配种产活仔数显著高于冬季(P<0.05)。说明不同胎次、配种季节对长白、大白母猪繁殖性能有较大影响。 张茂 郑恩琴 许卫华 孙艳发 李焰 李虹仪关键词:胎次 配种季节 窝产仔数 产活仔数 动物科学专业《分子生物学》教学改革的探索 被引量:4 2014年 通过教学改革寻求适合专业特点的教学方法,提高教学质量,可为学生就业打好坚实专业基础。从教材选择、教学模式、实验教学及考核方式等方面对动物科学专业《分子生物学》教学改革进行了探讨。 李虹仪 张茂 马景蕃关键词:分子生物学 教学改革 教学模式 shRNA抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)JXA1-R株在Marc-145细胞中复制及抗PRRSV细胞株的建立 被引量:1 2013年 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是世界上主要的猪传染性疾病之一,目前,疫苗和抗病毒药物只能提供有限的保护。本研究选择猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)JXA1-R株ORF1a、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6、ORF7的保守区域为靶序列,利用pSilencer2.1-U6neo构建shRNA表达载体并转染Marc-145细胞。经实时荧光定量PCR、细胞病变及病毒滴度分析,结果显示,ORF1a-4-shRNA、ORF3-1-shRNA、ORF6-2-shRNA干扰质粒能明显抑制病毒基因的转录,并有效抑制PRRSV在Marc-145上的增殖,显著降低病毒滴度。最后筛选ORF6-2-shRNA表达质粒转染猪胎儿成纤维细胞,构建稳定转染细胞株,为抗PRRSV转基因猪的生产奠定了基础。 李红梅 贺聪 张茂 孟轩 张建峰 张健騑 郭鹏举关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 RNA干扰 转xynB基因小鼠模型的建立 本研究构建腮腺特异表达木聚糖酶xynB基因的重组质粒,通过原核显微注射制备出转基因小鼠,通过检测验证转基因功能,为制备腮腺表达木聚糖酶的转基因猪提供依据. 张茂 许惠 张健 邹娴 李紫聪 刘德武 蔡更元 吴珍芳关键词:木聚糖酶 转基因 小鼠模型 黑曲霉β-甘露聚糖酶基因manA在PK15细胞中的分泌表达 被引量:2 2011年 通过RT-PCR方法,从黑曲霉总RNA中克隆出β-甘露聚糖酶基因manA的成熟肽编码序列。将其与猪腮腺分泌蛋白(parotid secretory protein,PSP)基因的信号肽序列通过重叠延伸PCR方法得到拼接片段,并插入到真核表达载体pcD-NA6.0/HisTMA中,得到重组质粒pcDNA-PSmanA。重组质粒经过PCR、酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且读码框完全正确。在脂质体介导下将pcDNA-PSmanA转染猪肾(PK15)细胞进行分泌表达,通过RT-PCR方法证实其在PK15细胞中表达,并在细胞培养液中检测酶活性得到β-甘露聚糖酶基因酶活性为14.5 IU/mL。 邹娴 张茂 许惠 林纯 贺晓燕 刘德武 蔡更元 吴珍芳关键词:黑曲霉 Β-甘露聚糖酶 重叠延伸PCR PK15细胞